文章摘要
张正卫,俞俊峰,王荣根,阮苗苗,张润洁,方 斌,王 冠,王 盈,戴一凡.成年小鼠神经干细胞培养、鉴定以及多不饱和脂肪酸含量的测定[J].南京医科大学学报,2017,(4):394~398
成年小鼠神经干细胞培养、鉴定以及多不饱和脂肪酸含量的测定
Cultivation and identification of neural stem cells in adult mice and determination of polyunsaturated fatty acids
投稿时间:2016-10-25  
DOI:10.7655/NYDXBNS20170402
中文关键词: 神经干细胞  神经球  脑室下区  多不饱和脂肪酸
英文关键词: neural stem cells  neurosphere  subventricular zone  PUFAs
基金项目:国家自然科学基金(81570402);南京医科大学科技发展基金(2011NJMU256)
作者单位
张正卫 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166南京医科大学附属淮安市第一人民医院病理科江苏 淮安 223300 
俞俊峰 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
王荣根 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
阮苗苗 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
张润洁 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
方 斌 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
王 冠 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
王 盈 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
戴一凡 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室江苏 南京 211166 
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中文摘要:
      目的:探讨成年小鼠大脑室下区神经干细胞(neural stem cells, NSCs)体外分离培养和鉴定的方法,测定体外培养的神经干细胞多不饱和脂肪酸n6/n3的比例和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)含量。方法:取8~10周龄的C57BL/6小鼠室下区细胞,进行体外悬浮培养,观察NSCs形成情况,免疫荧光鉴定NSCs干细胞特性及体外分化能力,气相色谱鉴定NSCs的多不饱和脂肪酸含量中n6/n3比例及DHA含量。结果:体外培养的细胞可以增殖,并可以连续传代;免疫荧光显示神经干细胞呈抗巢蛋白阳性,神经干细胞在分化培养基培养时可分化为NeuN、TuJ1、GFAP、O4阳性细胞;神经干细胞的多不饱和脂肪酸含量较鼠尾高。结论:采用无血清培养基成功获得成年小鼠室下区的神经干细胞,具有增殖、自我更新和分化的能力;神经干细胞的n3多不饱和脂肪酸含量明显高于鼠尾中的含量,且DHA多不饱和脂肪酸占较高比例。
英文摘要:
      Objective:To in vestigate the method of culturing neural stem cell s(NSCs) in vitro and measurement of n6/n3 ratios and DHA contents in these NSCs cultured from subventricular zone in adult mice. Methods:Subventricular zone was isolated from the brains of 8~10 weeks old C57BL/6 mice, and the NSCs were cultured in floating in vitro. Some marker genes of NSCs and differentiated cells were detected by immunofluorescendce; polyunsaturated fatty acids and n6/n3 ratios were measured by gas chromatography. Results:NSCs proliferated continuously in vitro, most cells were Nestin positive. NeuN,TuJ1,GFAP and O4 positive cells were detected by immunofluorescence in differentiated neural cells. Polyunsaturated fatty acids were richer in NSCs. Conclusion:NSCs cultured from subventricular zone in adult mice have proliferation and self-renewal abilities. n3 polyunsaturated fatty acids and DHA in NSCs are significantly higher than those in tails.
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