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第42卷第6期 耿 蓉，罗 岩，孙 翠，等. 小鼠不同脂肪组织对冷应激的适应性反应［J］.
2022年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（06）：809-814 ·811 ·

数据用均数±标准差（x ± s）进行描述，两组定量数 激组小鼠体重、血糖、食物余量；冷刺激 70 h 后，安
据比较采用双尾 t 检验，P ＜ 0.05 为差异有统计学 乐死小鼠，分别取肩胛区 BAT、腹股沟区 iWAT、附
意义。 睾eWAT。
冷刺激 48 h，对照组和冷刺激组体重（图 1B）、
2 结 果
脂肪组织及肝脏重量（图 1C）无显著差异。冷刺激
2.1 冷刺激增加进食量，对体重及脂肪组织重量影 组小鼠进食量显著增加（P=0.006 8，n=5，图 1D），这
响不显著 与其他文献报道结果一致 ［14］ 。观察各脂肪组织切
C57BL/6J 小鼠冷刺激实验设计如图 1A 所示， 片的 HE 染色结果，发现与对照组相比，冷刺激组
小鼠适应性喂养24 h后，分别记录对照组和冷刺激 BAT 中细胞大小及胞内脂滴无明显变化，iWAT 组
组小鼠体重、血糖、原始食物量，冷刺激组小鼠6 ℃、 织内呈现褐色化改变，eWAT 内脂肪细胞体积略减
单笼单只饲养；冷刺激 48 h 后，记录对照组和冷刺 少（图1E），说明冷刺激显著诱导iWAT褐色化。

A B C
单笼饲养 测体重、血糖 测体重、血糖 小鼠 40 对照组（n=5） 2.0 对照组（n=5）
适应阶段 记录进食量 进食量、体温 安乐死 冷刺激组（n=5） 冷刺激组（n=5）
30 1.5
22 ℃ 6 ℃ （ g ）
-24 h 0 h 48 h 70 h （ g ） 20 1.0
体重 组织重量
10 0.5
0 0
0 h 48 h BAT iWAT eWAT 肝脏
D E
10 对照组（n=5） BAT iWAT eWAT
h ） 8 冷刺激组（n=5）
*
（ g/24 6
进食量 4 2 对照组

0

冷刺激组

A：动物实验设计；B：体重变化；C：不同脂肪组织及肝脏重量变化；D：进食量变化，两组比较，P < 0.05；E：各脂肪组织HE染色（400×）。
*
图1 冷刺激后小鼠体重及脂肪组织的变化
Figure 1 Changes of body weight and adipose tissues in mice after cold stimulation

2.2 冷刺激后3种脂肪组织产热基因表达有所不同 关基因和肉碱棕榈酰转移酶 1A（carnitine palmitoyl⁃
为了明确冷刺激对不同脂肪组织产热及线粒 transferase 1A，Cpt1a）、肉碱棕榈酰转移酶 2（carni⁃
体功能是否存在不同，对不同脂肪组织进行了Ucp⁃1 tine palmitoyltransferase 2，Cpt2）等脂肪酸氧化相关
的免疫组化染色（图2A）。发现在BAT和eWAT中， 基因的表达显著高于对照组（图2B），而对照组和冷
对照组和冷刺激组 Ucp⁃1 无显著差异；而在 iWAT 刺激组Ucp⁃1的mRNA和蛋白水平差异均无统计学
中，冷刺激组 Ucp⁃1 表达显著高于对照组。通过 意义（图2B、C），考虑在3种脂肪组织中，BAT中Ucp
qRT⁃PCR和Western blot检测了BAT、iWAT和eWAT ⁃1 表达最高，冷刺激不能引起其进一步升高。在
中不同基因mRNA和蛋白表达水平：在BAT中，qRT⁃ iWAT 中 ，qRT ⁃ PCR 结 果 显 示 冷 刺 激 组 Ucp ⁃ 1、
PCR结果显示冷刺激组中Ppargc1α、Cidea、肿瘤坏死 Ppargc1α、Cidea 等褐色化相关基因和乌头酸酶 2
因子受体超家族成员9（tumor necrosis factor receptor （aconitase 2，Aco2）等线粒体功能相关基因的表达
superfamily member 9，TNFRSF9/CD137）等褐色化相 显著高于对照组（图2D）；Western blot结果显示冷刺