Page 134 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第2期
·284 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年2月

A B C D
A：小鼠正常膝关节囊；B：小鼠正常膝关节解剖；C：注射甲苯胺蓝后压迫2 min，取膝关节正中纵向皮肤切口，暴露关节囊，针眼无液体渗
出；D：处死小鼠后切断前后交叉韧带，充分暴露关节面。红色箭头示髌韧带，黑色箭头示胫骨上段，橙色箭头示股骨髁。
图4 小鼠膝关节腔内注射
Figure 4 Intra⁃articular injection of mouse knee

损坏，或无法满足同时固定多只小鼠的需求等不 增加注射失败率，还存在实验人员被抓伤咬伤的风
足。为此，有必要设计一种制作简单、固定牢靠、方 险。目前市面上及以往文献报道中，还未出现针对
便易携、用途多样，且可同时固定多只小鼠的固定 于小鼠膝关节腔内注射的固定器。为了研究该自
装置。在实践过程中，利用实验室中废弃的离心 制固定装置关节腔内微量注射的稳定性与可重复
管，配合闲置的试管架，进行了如上设计。为了检 性，分别采用传统单纯手法固定与自制固定装置固
验自制小鼠固定装置的安全性和实用性，本课题组 定的方法，进行小鼠膝关节腔内注射甲苯胺蓝染液
进行了相关实验研究。 实验。实验发现，相对于传统单纯手法固定，自制
在小鼠尾静脉注射及断尾采血实验中，发现对 固定装置组固定牢靠、小鼠膝关节暴露充分，操作
照组和研究组的注射及采血成功率均达到 100%， 时间更少，一人即可顺利完成小鼠膝关节腔内注
相对于对照组，研究组的注射及采血操作时间相对 射；同时，自制固定装置组关节囊内软骨组织蓝染
较少。对于小鼠尾静脉注射，李轶倞等 ［13］ 采用笼盖 更加充分，甲苯胺蓝染液溢出、异位染色等情况发
压制法在一定程度上解决了小鼠的固定问题，但由 生率低，相对于传统单纯手法固定成功率更高。此
于小鼠在鼠笼里活动范围广，实验过程中小鼠容易 外，对于徒手进行肌肉注射有难度的实验人员，也
因外界环境以及人为操作发生激惹而影响操作，实 可以利用本固定装置，顺利完成肌肉注射。
验人员需要较高的熟练度才能顺利快速完成注射； 在全部实验中，小鼠平静、无激惹，未发生小鼠
同时，笼盖压制法固定效果有限，小鼠尾部受压较 意外伤残、窒息死亡等情况；同时，实验人员也没有
严重，且小鼠身体相较尾部体位更低，无法应用于 发生被咬伤抓伤等情况，证明了该自制固定装置对
小鼠断尾采血实验。而本固定装置对小鼠固定牢 于小鼠及实验人员都具有较高的安全性。整体而
靠，可根据实验需要随意调整固定器位置，满足了 言，该自制固定装置与传统固定器及其他自制固定
小鼠尾静脉注射及断尾采血操作的固定要求，尤其 器对比，具有以下优点：①取材于废弃的50 mL离心
在采血小鼠数量较多、采血时间点有要求的情况 管，材料易得，环保，且制作简单、不易损坏、方便清
下，配合实验助手及备用固定器（图1B），采用“一拖 洗消毒；②结构小巧，携带方便，可随时组装拆卸，
五”组合（图1D），可以更好地提高实验效率，保障实 按“一拖五”模式组装可同时固定多只小鼠，提高工
验数据的准确性。 作效率；③一物多用，在满足传统固定器的小鼠尾
相对于小鼠尾静脉注射，小鼠膝关节腔内注射 静脉注射、断尾采血的固定要求基础上，进一步满
精确度要求更高、难度更大，通常需要预先麻醉小 足了小鼠肌肉及膝关节腔内注射的固定要求；④装
鼠。传统固定器因体积较大、筒壁较厚，导致手持 置透明且无毒无害，利于随时观察小鼠状态，保障
不便、小鼠下肢暴露不充分，不适合作为小鼠膝关 小鼠安全；⑤操作方便，固定牢靠，很好地保证了实
节腔内注射的固定器；而传统单纯手法固定无法实 验人员的安全。需要指出的是自制小鼠固定器的
现小鼠的充分固定，小鼠常因麻醉效果欠佳及疼痛 使用也与实验人员的技术熟练程度有关，随着熟练
刺激而产生抵抗活动，不仅会影响操作的流畅性、 程度的增加，操作时间会随之减少。由于本课题组