Page 11 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第12期 吴晓光，杨传熙，张 晶，等. Alamandine通过结合MrgD受体促进大鼠皮下脂肪间充质干细胞
2021年12月 成脂分化［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（12）：1713-1720，1727 ·1717 ·

A day 1 day 3 day 6 day 10
Alamandine（μmol/L） - + - + - + - +
ACC 280 kDa
FAS 273 kDa
PPAR⁃γ 53 kDa
CEBP⁃α 48 kDa
β⁃actin 45 kDa
B 0.8 Alamandine（-） ** 1.5 ** 1.0 * 1.0 **
CEBP⁃α蛋白相对表达量 0.6 * FAS蛋白相对表达量 1.0 * ACC蛋白相对表达量 0.8 ** PPAR⁃γ蛋白相对表达量 0.8 *
Alamandine（+）
0.6
0.6
0.4
0.4
0.4
0.5
0.2
0.2
0.2
day 1 day 3 day 6 day 10
day 1 day 3 day 6 day 10
day 1 day 3 day 6 day 10
C 0.0 day 1 day 3 day 6 day 10 0.0 Alamandine（+）day 1 0.0 Alamandine（-）day 3 0.0 Alamandine（+）day 3
Alamandine（-）day 1

Alamandine（-）day 6 Alamandine（+）day 6 Alamandine（-）day 10 Alamandine（+）day 10

A：不同处理时间下 Alamandine 对 ADSC 的脂肪细胞生成标志物蛋白表达的影响；B：蛋白表达定量分析，与空白对照组相比，P < 0.05，
*
P < 0.01（n=3）；C：光镜观察ADSC分化情况（×100）。
**
图2 Alamandine促进大鼠ADSC成脂分化且成时间依赖性
Figure 2 Alamandine promoted adipogenic differentiation of ADSCs in a time⁃dependent manner

AngⅡ后，大鼠ADSC成脂分化效应减弱，AngⅡ组相 2.4 Alamandine 通过作用于大鼠 ADSC MrgD 受体
较于 Sham 组，成脂分化相关蛋白表达水平明显降 达到促成脂分化效应
低，细胞内甘油三酯和总胆固醇水平同样降低且差 为了验证Alamandine是否通过作用于大鼠AD⁃
异有统计学意义（P < 0.05，n=3，图 3A~C）。光镜及 SC 的 MrgD 受体达到促成脂分化的效应，应用了
油红 O 染色观察脂肪细胞分化情况，（图 3D、E），同 MrgD受体拮抗剂D⁃pro7。经检测发现，Alamandine+
样发现 AngⅡ抑制成脂分化。可以得出 AngⅡ是通 D⁃pro7 组相较于 Alamandine 组，脂肪细胞生成标志
过作用于 ADSC 的 AT1 受体达到抑制成脂分化的 物 CEBP⁃α、PPAR⁃γ、ACC、FAS 表达水平明显降低
［5］
效应 。有趣的是，在 AngⅡ和 Alamandine 共处理 （图 4A、B），总胆固醇和甘油三酯含量也明显降低
大鼠ADSC 后，AngⅡ减弱了Alamandine 对大鼠AD⁃ （图4C），且差异有统计学意义（P < 0.05，n=3），油红
SC的促成脂分化效应。 O 染色和光镜观察提示脂肪细胞数量也显著减少