Page 16 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第12期
·1632 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年12月
表1 RT⁃PCR 引物序列
Table 1 RT⁃PCR primer sequences
Gene Primer sequence（5′→3′）
GAPDH F：GACGCTGGTGCTGGTATTGCT/R：CTACTCCTTGGACGGCCATGTGT
Cmlc2 F：AGGCTGCTAATGACCCAAGC/R：ATTGGAGCCACTGCAAAAGC
Hand2 F：CCTTCAAAAGCGGAATTCAAA/R：CAGATGGCCTCATTTCGTCT
NKX2.5 F：GCATCAGAGCTTGGTGAACA/R：ATGCGCACGCATAAACATTA
Bcl2 F：TCACTCGTTCAGACCCTCAT/R：ACGCTTTCCACGCACAT
Bax F：GGCTATTTCAACCAGGGTTCC/R：TGCGAATCACCAATGCTGT
Caspase3 F：CCGCTGCCCATCACTA/R：ATCCTTTCACGACCATCT
Bip F：AAGAGGCCGAAGAGAAGGAC/R：AGCAGCAGAGCCTCGAAATA
Chop F：GAGGACACGTAGAGAAGGGG/R：TCCGTTGAGCTCCACATTCTT
对照组相比随氯氮平剂量增加，斑马鱼心脏 SV⁃BA 测心脏发育相关基因发现，与对照组相比，低剂量
间距逐渐变长，心率逐渐降低（图1B、C）。 CLP 处理显著降低心脏发育相关基因 NKX2.5 的表
斑马鱼为一心房一心室结构，心脏发育经环化 达，而高剂量CLP处理后Cmlc2、Hand2和NKX2.5都
而呈现为 S 型 ［15］ 。侧位观察时，心房心室有明显重 出现显著降低（图1E）。
叠区域，而低剂量氯氮平处理组心房及心室重叠面 以上提示，氯氮平导致斑马鱼心脏形态发育异
积减小，高剂量组心房心室几乎不重叠（图1D）。检 常、心功能受损、心脏发育相关基因表达异常，并呈
A Control L⁃CLP H⁃CLP B
（ μm ） 300 ** ***
（ AB ） 200
WT SV⁃BA distance
100
Control L⁃CLP H⁃CLP
C D
200 Control L⁃CLP H⁃CLP
Heart rate/min 150 ** *** （ AB ）
100
50 WT
Control L⁃CLP H⁃CLP
EGFP）
（ Cmlc2：
Tg
E 1.2 * 1.2 1.2
NKX2.5 mRNA level 0.8 ** mRNA level Hand2 0.8 ** Cmlc2 mRNA level 0.8 ***
0.4
0.4
0.4
0
Control L⁃CLP H⁃CLP 0 Control L⁃CLP H⁃CLP 0 Control L⁃CLP H⁃CLP
A：斑马鱼整体形态（×4）；B：胚胎心脏SV⁃BA距离；C：斑马鱼胚胎心率检测；D：斑马鱼心包水肿（×10）及心脏结构（×40）；E：发育相关基因
表达水平。与对照组相比，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001。
*
**
***
图1 氯氮平导致斑马鱼胚胎心脏发育缺陷
Figure 1 Clozapine impairs cardiac development
