Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第10期
               ·1360 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年10月


              51 种 蛋 白 下 调 ，45 种 蛋 白 上 调（图 1A）。 其 中             blot 实验发现其在 ESCC 细胞中较正常上皮细胞表
              HMGCS1 在肺转移患者食管鳞癌组织中表达显著                          达下调（图 1D），进一步通过体外 qRT⁃PCR 实验进
              低于未转移患者（log2FoldChange=0.523，P=0.021，             行验证，结果表明，HMGCS1在KYSE150及KYSE30
              图 1B）。 通 过 对 GEPIA 数 据 库 中 食 管 癌 组 织              中的表达较正常食管上皮显著降低（两组细胞中其
              HMGCS1 表 达 进 行 分 析 ，结 果 表 明 在 食 管 癌 中             相对表达量分别为 1.000 ± 0.000 vs. 0.653±0.065，
              HMGCS1 的表达也是下调的（图 1C）。为了检测                        P=0.003；1.000±0.000 vs. 0.428 ± 0.124，P = 0.003，
              HMGCS1 在细胞水平的表达量，我们通过 Western                     图1E）。



              A                          B                         C                  D        HEEC  KYSE150 KYSE30
                                                                              *
                4
                                                                      10
                                                           HMGCS1                      HMGCS1             57 kDa
                                                           2.0
                                                           1.5
                3                                          1.0         8                GAPDH             37 kDa
                                                           0.5
                                                           0
                                   下调                      -0.5        6
                2                  不变                      -1.0       （ TPM+1 ）
                                   上调                      -1.5                       E      1.5      **
                                                                      log2  4                       **
                1                                                                            1.0
                                                                       2                    HMGCS1相对表达量  0.5
                0                             未转移  未转移  未转移  肺转移  肺转移  肺转移
                                                                       0
                 -5      0       5                                                            0
                                                                        肿瘤组织 正常组织
                       log2FoldChange                                                           HEEC    KYSE30
                                                                        （n=182） （n=286）            KYSE150
                                              1  2  3 1 2  3
                 A：蛋白质谱分析肺转移ESCC组织中蛋白表达变化与未转移的ESCC组织相比；B：HMGCS1在肺转移ESCC组织中表达显著低于未转移
              ESCC组织；C：通过对GEPIA数据库中食管癌组织中HMGCS1表达进行分析，结果表明在食管癌中HMGCS1的表达下调（两组比较，P < 0.05）；
                                                                                                       *
              D：Western blot实验检测食管正常细胞系及食管鳞癌细胞系中HMGCS1的蛋白表达水平；E：qRT⁃PCR 实验检测食管正常细胞系及食管鳞癌细
              胞系中HMGCS1的mRNA表达水平；两组比较，P < 0.01，n=3。
                                              **
                                              图1 HMGCS1在ESCC及细胞中的表达
                                          Figure 1 Expression of HMGCS1 in ESCC and cells


              2.2  HMGCS1表达与ESCC患者转移及临床预后的                      （图3A）。体外Transwell侵袭实验结果显示（图3B），
              关系                                                过表达 HMGCS1 后，实验组细胞穿过小室的数量
                   通过对 121 例随访信息完整的食管鳞癌患者                       （KYSE150 和 KYSE30 分别为 66.7±10.5、41.3±1.5）
              组织芯片进行免疫组织化学染色，结果进一步证                             较空白对照组（137.7±20.6、113.3±28.5）、阴性对照
              实，HMGCS1 在食管鳞癌中表达显著低于正常食管                         组（122.7±12.5、99.0±28.0）下降（P < 0.05），Transwell
              组织（图 2A、B，P < 0.05），且有淋巴结转移的患者                    迁移实验（图 3C）也与上述结果一致（KYSE150：
              HMGCS1 表达显著低于无淋巴结转移患者（图 2C、                       151.3±12.1 vs. 283.3±28.6 vs. 255.0±20.2；KYSE30：
              D，P < 0.05）。Cox 多因素生存风险分析显示，T 分                   140.7±17.6 vs. 258.3±3.2 vs. 227.0±13.1；P < 0.05），
              期、淋巴结转移、HMGCS1低表达是食管鳞癌患者生                         提示细胞迁移、侵袭能力受到显著抑制。进一步通

              存风险因素（表1）。进一步的分析则显示，HMGCS1                        过划痕实验验证发现（图 3D~G），过表达 HMGCS1
              表达与淋巴结转移显著相关（表2）。将食管鳞癌患                           后，KYSE150 细胞（实验组、空白组、阴性对照的平

              者 HMGCS1 表达按照中位数分成高低 2 组，Kaplan⁃                  均愈合百分比为 22.3%、52.7%、46.5%）、KYSE30
              Meier生存分析显示，HMGCS1低表达患者预后较差                       （实验组、空白组、阴性对照的平均愈合百分比为
             （图2E）。                                             21.9%、40.2%、32.7%）迁移能力显著下降（P < 0.05）。
              2.3  HMGCS1表达对ESCC细胞侵袭及迁移能力的
              影响                                                3 讨     论
                  通过 pcDNA3.1 载体构建 HMGCS1 过表达质                       食管癌是世界第六大癌症死亡原因，在每年新
                                                                                                      ［5］
              粒，然后转染食管鳞癌细胞 KYSE150 及 KYSE30                     发的50万例食管癌中，约90%以上为ESCC 。ESCC
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