Page 10 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第12期
·1716 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年12月
加了脂肪细胞生成标志物 PPAR⁃γ、CEBP⁃ɑ、FAS、 EBP⁃ɑ、FAS、ACC表达略有升高,但差异没有统计学
ACC 的表达(图 1D、E),与 Sham 组相比,10 μmol/L 意义(P > 0.05,n=3),诱导第6、10天的脂肪细胞生成
Alamandine 处理组在 4 种成脂分化相关蛋白检测 标志物表达水平相比空白对照组差异有统计学意义
上的差异均有统计学意义(P < 0.05,n=3),故选用 (P < 0.05,n=3),且诱导第10天脂肪细胞生成标志物
10 μmol/L Alamandine作为最适浓度。 水平最高(图2A、B)。倒置显微镜下观察,细胞内脂
2.2 Alamandine促进大鼠ADSC成脂分化且成时间 滴含量同样随着诱导时间的延长而增加(图2C)。
依赖性 2.3 AngⅡ拮抗了 Alamandine 对大鼠 ADSC 的成脂
选取 10 μmol/L 浓度的 Alamandine 作用于大鼠 分化效应
ADSC,与空白对照一起,在第1、3、6、10天测定成脂 之前有研究表明,AngⅡ对人的脂肪间充质干
分化程度。经过检测发现,与空白对照相比,诱导 细胞有抑制成脂分化的效应,而在大鼠脂肪间充质
第 1、3 天的 ADSC 脂肪细胞生成标志物 PPAR⁃γ、C/ 干细胞上则没得到验证。正如预期的那样,在加入
A
Alamandine(μmol/L)
Sham 0.1 1.0 10.0
B Alamandine(μmol/L)
Sham 0.1 1.0 10.0
C 100 ** 4 ** D Sham 0.1 Alamandine(μmol/L)
甘油三酶相对表达 60 * 总胆固醇相对表达 3 2 1 * * ACC 280 kDa
10.0
1.0
80
40
FAS
273 kDa
20
0
CEBP⁃α
48 kDa
Sham 0.1 1.0 10.0 0 Sham 0.1 1.0 10.0 PPAR⁃γ 53 kDa
Alamandine(μmol/L) Alamandine(μmol/L)
β⁃actin 45 kDa
E 2.0 ** 1.5 ** 0.8 0.8 **
ACC蛋白相对表达量 1.5 ** FAS蛋白相对表达量 1.0 PPAR⁃γ蛋白相对表达量 0.6 ** CEBP⁃α蛋白相对表达量 0.6
1.0
0.4
0.4
0.5
0.2
0.2
0.5
0.0
Sham 0.1 1.0 10.0 0.0 Sham 0.1 1.0 10.0 0.0 Sham 0.1 1.0 10.0 0.0 Sham 0.1 1.0 10.0
Alamandine(μmol/L) Alamandine(μmol/L) Alamandine(μmol/L) Alamandine(μmol/L)
A:光镜观察脂肪细胞分化情况(×100);B:光镜下观察油红O染色情况(×100);C:甘油三酯和总胆固醇测定(n=3);D:不同浓度Alaman⁃
dine下脂肪细胞生成标志物蛋白的表达;E:蛋白表达定量分析。与Sham组相比,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
**
*
图1 Alamandine对大鼠ADSC有促成脂分化效应且成剂量依赖性
Figure 1 Alamandine can promote lipid differentiation in a dose⁃dependent manner in ADSC