Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第12期
·1634 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年12月

A
Control H⁃CLP CLP+BRC

（ AB ）
WT

B 200 C （ μm ） 250 ** D 2.0 * 3 *
（ /min ） ## # level 1.5 mRNA level 2

Heart rate 150 * SV⁃BA distance 220 Bax/Bcl2 1.0 # Caspase3 1 #
0.5
100 190 0 0
Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC

E
1.5 5
* 4 *
Bip mRNA level 1.0 ## Chop mRNA level 3 2 #
0.5

0 1 0
Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC

A：斑马鱼心包水肿形态（×10）；B：斑马鱼胚胎心率检测；C：胚胎心脏SV⁃BA距离；D：凋亡相关基因表达水平；E：内质网应激相关基因表
达水平。与对照组相比，P < 0.05，P < 0.01；与H⁃CLP组相比，P < 0.05，P < 0.01。
*
**
##
#
图3 溴隐亭缓解内质网应激
Figure 3 BRC treatment relieves endoplasmic reticulum stress
浓度（LC50 ）值为 50 μmol/L，为了保证一定的存活率 中，其与 IRE1α、ATF6 和 PERK 的解离导致其活
进行后续实验，本文选择12.5 μmol/L及25.0 μmol/L 化。在 Bip 解离后，ATF6 诱导 Bip、CREB、Chop 和
CLP处理斑马鱼 。形态学检测显示，氯氮平导致 XBP1 基因的转录。PERK 同样激活 Chop 的转录，
［12］
斑马鱼出现心包水肿、心动过缓，与既往文献报道 Chop 是一种转录因子，主要控制促凋亡因子的表
一致 ［12］ ，本文还发现氯氮平会导致斑马鱼心房与心 达 ［21-22］ 。内质网应激引起的细胞死亡是通过细胞凋
室部分重叠减少，心脏结构线性化，并抑制斑马鱼 亡的线粒体途径发生的，由Bcl⁃2蛋白质家族高度调
NKX2.5、Hand2、Cmlc2 表 达 。 NKX2.5、Hand2、 节。其中 Bcl2 是抗凋亡蛋白，Bax 是促凋亡蛋白，
Cmlc2 在心脏发育及功能成熟中发挥重要作用，其 Bcl2 通过抑制 Bax 亚家族蛋白，阻止线粒体释放
中转录因子NKX2.5 在心脏形成、环化以及成熟中起 Caspase激活因子，从而抑制细胞凋亡 ［23］ 。本研究发
作用，该基因缺失会导致心脏房间隔缺损和房室传导 现氯氮平可诱导内质网应激相关基因Chop及Bip表
缺损；Hand2是转录因子Hand家族成员，其家族在发 达，细胞凋亡相关基因 Bax/Bcl2、Caspase3 表达；而
育中的心室中不对称表达，在心脏形态发生中起着至 使用 4⁃苯基丁酸抑制内质网应激至 72 hpf 时，斑马
关重要的作用，且调节血管发育和生成，是先天性心 鱼心包水肿、心率过缓、心脏线性化等均得到缓解，
脏病的介质；Cmlc2调控心肌细胞增殖、心脏收缩和 Chop、Bip、Bax/Bcl2 及 Caspase3 表达均降低。这些
肌纤维组装 ［18-20］ 。 结果说明氯氮平能诱导内质网应激，进一步诱导
长期内质网应激可诱导细胞凋亡并与多种心 Caspase3 及 Bax/Bcl2 的表达，提示氯氮平能诱导细
血管疾病相关，如心力衰竭、心肌病和缺血性心脏 胞凋亡。
病 ［14］ 。内质网应激由位于内质网膜上的3个传感器 研究报道，氯氮平抗精神病药物的作用基础是
［6］
介导：IRE1α、ATF6和PERK，这些途径通过Bip的解 暂时占据人纹状体中的多巴胺 D2 受体 。本文使
离激活。未折叠蛋白的积累将Bip募集到内质网腔 用溴隐亭处理斑马鱼胚胎，寻找氯氮平引起内质网应