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第41卷第4期
               ·576 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年4月


                  乳腺癌的复发、转移是影响乳腺癌患者预后的                          1.2  方法
              重要因素，研究乳腺癌组织侵袭转移情况，寻求新                            1.2.1 免疫组织化学染色
              的靶向治疗手段，对于改善乳腺癌患者的预后具有                                 所有手术标本均经 10%中性福尔马林液固定，
              非常重要的意义。研究表明，恶性肿瘤的生物学行                            石蜡包埋及4 μm连续切片。鼠抗人α⁃SMA抗体、兔
              为不仅取决于肿瘤细胞本身，肿瘤微环境对肿瘤的                            抗人CD4抗体、兔抗人CD8抗体均购于北京中杉金
              发生发展也起着决定性作用。肿瘤相关性成纤维                             桥生物技术有限公司。采用已知的阳性切片作为
              细胞（cancer⁃associated fibroblast，CAF）是肿瘤微环         阳性对照，阴性对照用PBS液代替一抗。
              境中重要的成分，它分泌多种信号分子，包括炎症                            1.2.2 结果判定
              细胞因子、趋化因子、生长因子等，这些因子通过改                                α⁃SMA 阳性的细胞定位于乳腺间质内，胞质呈
              变肿瘤微环境来刺激肿瘤细胞，同时重塑肿瘤细胞                            棕黄色或棕褐色，正常乳腺间质成纤维细胞不表达
              的细胞外基质      ［1-2］ 。正是这些特性，CAF通过促进肿                α⁃SMA，因此以乳腺间质中α⁃SMA 阳性细胞代表
              瘤生长、血管生成、耐药性、侵袭和转移，为肿瘤的                           CAF，而表达α⁃SMA 的乳腺导管及腺体基底部的肌
              发生发展提供了合适的条件 。尽管CAF可能对乳                           上皮细胞及间质小血管不计为阳性细胞。随机选
                                       ［3］
              腺癌的进展起到很强的作用，但关于 CAF、CD4 、                        取10个高倍视野（×400）约200个细胞，根据阳性细
                                                          +
              CD8 T 淋巴细胞与乳腺癌发生发展的关系，尤其对                         胞所占观察细胞数的百分比计分：1分（阳性细胞数
                  +
              淋巴结转移影响的相关研究甚少。                                   ≤10%），2 分（10% ＜ 阳 性 细 胞 数 ≤50%），3 分
                  本文通过检测乳腺浸润性导管癌组织及转移                           （50%＜阳性细胞数≤75%），4 分（75%＜阳性细胞
              淋巴结中CAF［以CAF 的特异性蛋白α⁃平滑肌肌动                        数）；染色强度的评分：0分（无着色），1分（淡黄色），
              蛋白（α⁃smooth muscle actin，α⁃SMA）作为免疫酶标             2 分（棕黄色），3 分（棕褐色）。将两者分值相乘：
              的抗原］及 CD4、CD8 的表达，并结合临床病理特征                       0~3 分（-），4~5 分（+），6~7 分（++），≥8 分（+++），其
              进行统计学分析，从而探寻CAF诱导的免疫抑制与                           中+~+++为阳性表达。CD4、CD8阳性表达定位于淋
              乳腺癌发生发展及淋巴结转移程度之间的相关性，                            巴细胞膜，观察显色强度：无显色计 0 分，淡黄色计
              进一步了解 CAF、CD4 及 CD8 T 淋巴细胞是否参与                    1 分，棕黄色计2分，棕褐色计3分；观察显色面积：进
                                  +
                                         +
              淋巴结的转移，为用CAF和免疫细胞为靶点的治疗                           行视野淋巴细胞计数，＜5%淋巴细胞着色计 0 分，
              来改善未来乳腺癌患者的生存及预后提供实验依据。                           5%~25%淋巴细胞着色计 1 分，25%~50%淋巴细胞
                                                                着色计 2 分，＞50%淋巴细胞着色计 3 分；将两者分
              1  对象和方法
                                                                值相乘：＜2分为阴性，≥2分为阳性。
              1.1  对象                                           1.3  统计学方法
                  收集南通大学第二附属医院病理科 2010—                              所有数据分析均在 SPSS 21.0 软件上进行。采
              2014年行乳腺癌改良根治术的手术标本110例（均为                        用卡方检验对α⁃SMA、CD4、CD8在不同亚组患者之
              浸润性导管癌），术前未经过任何放疗、化疗及内分泌                          间的表达差异进行比较。采用配对样本卡方检验
              治疗，所有患者均为女性，发病年龄32~79岁，平均年                        对α⁃SMA 表达与 CD4、CD8 表达的相关性进行分
              龄 51 岁。按照肿瘤大小分组：肿瘤≤2 cm 64 例，肿                    析。P＜0.05为差异具有统计学意义。
              瘤＞2 cm 46 例；按照 WHO 的浸润性导管癌组织
                                                                2  结 果
                         ［4］
              学分类标准 分类：G1 级 32 例，G2 级 43 例，G3 级
                                         ［4］
              35 例；按照TNM临床分期标准 进行分期：Ⅰ期+Ⅱ                        2.1  α⁃SMA、CD4及CD8在浸润性导管癌组织与癌
              期89例，Ⅲ期+Ⅳ期21例；按照有无腋窝淋巴结转移                         旁组织中的表达及意义
              情况分组：淋巴结无转移67例；淋巴结有转移43例。                              α⁃SMA 阳性表达定位在肿瘤间质成纤维细胞
              其中 43 例有转移的淋巴结中有 11 例为微转移淋                        的 细 胞 浆 中（图 1），110 例 乳 腺 癌 中 有 52 例
              巴结，32 例为宏转移淋巴结（肿瘤转移灶最大径                           （47.27%）呈阳性表达，其中8例呈强阳性；癌旁正常
              ＞0.2 mm，但不超过 2 mm 为微转移；淋巴结转移                      乳腺组织未见阳性表达。α⁃SMA 在乳腺癌组织中
              灶最大径＞2 mm，则为宏转移）。选取乳腺癌癌旁                          的阳性率显著高于癌旁正常乳腺组织，两者之间的
              3 cm 外的正常乳腺组织作为对照。本研究经过医                          α⁃SMA表达有显著性差异（χ =68.095，P＜0.001）。
                                                                                          2
              院伦理委员会批准。                                              CD4、CD8 阳性表达定位于淋巴细胞膜（图 2），
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