目的：探讨细针穿刺活检（fine needle aspiration biopsy，FNAB）联合BRAF-V600E基因检测对甲状腺可疑恶性结节良恶性的鉴别诊断价值。方法：回顾性分析经外科手术后获得常规病理结果的101个甲状腺结节，术前超声诊断为可疑恶性结节，并同时行FNAB及BRAF-V600E基因检测，以术后常规病理结果为金标准，评价两种不同方法单独和联合运用对甲状腺可疑恶性结节的诊断价值。结果：获得术后病理结果的100例患者101个甲状腺可疑恶性结节中，良性21例，恶性80例。BRAF-V600E基因突变型结节75个，其中FNAB诊断阳性结节70个，阴性结节5个。BRAF-V600E基因野生型结节26个，其中FNAB诊断阳性结节9个，阴性结节17个。FNAB对甲状腺可疑恶性结节的灵敏度及特异度分别为93.70%、80.95%，BRAF-V600E基因检测对甲状腺可疑恶性结节的灵敏度及特异度分别为92.50%、95.24%，FNAB联合BRAF-V600E基因检测对甲状腺可疑恶性结节的灵敏度及特异度分别为98.59%、100.00%。结论：FNAB联合BRAF-V600E基因检测能够提高对甲状腺可疑恶性结节良恶性鉴别诊断效能，尤其对甲状腺乳头状癌特异性更高，值得临床推广应用。