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第44卷第1期 肖心儒，范 亮，施宇佳，等. A2M在慢性阻塞性肺疾病中的表达及其与免疫细胞浸润的
2024年1月 相关性［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（01）：001-011，059 · 5 ·

表2 不同EOS水平COPD患者的临床特征
Table 2 Clinical characteristics of COPD patients with different EOS levels

Clinical characteristics EOS<300 cells/μL（n=17） EOS≥300 cells/μL（n=8） Statistic P
Gender［n（%）］ χ =0.003 0.958 *
2
Male 15（88.2） 7（87.5）
Female 02（11.8） 1（12.5）
Age（years，x ± s） 68.12 ± 10.62 67.88 ± 9.340 t=-0.055 0.956 *
BMI（kg/m ，x ± s） 24.09 ± 2.910 23.52 ± 3.380 t=-0.434 0.668 *
2
Smoking history［n（%）］ χ =2.056 0.152 *
2
Yes 10（58.8） 7（87.5）
No 07（41.2） 1（12.5）
FEV1/FVC（x ± s） 50.27 ± 11.10 45.37 ± 10.16 t=-1.056 0.302 *
FEV1%pred（x ± s） 57.47 ± 19.81 52.92 ± 18.10 t=-0.550 0.587 *
FeNO（ppb，x ± s） 22.18 ± 8.630 31.85 ± 10.07 t=2.480 0.021 *
GOLD stage［n（%）］ 0.933 *
Ⅰ（FEV1% pred ≥80%） 03（17.6） 1（12.5） - -
Ⅱ（50%≤FEV1% pred < 80%） 08（47.1） 4（50.0） - -
Ⅲ（30%≤FEV1% pred < 50%） 05（29.4） 2（25.0） - -
Ⅳ（FEV1% pred < 30%） 1（5.9） 1（12.5） - -
*
EOS：eosinophil；FeNO：fraction of exhaled nitric oxide. Fisher exact test.
CD8 T 细胞、激活的自然杀伤（natural killer，NK）细 此指标作为COPD生物标志物的诊断价值最佳。
+
胞、M2 巨噬细胞在 COPD 患者肺组织中异常下调， 2.6 A2M与免疫细胞的相关性
而M0巨噬细胞上调（图2B）。此外，通过Pearson相 进一步验证 25 例 COPD 患者外周血中 A2M 蛋
关分析发现A2M与M0巨噬细胞呈负相关，与M2巨 白水平与免疫细胞的相关性（表 3）。结果显示，
噬细胞和静息肥大细胞呈正相关（图2C）。 A2M 与 LYM（图 5A）和 MONO（图 5B）呈正相关（P <
2.4 A2M与COPD免疫相关通路 0.05），与NEU、EOS、BASO、中性粒细胞/淋巴细胞比
利用 GSVA 和 ssGSEA 评估正常样本和 COPD 值（neutrophil⁃lymphocyte ratio，NLR）、单核细胞/淋
样本之间KEGG富集通路以及免疫相关通路的差异 巴细胞比值（monocyte⁃lymphocyte ratio，MLR）无明
（图3A、B），共获得184个KEGG 通路评分矩阵。各 显相关。我们前期研究表明 A2M 与肺功能相关 ，
［9］
通路在不同亚组中的不同评分提示COPD患者与健 因此，本研究进一步分析了GOLD Ⅰ~Ⅱ级和GOLD
康人之间各通路活性存在差异，这可能是决定 Ⅲ~Ⅳ级中 A2M 与 COPD 患者免疫细胞的相关性
COPD 发生发展的重要因素。此外，Pearson 相关分 （表4），结果显示，在GOLD Ⅰ~Ⅱ级中A2M与MONO
析揭示了 A2M 基因和富集分子途径之间的相关性 呈正相关。同时，EOS关系到COPD稳定期的治疗，
（图 3C），结果显示，A2M 与凋亡、B 细胞受体通路、 我们分析了 EOS ≥300 个/μL 组和 EOS < 300 个/μL
趋化因子通路、细胞因子⁃细胞因子受体相互作用及 组中 A2M 与 COPD 患者免疫细胞的相关性（表 4），
NK细胞介导的细胞毒性呈负相关。 结果显示，EOS < 300个/μL组中A2M与MONO呈正
2.5 COPD患者与健康对照组外周血中A2M的表达 相关，与EOS呈负相关，EOS≥300个/μL组中A2M与

RT⁃qPCR结果显示，与对照组相比，A2M mRNA LYM呈正相关，与MLR呈负相关。
在 COPD 患者外周血有核细胞中表达明显降低（图 2.7 A2M 与巨噬细胞 Raw264.7 细胞向 M2 型极化
4A），ELISA 实验结果显示，COPD 患者外周血血浆 的相关性
A2M 的蛋白表达较对照组下降（图 4B）。ROC 曲线 与正常巨噬细胞相比，IL⁃4和IL⁃13共刺激组的
评估A2M作为COPD生物标志物的价值（图4C），当 M2型巨噬细胞表面标志物Arg⁃1表达升高（图6A），
界 值（cut ⁃ off value）为 5.495 时 ，A2M mRNA 作 为 提示 M2 型巨噬细胞诱导成功。在 M2 型巨噬细胞
COPD 生物标志物的灵敏度为 92.0%，特异度为 中敲低A2M后，A2M mRNA表达降低（图6B），且M2
61.5%，AUC为0.815（95%CI：0.698~0.932，P < 0.001）， 型巨噬细胞表面标志物Arg⁃1表达降低（图6C）。