Page 54 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第6期
·806 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年6月

A Con组 LPZ组 NAC组 NAC+LPZ组

B
2.0 * *
1.5
荧光强度 1.0

0.5
0
NAC+LPZ组
Con组 LPZ组 NAC组

A：荧光显微镜下观察NAC单独或联合LPZ孵育细胞48 h的荧光强度；B：ROS荧光强度的统计图。两组比较，P < 0.05，n=3。
*
图4 NAC对LPZ诱导的H9C2细胞氧化应激的影响
Figure 4 The effects of NAC on LPZ⁃induced oxidative stress in H9C2 cells

A B 1.5 * * C 1.5 * *
Con组 LPZ组 NAC组 NAC+LPZ组

GRP78 78 kDa GRP78/β⁃actin 1.0 CHOP/β⁃actin 1.0
CHOP 27 kDa 0.5 0.5
β⁃actin 42 kDa
0 0
NAC+LPZ组
Con组 LPZ组 NAC组 Con组 LPZ组 NAC组
NAC+LPZ组
A：Western blot检测各组内质网应激蛋白表达；B：各组GRP78蛋白表达量的比较；C：各组CHOP蛋白表达量的比较。两组比较，P < 0.05，n=3。
*
图5 NAC对LPZ诱导的H9C2细胞内质网应激蛋白表达的影响
Figure 5 The effects of NAC on expression of LPZ⁃induced endoplasmic reticulum stress proteins in H9C2 cells

多中心研究中，LPZ组230例患者中有4例发生严重 致细胞凋亡 ［17-18］ 。内质网应激启动的细胞凋亡与各
不良反应，其中包括心律失常 ［13］ 。本研究表明，长 种疾病的病理生理学有关，包括心血管疾病，如心肌
期使用 LPZ 会诱导心肌细胞氧化应激和内质网应 肥厚、心力衰竭、动脉粥样硬化和缺血性心脏病 。
［19］
激，导致细胞凋亡。LPZ 需要在胃液中活化后发挥 此外，在内质网和线粒体上表达的Bcl⁃2家族也参与
抑酸作用，但是心肌细胞内的pH不足以使LPZ发生 调控内质网应激引起的细胞死亡。Bcl⁃2 是抗凋亡
质子化，因此本研究采用LPZ原型药物进行实验，符 因子，Bax是促凋亡因子，Bcl⁃2亚家族蛋白包括Bcl⁃2
合药物在心脏组织中的实际情况。 和Bcl⁃XL，通过抑制Bax亚家族蛋白，阻止线粒体释

心肌缺血或梗死时，心肌细胞和内皮细胞 ROS 放Caspase激活因子，从而抑制细胞凋亡。CHOP诱
产生会大量增加 ［14］ 。ROS 是引起内质网应激的上 导细胞凋亡的一个重要途径是调节 Bcl⁃2 家族促凋
游信号分子，氧化应激通常会导致内质网应激，参 亡蛋白和抗凋亡蛋白之间的平衡 ［19］ 。本研究用LPZ
与并调节细胞凋亡过程 ［15］ 。内质网是一个广泛的 孵育H9C2不同时间后发现，LPZ能时间依赖性增加
细胞内膜网络，其相关功能在心脏生理和病理中至 ROS荧光，并显著增加GRP78和CHOP的表达，说明
关重要 ［16］ 。某些因素如氧化应激、缺血和钙稳态等 长期使用 LPZ 能诱导氧化应激，进一步诱导内质网
会引起内质网应激，内质网的分子伴侣如GRP78和 应激。此外，LPZ增加了H9C2细胞Cleaved⁃Caspase⁃
钙网蛋白的产生都会相应增加，也会启动凋亡信 12、Cleaved⁃Caspase⁃3、Cyt C 及Bax/Bcl⁃2的表达，提
号，包括切割的 Caspase⁃3 和 Caspase⁃12，最终会导 示LPZ能诱导心肌细胞凋亡。