Page 166 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 166

第41卷第4期
               ·636 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年4月


              AGL 基因全长 85 kb 包括 35 个外显子，在肝脏编码                   因型相关，但进一步分子机制需要突变功能研究。
              的 mRNA 长度 7.4 kb，AGL mRNA 包括编码翻译区                      综上，本研究通过对 2 例糖原累积病患者进行
             （4 596 bp）和 3′端非翻译区（2 371 bp）；其转录起始                AGL 基因测序分析，发现了 3 种致病突变，其中 p.
              点为第3外显子的第69个碱基，终止密码子位于外显                          N219D 和 c.3142_3158delinsAA 为新发突变，综述文
              子35，AGL单体蛋白包含1 532个氨基酸，分子量为                       献报道的相关病例，p.N219D 变异可能关联较轻临
                     ［2］
              170 kDa 。迄今为止人类基因突变数据库中共收录                        床表型，而c.3142_3158delinsAA变异可能和更严重
              了162种AGL基因突变，包括错义突变、无义突变、缺                        的表型相关。AGL的基因诊断可为GSDⅢ患者的治
              失突变、剪切位点突变、重复突变等               ［3-4］ 。AGL酶蛋白      疗、预后评估和家系产前诊断等提供重要依据。
              有3个重要的结构功能域，糖原结合区位于羧基外显                           ［参考文献］
              子 31~34 区域内，它不仅能结合底物，也是稳定酶蛋
                                                                ［1］ CHENG A，ZHANG M，OKUBO M，et al. Distinct muta⁃
              白构象的重要结构；α⁃1，4⁃葡萄糖基转移酶活性功能
                                                                     tions in the glycogen debranching enzyme found in glyco⁃
              域由外显子 6 和外显子 13~15 的 Asp535、Glu564、
                                                                     gen storage disease type Ⅲ Lead to impairment in diverse
              Asp670 位点构成；淀粉1，6⁃葡萄糖苷酶的活性与外                           cellular functions［J］. Hum Mol Genet，2009，18（11）：
              显子 26、27 的 Asp1089、Asp1147 位点密切相关 。                    2045-2052
                                                       ［5］
                  本 研 究 中 病 例 1 携 带 AGL 基 因 p.D215V/p.          ［2］ YANG B Z，DING J H，ENGHILD J J，et al. Molecular
              N219D 复合杂合型突变，p.N219D 错义突变为新发                          cloning and nucleotide sequence of cDNA encoding hu⁃
                                                                     man muscle glycogen debranching enzyme［J］. J Biol
              突变，在大型正常人群测序数据库 ExAC 和 1000G
              中均未发现该突变。蛋白质保守性分析显示该位                                  Chem，1992，267（13）：9294-9299
              点为高度保守区，同时经 Polyphen2 和 SIFT 软件预                  ［3］ MILI A，BEN C I，MAMAÏ O，et al. Molecular and bio⁃
                                                                     chemical characterization of Tunisian patients with glyco⁃
              测显示其为可能致病性突变。既往文献报道携带
                                                                     gen storage disease type Ⅲ［J］. J Hum Genet，2012，57
                                                  ［6］
              纯合突变姐妹，同样没有低血糖表现 ，提示 p.
                                                                    （3）：170-175
              N219D 错义突变可能为更轻表型相关的错义突                           ［4］ SHEN J J，CHEN Y T. Molecular characterization of gly⁃
              变。在Shaiu等 报道的1例携带IVS32⁃12A>G纯合                         cogen storage disease type Ⅲ［J］. Curr Mol Med，2002，2
                           ［7］
              突变的糖原累积病患者同样没有低血糖表现，临床                                （2）：167-175
              表型轻，仅表现为肝脏肿大，无肌肉组织受累情                             ［5］ LIU W，MADSEN N B，BRAUN C，et al. Reassessment of
              况。本研究中的病例 2 严重低血糖发作，同时伴有                               the catalytic mechanism of glycogen debranching enzyme
                                                                    ［J］. Biochemistry，1991，30（5）：1419-1424
              磷酸肌酸激酶增高。病例 2 携带 AGL 基因 c.3142_
              3158delinsAA纯合突变基因型，未见数据库及文献报                     ［6］ SENTNER C P，VOS Y J，NIEZEN⁃KONING K N，et al.
                                                                     Mutation analysis in glycogen storage disease type Ⅲ pa⁃
              道该突变，c.3142_3158delinsAA 推测造成AGL酶蛋
                                                                     tients in the Netherlands：novel genotype⁃phenotype rela⁃
              白多个氨基酸缺失。GSDⅢ患儿在婴儿期表现出肝
                                                                     tionships and five novel mutations in the AGL gene［J］.
              大，反复发作的低血糖也是主要表现，GSDⅢ是糖原
                                                                     JIMD Rep，2013，7：19-26
              脱支酶缺陷所致，其中以同时累及肝脏和肌肉的Ⅲa                           ［7］ SHAIU W L，KISHNANI P S，SHEN J，et al. Genotype⁃
              型最多见，不累及肾脏。由于不影响糖异生，故严重                                phenotype correlation in two frequent mutations and muta⁃
              低血糖少见     ［7-8］ 。我国郭丽等 报道1例AGL基因型                      tion update in type Ⅲ glycogen storage disease［J］. Mol
                                        ［9］
              为 c.3710⁃3711delTA/ IVS14+1G>T 的患儿，在 25 月              Genet Metab，2000，69（1）：16-23
              龄时表现为低血糖抽搐。该课题组在2017年又报道                          ［8］ LUCCHIARI S，FOGH I，PRELLE A，et al. Clinical and
              的一家系2例患儿均在1岁左右出现严重低血糖抽                                 genetic variability of glycogen storage disease type Ⅲa：
              搐，该家系基因型为c.1735+1G>T和 c.959⁃1G>C，均                     seven novel AGL gene mutations in the Mediterranean ar⁃
                                                                     ea［J］. Am J Med Genet，2002，109（3）：183-190
              为经典剪切位点突变 。以上患儿携带的基因突变
                                 ［10］
                                                                ［9］ 郭    丽，林伟霞，张占会，等. 一个糖原累积症Ⅲa型家
              类型均为造成蛋白翻译提前终止的移码突变或剪切
                                                                     系的临床特点及AGL基因突变分析［J］. 中华医学遗传
              突变，可能对酶活性的影响更为严重。本研究中的病
                                                                     学杂志，2015，32（4）：502-505
              例 2 为 c.3142_3158delinsAA 纯合突变，涉及多个氨              ［10］ 郭   丽，林伟霞，毛     曼，等. 糖原累积病Ⅲa型一家系
              基酸的缺失，可能同为更严重表型相关的突变类型。                                两例患儿的分子诊断研究［J］. 中华医学遗传学杂志，
              总之，GSDⅢ患儿临床表型严重不一，非常可能与基                               2017，34（4）：499-503   ［收稿日期］ 2020-08-11
   161   162   163   164   165   166   167   168