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第43卷第8期      韩雨清，牛海晨，李海英，等. 米非司酮通过抑制糖皮质激素受体缓解应激后抑郁样行为的研究［J］.
                  2023年8月                     南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（8）：1102-1107                      ·1103 ·


                    随着生活节奏加快，抑郁症成为一种具有高自                          质细胞激活情况，并通过行为学评估焦虑与抑郁程
                杀率、高致残率、高患病率特征的常见精神病，尤其                           度，然后对应激后小鼠进行 RU486 药物处理，进一
                是青少年学生，心理尤为脆弱，易感性增加。目前，                           步观察其中缝背核区域内GC受体和小胶质细胞的
                药物治疗仍然是治疗抑郁症的首选方法。然而，这                            激活情况，以及抑郁行为学的变化。
                些药物往往具有不良反应多、起效慢、停药易复发
                                                                  1  材料和方法
                等缺点。研究新型的抗抑郁药物仍然是亟需解决
                的关键问题。                                            1.1  材料
                    应激是指机体在受到各种内外环境因素、社会                              8周龄C57BL/6雄性小鼠，购自山东济南鹏悦实
                因素和心理因素等刺激时出现的全身非特异性适                             验动物繁育有限公司（生产许可证号：SCXK 鲁
                应反应，又称应激反应，其包括多种生理和心理方                            2019003）。实验过程中小鼠饲养于徐州医科大学动
                                                  ［1］
                面的改变并常常伴有焦虑、抑郁等症状 ，研究显示                           物实验中心，生长环境为 SPF 级，昼夜循环（12 h/
                约60%的抑郁症患者在发病前曾经历过应激事件，                           12 h），恒温（21~25 ℃），恒湿，所有实验均经过徐州医
                                         ［2］
                提示应激是抑郁的重要诱因 。小胶质细胞作为中                            科大学实验动物伦理委员会审批通过（D2020017）。
                枢神经系统内固有的免疫效应细胞，具有多突触及                            1.2  方法
                可塑性的特点。神经系统的紊乱通常导致炎症和                             1.2.1 动物模型的建立
                小胶质细胞的激活，表现为小胶质细胞数量增加、                                选取健康的 8 周龄雄性 C57BL/6 小鼠，随机分
                表型发生改变并释放炎症介质导致氧化应激反                              为 对 照 组（n=8）、模 型 组（n=8）、溶 媒 组（n=8）和
                应，介导阿尔兹海默症、帕金森病、抑郁样等多种                            RU486 组（n=8）。模型组、溶媒组和 RU486 组采取
                                            ［3］
                慢性神经变性疾病的生理过程 。应激可影响小                             单一刺激禁锢法（每日禁锢2 h） ，连续7 d，构建应
                                                                                              ［8］
                胶质细胞释放细胞因子和神经营养因子，促进小胶                            激模型，对照组不做处理。应激模型鼠造模完成后
                质细胞介导的突触吞噬作用。                                     进行高架十字迷宫实验、悬尾实验检测小鼠应激及
                                                                                ［9］
                    有证据表明，在焦虑和抑郁相关疾病中，患者                          抑郁样行为表现 。
                血浆皮质醇浓度明显升高或降低，这可能与下丘脑⁃                           1.2.2 高架十字迷宫实验（elevated plus maze，EPM）
                垂体⁃肾上腺轴（the hypothalamic⁃pituitary⁃adrenal            EPM 是评价啮齿类动物焦虑反应常用的实验
                                        ［4］
                axis，HPA）的过度刺激有关 。也有人提出下丘脑                        方法，具有伤害性小、操作简单等优点。高架十字
                促肾上腺皮质激素释放因子（corticotropin⁃releasing              迷宫为黑色无味塑料材质，由两个开臂、两个闭臂
                factor，CRF）增加，导致垂体水平上CRF受体的适应                     和中间平台组成（臂长 50 cm，宽 10 cm，高于地面
                性降低，进而引起肾上腺糖皮质激素（glucocorti⁃                      70 cm）。测试开始前 30 min 将小鼠放置于实验室
                                                   ［5］
                coid，GC）受体敏感性增加，GC分泌增加 。在冠心                       内，使其熟悉实验室环境，并在实验前让小鼠在迷
                病引起的全身慢性炎症疾病（如类风湿性关节炎）                            宫中自由探索5 min。实验开始时，将小鼠放置于中
                中，糖皮质激素系统和炎症反应的变化被认为是一                            间平台并记录5 min内小鼠位于高架上的位置及时
                个完整的病理过程的一部分，其中GC和GC受体位                           间，重复测量3 d，使用ANYmaze软件记录。评价指
                于调节多种炎症途径的信号网络顶端，而 GC 信号                          标：闭臂时间占比=进入闭臂时间/（开臂时间+闭臂
                和/或水平的改变，将导致不受抑制的炎症反应发                            时间） 。
                                                                       ［10］
                生，从而促进病理发展。最新的研究发现，GC 处理                          1.2.3 悬尾实验（tail suspension test，TST）

                小鼠后中缝背核区域内色氨酸羟化酶（tryptophan                           TST是一种经典而又能快速评价抑郁程度及抗
                hydroxylase，TPH）信使 RNA 水平降低，额叶皮质区                 抑郁药疗效的方法，其原理是小鼠悬尾后企图逃脱
                                                    ［6］
                域内血清素合成减少并出现抑郁样行为 ，这种作                            但又无法逃脱，从而放弃挣扎，进入特有的抑郁不
                用可被米非司酮（mifepristone，RU486）联合给药阻                  动状态，实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁
                断，表明GC升高可能与精神疾病有关 。                               状态，抗抑郁药物、兴奋药物能明显地改变其状
                                                 ［7］
                    本研究推测，RU486 将通过抑制中缝背核区域                       态。实验前 30 min 将小鼠放入实验室熟悉环境。
                内 GC 受体结合，减少小胶质细胞激活并缓解抑郁                          实验时，将小鼠尾部后1/3固定于悬挂支架上，头部
                样行为，进而起到治疗抑郁症的作用。因此，本实                            离地面约20 cm，进行摄像，摄像背景与小鼠颜色呈
                验首先检测应激后中缝背核区域内GC受体和小胶                            明显反差。使用ANYmaze软件记录小鼠5 min内静
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