Page 48 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第6期
·800 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年6月

A 20 B 10 对照组 C ****
TGF⁃β处理组 *** 60 **** **
8
****
CHL1 mRNA 相对表达水平 10 5 mRNA CHL1 相对表达水平 6 4 * **** mRNA 相对表达水平 40 ***
15

0 2 0 CHL1 20
对照组 IL⁃4组 IL⁃13组 TGF⁃β组 IL⁃17组 IL⁃1β组 6 h 12 h 24 h 0 对照组
TGF⁃β （ 10 mg/mL） 组
TGF⁃β （ 30 mg/mL） 组
TGF⁃β （ 50 mg/mL） 组

A：不同细胞因子处理16HBE细胞24 h的PCR结果；B：TGF⁃β（10 ng/mL）分别处理16HBE细胞6 h、12 h和24 h的PCR结果；C：不同浓度
TGF⁃β（10、30、50 ng/mL）处理16HBE细胞24 h的PCR结果。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001， P < 0.000 1（n=3）。
*
**
***
****
图4 TGF⁃β对16HBE细胞中CHL1 mRNA水平的影响
Figure 4 Effects of TGF⁃β on CHL1 mRNA levels in 16HBE cells
A IgE可能通过促进肥大细胞/嗜碱性粒细胞释放一系
对照组 TGF⁃β处理组
列炎症因子，上调CHL1表达，参与EMT发生。
CHL1 —135 kDa
本研究通过小鼠模型证实肺组织中CHL1主要
Tubulin —55 kDa 表达于支气管上皮细胞，且哮喘小鼠表达较对照增
多，提示哮喘患者 CHL1 主要来源于肺组织支气管
B 2.0
上皮。本研究分别用 TGF⁃β、Th1/Th2/Th17 等炎症
* 因子刺激支气管上皮细胞，发现 TGF⁃β可明显上调
CHL1蛋白相对表达量 1.0 支气管上皮细胞 CHL1 表达，提示 TGF⁃β可能是
1.5

CHL1 的重要调控因素。TGF⁃β被认为是诱导 EMT
的典型细胞因子，已被证明在肺、肝、肾等许多不同
［23-24］
。EMT与组织修复和愈合有
0.5
上皮细胞中介导EMT
关，多种细胞因子和转录因子参与调控，其中TGF⁃β起
0 着核心作用 。TGF⁃β诱导EMT的信号通路主要由
［3］
对照组 TGF⁃β处理组
A：Western blot电泳条带；B：两组CHL1蛋白相对表达量的定量 调节性SMAD2/3蛋白的磷酸化介导，此外TGF⁃β1 还
分析。两组比较，P < 0.05（n=3）。 可通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径，例如细胞
*
图 5 TGF⁃β（30 ng/mL）刺激 72 h 对 16HBE 细胞中 CHL1
外信号调节激酶（Erks）、c⁃Jun 氨基末端激酶（JNK）、
蛋白水平的影响 p38 MAPK，以及磷脂酰肌醇⁃ 3 激酶（PI3K）等非
Figure 5 Effect of TGF ⁃β（30 ng/mL）stimulation for 72 SMAD信号通路介导EMT发生 ［24-25］
hoursonCHL1 protein expressionin 16HBEcells 。研究发现CHL1
通过抑制 PI3K/AKT 信号通路抑制鼻咽癌的肿瘤生
前研究认为，EMT有助于促进气道重塑和支气管阻 长和转移 ，在肺癌中CHL1通过激活MAPK信号通
［6］
［3］
塞 ，本研究结果显示，CHL1 与肺功能指标 FEV1、 路促进非小细胞肺癌细胞增殖 。由此推测在哮喘
［12］
FVC、FEV1/FVC%无相关性。哮喘是一种异质性疾 中可能存在类似信号：TGF⁃β可能通过上调CHL1进
病，气道重塑与哮喘类型有关 ［17-18］ ，不同炎症类型的 一步激活PI3/AKT、MAPK，从而介导非SMAD 通路的
患者，支气管上皮CHL1表达不同，此外，CHL1广泛 EMT发生，具体机制有待下一步研究证实。
表达于神经系统、心、肺、肾等组织 ［19］ ，外周血是机 本研究尚存在一些不足之处，如未能将哮喘患
体全身综合情况的体现，血清并不能直接反映肺部 者根据炎症类型进一步分组以观察CHL1的表达情
疾病状况，后续将用气道局部样本如诱导痰等进一 况。哮喘患者在急性期及缓解期的肺功能状态有
步验证。本研究中 CHL1 与血清总 IgE 水平呈正相 所不同，由于外界因素影响，本研究未能同时收集
关，提示 IgE 可能与 EMT 有关。既往研究表明哮喘 哮喘患者急性发作前后的血清标本及肺功能分析
中IgE参与肥大细胞脱颗粒，释放多种过敏性介质， 数据进行对比，此外尚缺乏机制的深入研究，有待
引起速发型过敏反应 ［20-22］ ，结合本研究结果，推测 后续进一步完善。