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第41卷第2期 秦豪男,刘星婧,丁其瑞,等. 一种简易、多用途的小鼠固定装置[J].
2021年2月 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(02):280-285 ·283 ·
1.2.3 观察指标 腔,拔针后稍用力加压针眼处2 min。取膝关节正中
1.2.3.1 操作时间 纵向皮肤切口,长约 2 cm,暴露关节囊观察染液充
从将小鼠取出鼠笼开始计时,至注射或采血完 盈情况。处死小鼠后,切开关节囊,切断前后交叉
成将小鼠放回笼内为止,计时每只小鼠操作时间 韧带,充分暴露关节面,观察软骨组织染色情况。
(尾静脉注射组:注射生理盐水0.3 mL/只;断尾采血 1.3 统计学方法
组:采血量为0.3 mL/只;膝关节腔内注射组:注射甲 应用SPSS21.0统计软件进行分析。计量资料以
苯胺蓝染液 10 μL/关节腔,计时注射双侧膝关节总 均值±标准差(x ± s)表示,采用独立样本t 检验,计数
时间,预先麻醉过程及注射后按压时间不计入操作 资料采用χ 检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2
时间内)。
2 结 果
1.2.3.2 成功率
尾静脉注射及断尾采血组:以一次性完整完成 2.1 自制小鼠固定装置相关参数
上述操作为成功标准;膝关节腔内注射组:以关节 本自制小鼠固定装置主要取材于 50 mL 离心
囊内软骨组织明显蓝染、且甲苯胺蓝染液无溢出及 管,其质量为12 g,长约11.6 cm,直径约3.4 cm;全套
异位染色为成功标准,成功率以关节计数。成功率 “一拖五”小鼠固定装置(图 1D)总质量为 164 g,大
=成功注射或采血小鼠数量/该组实验小鼠总数量× 小为 20.5 cm×10.0 cm×9.4 cm;制作采用废弃离心
100%。 管,成本为0;全套制作时间约15 min。
1.2.3.3 膝关节腔内注射的稳定性及可重复性 2.2 操作时间、成功率、实验人员受伤及小鼠意外
采用甲苯胺蓝染液进行膝关节腔内注射,对比 死亡情况
传统单纯手法固定与该自制固定装置固定,染料在 在整个实验过程中,小鼠平静、无激惹,未发生
关节腔内的分布情况,验证自制固定装置关节腔内 小鼠意外伤残、窒息死亡等情况;实验人员没有发
微量注射的稳定性与可重复性 [12] 。麻醉小鼠后备 生被咬伤抓伤等情况。具体各组尾静脉注射、断尾
皮消毒,采用相应固定方法予以固定,用拇指和食 采血及膝关节腔内注射操作时间及成功率见表1。
指固定并充分屈曲膝关节,定位膝关节腔位置,应 2.3 甲苯胺蓝染液膝关节腔内注射
用微量注射器以髌韧带内缘中点为进针点,顺关节 小鼠正常膝关节囊及膝关节解剖如图4A~B所
间隙方向约 1.5 mm 深度注射甲苯胺蓝染液入关节 示,关节囊薄而柔润,关节腔内分泌有透明蛋清样
表1 对照组与研究组完成注射或采血的操作时间及成功率
Table 1 Operation time and success rate of injection or blood collection in control and study groups
尾静脉注射 断尾采血 膝关节腔内注射
组别
操作时间(s,x ± s) 成功率(%) 操作时间(s,x ± s) 成功率(%) 操作时间(s,x ± s) 成功率(%) *
对照组(n=30) 32.10 ± 1.98 100.00 30.10 ± 1.73 100.00 40.77 ± 2.73 83.33
研究组(n=30) 30.27 ± 2.20 100.00 28.67 ± 1.55 100.00 38.73 ± 2.16 95.00
t/χ 值 3.403 — 2.911 — 3.200 4.227
2
P值 0.001 — 0.005 — 0.002 0.040
*膝关节腔内注射成功率以关节计数:对照组n=60,研究组n=60。
滑液。成功注射甲苯胺蓝染液可见关节囊内充盈 科研工作的前提。在大多无需麻醉的实验中,小鼠
蓝染,切开关节囊后软骨组织明显蓝染(图 4C、D)。 活动性较强,会对操作产生一定的干扰,常需要固
相对于传统单纯手法固定组,自制固定装置固定组 定装置予以辅助固定。但市售的传统固定装置存
的关节囊内软骨组织蓝染更加充分,甲苯胺蓝染液 在以下几个缺点:①购买价格较高,增加实验成本;
溢出、异位染色等情况发生率更低,膝关节腔内注 ②多为金属或有机玻璃制成,制作过程复杂,个人
射成功率更高(表1)。 制作不易;③市售“一拖五”固定器架体积重量较
大,占据空间,携带不便。基于以上的一些原因,不
3 讨 论
少实验者在实验过程中摸索出了一些实用的固定
良好的固定是进行动物实验的基础,也是众多 方法,但依旧存在着制作过程较为复杂、装置易于