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第41卷第2期                  秦豪男,刘星婧,丁其瑞,等. 一种简易、多用途的小鼠固定装置[J].
                  2021年2月                     南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(02):280-285                       ·283 ·


                1.2.3 观察指标                                        腔,拔针后稍用力加压针眼处2 min。取膝关节正中
                1.2.3.1 操作时间                                      纵向皮肤切口,长约 2 cm,暴露关节囊观察染液充
                    从将小鼠取出鼠笼开始计时,至注射或采血完                          盈情况。处死小鼠后,切开关节囊,切断前后交叉
                成将小鼠放回笼内为止,计时每只小鼠操作时间                             韧带,充分暴露关节面,观察软骨组织染色情况。
               (尾静脉注射组:注射生理盐水0.3 mL/只;断尾采血                        1.3  统计学方法
                组:采血量为0.3 mL/只;膝关节腔内注射组:注射甲                           应用SPSS21.0统计软件进行分析。计量资料以
                苯胺蓝染液 10 μL/关节腔,计时注射双侧膝关节总                        均值±标准差(x ± s)表示,采用独立样本t 检验,计数
                时间,预先麻醉过程及注射后按压时间不计入操作                            资料采用χ 检验,P<0.05为差异有统计学意义。
                                                                           2
                时间内)。
                                                                  2  结 果
                1.2.3.2 成功率
                    尾静脉注射及断尾采血组:以一次性完整完成                          2.1  自制小鼠固定装置相关参数
                上述操作为成功标准;膝关节腔内注射组:以关节                                本自制小鼠固定装置主要取材于 50 mL 离心
                囊内软骨组织明显蓝染、且甲苯胺蓝染液无溢出及                            管,其质量为12 g,长约11.6 cm,直径约3.4 cm;全套
                异位染色为成功标准,成功率以关节计数。成功率                           “一拖五”小鼠固定装置(图 1D)总质量为 164 g,大

                =成功注射或采血小鼠数量/该组实验小鼠总数量×                           小为 20.5 cm×10.0 cm×9.4 cm;制作采用废弃离心
                100%。                                             管,成本为0;全套制作时间约15 min。
                1.2.3.3 膝关节腔内注射的稳定性及可重复性                          2.2  操作时间、成功率、实验人员受伤及小鼠意外
                    采用甲苯胺蓝染液进行膝关节腔内注射,对比                          死亡情况
                传统单纯手法固定与该自制固定装置固定,染料在                                在整个实验过程中,小鼠平静、无激惹,未发生
                关节腔内的分布情况,验证自制固定装置关节腔内                            小鼠意外伤残、窒息死亡等情况;实验人员没有发
                微量注射的稳定性与可重复性               [12] 。麻醉小鼠后备          生被咬伤抓伤等情况。具体各组尾静脉注射、断尾
                皮消毒,采用相应固定方法予以固定,用拇指和食                            采血及膝关节腔内注射操作时间及成功率见表1。
                指固定并充分屈曲膝关节,定位膝关节腔位置,应                            2.3  甲苯胺蓝染液膝关节腔内注射
                用微量注射器以髌韧带内缘中点为进针点,顺关节                                小鼠正常膝关节囊及膝关节解剖如图4A~B所
                间隙方向约 1.5 mm 深度注射甲苯胺蓝染液入关节                        示,关节囊薄而柔润,关节腔内分泌有透明蛋清样

                                         表1 对照组与研究组完成注射或采血的操作时间及成功率
                         Table 1 Operation time and success rate of injection or blood collection in control and study groups
                                       尾静脉注射                       断尾采血                    膝关节腔内注射
                     组别
                               操作时间(s,x ± s) 成功率(%) 操作时间(s,x ± s) 成功率(%) 操作时间(s,x ± s) 成功率(%)                 *
                  对照组(n=30)      32.10 ± 1.98    100.00     30.10 ± 1.73    100.00     40.77 ± 2.73     83.33
                  研究组(n=30)      30.27 ± 2.20    100.00     28.67 ± 1.55    100.00     38.73 ± 2.16     95.00
                  t/χ 值             3.403         —            2.911         —            3.200         4.227
                    2
                  P值                0.001         —            0.005         —            0.002         0.040
                   *膝关节腔内注射成功率以关节计数:对照组n=60,研究组n=60。

                滑液。成功注射甲苯胺蓝染液可见关节囊内充盈                             科研工作的前提。在大多无需麻醉的实验中,小鼠
                蓝染,切开关节囊后软骨组织明显蓝染(图 4C、D)。                        活动性较强,会对操作产生一定的干扰,常需要固
                相对于传统单纯手法固定组,自制固定装置固定组                            定装置予以辅助固定。但市售的传统固定装置存
                的关节囊内软骨组织蓝染更加充分,甲苯胺蓝染液                            在以下几个缺点:①购买价格较高,增加实验成本;
                溢出、异位染色等情况发生率更低,膝关节腔内注                            ②多为金属或有机玻璃制成,制作过程复杂,个人
                射成功率更高(表1)。                                       制作不易;③市售“一拖五”固定器架体积重量较
                                                                  大,占据空间,携带不便。基于以上的一些原因,不
                3  讨 论
                                                                  少实验者在实验过程中摸索出了一些实用的固定
                    良好的固定是进行动物实验的基础,也是众多                          方法,但依旧存在着制作过程较为复杂、装置易于
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