Page 10 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第12期
               ·1716 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年12月


              加了脂肪细胞生成标志物 PPAR⁃γ、CEBP⁃ɑ、FAS、                    EBP⁃ɑ、FAS、ACC表达略有升高,但差异没有统计学
              ACC 的表达(图 1D、E),与 Sham 组相比,10 μmol/L              意义(P > 0.05,n=3),诱导第6、10天的脂肪细胞生成
              Alamandine 处理组在 4 种成脂分化相关蛋白检测                     标志物表达水平相比空白对照组差异有统计学意义
              上的差异均有统计学意义(P < 0.05,n=3),故选用                     (P < 0.05,n=3),且诱导第10天脂肪细胞生成标志物
              10 μmol/L Alamandine作为最适浓度。                       水平最高(图2A、B)。倒置显微镜下观察,细胞内脂
              2.2  Alamandine促进大鼠ADSC成脂分化且成时间                   滴含量同样随着诱导时间的延长而增加(图2C)。
              依赖性                                               2.3 AngⅡ拮抗了 Alamandine 对大鼠 ADSC 的成脂
                  选取 10 μmol/L 浓度的 Alamandine 作用于大鼠             分化效应
              ADSC,与空白对照一起,在第1、3、6、10天测定成脂                           之前有研究表明,AngⅡ对人的脂肪间充质干
              分化程度。经过检测发现,与空白对照相比,诱导                            细胞有抑制成脂分化的效应,而在大鼠脂肪间充质

              第 1、3 天的 ADSC 脂肪细胞生成标志物 PPAR⁃γ、C/                 干细胞上则没得到验证。正如预期的那样,在加入
              A
                                                                    Alamandine(μmol/L)
                          Sham                    0.1                     1.0                    10.0











              B                                                     Alamandine(μmol/L)
                          Sham                    0.1                     1.0                    10.0











               C    100               **        4               **   D        Sham    0.1 Alamandine(μmol/L)
                    甘油三酶相对表达  60  *            总胆固醇相对表达  3 2 1  *  *     ACC                            280 kDa
                                                                                                   10.0
                                                                                            1.0
                     80
                     40
                                                                         FAS
                                                                                                        273 kDa
                     20
                      0
                                                                       CEBP⁃α
                                                                                                        48 kDa
                         Sham  0.1  1.0  10.0   0  Sham  0.1  1.0  10.0  PPAR⁃γ                         53 kDa
                            Alamandine(μmol/L)        Alamandine(μmol/L)
                                                                        β⁃actin                         45 kDa
              E  2.0               **    1.5               **    0.8                     0.8               **
                 ACC蛋白相对表达量  1.5  **     FAS蛋白相对表达量  1.0         PPAR⁃γ蛋白相对表达量  0.6  **  CEBP⁃α蛋白相对表达量  0.6

                 1.0
                                                                 0.4
                                                                                         0.4
                                         0.5
                                                                                         0.2
                                                                 0.2
                 0.5
                 0.0
                     Sham  0.1  1.0  10.0  0.0  Sham  0.1  1.0  10.0  0.0  Sham  0.1  1.0  10.0  0.0  Sham  0.1  1.0  10.0
                        Alamandine(μmol/L)      Alamandine(μmol/L)      Alamandine(μmol/L)      Alamandine(μmol/L)
                 A:光镜观察脂肪细胞分化情况(×100);B:光镜下观察油红O染色情况(×100);C:甘油三酯和总胆固醇测定(n=3);D:不同浓度Alaman⁃
              dine下脂肪细胞生成标志物蛋白的表达;E:蛋白表达定量分析。与Sham组相比,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
                                                                            **
                                                                     *
                                    图1 Alamandine对大鼠ADSC有促成脂分化效应且成剂量依赖性
                          Figure 1 Alamandine can promote lipid differentiation in a dose⁃dependent manner in ADSC
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