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南京医科大学学报（自然科学版）                                  第41卷第4期
               ·634 ·                     Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences）   2021年4月


             ·病例报告·

              2例Ⅲ型糖原累积病患儿基因型和表型分析



              张志华 ，郑必霞 ，林 谦          1
                     1
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               南京医科大学附属儿童医院消化科，儿科学重点实验室，江苏                      南京 210008
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             ［关键词］ 糖原累积病Ⅲ型；AGL基因；基因突变
             ［中图分类号］ R589.1                   ［文献标志码］ A                        ［文章编号］ 1007⁃4368（2021）04⁃634⁃03
              doi：10.7655/NYDXBNS20210428




                  糖原累积病Ⅲ型（glycogen storage diseases type        大片堆积，占据大部分胞质，形成糖原湖，线粒体及
              Ⅲ，GSDⅢ，MIM#232400）是一种常染色体隐性遗传                     内质网明显减少。心脏超声未见异常。临床诊断

              的糖代谢障碍疾病，由糖原脱支酶（glycogen deb⁃                     为糖原累积病，为明确其分型，遂进行肝脏受累型
              ranching enzyme，AGL）基因先天性缺陷所致 。该                  糖原累积病基因检测。
                                                      ［1］
              酶在糖原分解中发挥α⁃1，4⁃葡萄糖基转移酶（EC                              病例 2：患儿女，年龄 2 岁 7 个月，因“发现肝功
              2.4.1.25）和淀粉 1，6⁃葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.33）的作             能异常 1 年余”入院。查体：体格发育落后，身高
              用。GSDⅢ患者AGL 基因先天性缺陷，糖原支链不                         86 cm，体重11 kg，低于正常同龄儿童身高、体重2个
              能完全被分解，导致带短支链的异常糖原（极限糊                            标准差。辅助检查：肝功能示，丙氨酸氨基转移酶
              精）堆积在肝脏、肌肉和心肌中，临床主要表现为肝                           627.8 U/L，天门冬氨酸氨基转移酶 536.7 U/L，总胆
              肿大、空腹低血糖和酸中毒等临床症状和病理生化                            红素 13.7 μmol/L，直接胆红素6.2 μmol/L，间接胆红
              改变。本文报道 2 例 2017 年南京市儿童医院确诊                       素7.5 μmol/L。入院后予阿拓莫兰联合复方甘草甜
              GSDⅢ患儿AGL基因突变和临床表型特点。                             素保肝治疗，监测血糖提示晨起空腹血糖异常低下
                                                                （2.2~2.5 mmol/L），予口服生玉米淀粉后空腹血糖正
              1  病例资料
                                                                常。患儿家属拒绝进行肝脏活检，为明确诊断糖原
                  病例 1：患儿男，2 岁 1 个月，因“发现腹围增大                    累积病，遂进行肝脏受累型糖原累积病基因检测。
              1 年余”入院。患儿家长 1 年前发现患儿腹围渐增                              基因测序：患儿监护人填写知情同意书，本研
              大，无腹痛，未予特殊处理。查体：身高85 cm，体重                        究获南京儿童医院医学伦理委员会批准。收集患
              11.3 kg，在正常同龄儿童身高体重水平。肝脏肋下                        者静脉抗凝血2 mL，使用全血基因组DNA提取试剂
              9 cm，剑突下7 cm，质韧，脾脏肋下2 cm，质韧，腹部                    盒（北京天根公司）抽提患者及父母DNA，操作步骤
              无移动性浊音，腹股沟未发现异常，脊柱、四肢无畸                           严格按照试剂盒说明书进行。采用 Primer5 软件设
              形。查腹部B超示肝右叶斜径119 mm，肋下89 mm，                      计引物扩增 G6PC、AGL 基因编码蛋白的所有外显
              形态增大，肝功能示：丙氨酸氨基转移酶 864 U/L，                       子及其侧翼序列，由上海 Invitrogen 公司合成。采
              天门冬氨酸氨基转移酶 1 250 U/L，谷氨酰转肽酶                       用 PCR方法进行扩增，PCR反应条件为：95 ℃预变性
              425 U/L，甘油三酯7.17 mmol/L，空腹血糖3.4 mmol/L，           5 min；95 ℃变性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，
              血糖监测正常，乳酸脱氢酶 708 U/L，肌酸激酶                         扩增30个循环；最后72 ℃补充延伸10 min。PCR的
              102 U/L。血气分析显示为代谢性酸中毒：pH 7.28，                    体系均为 50 μL。PCR 产物纯化回收后，以 BigDye
              实际碳酸氢根浓度13.6 mmol/L，标准碳酸氢根浓度                      Terminator（Applied Biosystems 公司，美国）进行产物
              15.2 mmol/L。肝穿刺组织示正常肝小叶结构消失，                      标记，精制纯化后用 ABI Prism 3130 genetic analyzer
              肝细胞排列紊乱，肝细胞肿胀，胞浆空淡，核小，居                           测序。测序结果与 Ensembl 基因数据库中 G6PC
              中，部分细胞核大，空泡状，汇管区少量炎细胞浸                            （ENSG00000131482）和AGL（ENSG00000162688）基
              润。电镜下可见肝细胞胞质内糖原颗粒明显增多，                            因标准序列比对。AGL 基因突变命名参照的转录
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