Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第10期
·1360 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年10月
51 种 蛋 白 下 调 ,45 种 蛋 白 上 调(图 1A)。 其 中 blot 实验发现其在 ESCC 细胞中较正常上皮细胞表
HMGCS1 在肺转移患者食管鳞癌组织中表达显著 达下调(图 1D),进一步通过体外 qRT⁃PCR 实验进
低于未转移患者(log2FoldChange=0.523,P=0.021, 行验证,结果表明,HMGCS1在KYSE150及KYSE30
图 1B)。 通 过 对 GEPIA 数 据 库 中 食 管 癌 组 织 中的表达较正常食管上皮显著降低(两组细胞中其
HMGCS1 表 达 进 行 分 析 ,结 果 表 明 在 食 管 癌 中 相对表达量分别为 1.000 ± 0.000 vs. 0.653±0.065,
HMGCS1 的表达也是下调的(图 1C)。为了检测 P=0.003;1.000±0.000 vs. 0.428 ± 0.124,P = 0.003,
HMGCS1 在细胞水平的表达量,我们通过 Western 图1E)。
A B C D HEEC KYSE150 KYSE30
*
4
10
HMGCS1 HMGCS1 57 kDa
2.0
1.5
3 1.0 8 GAPDH 37 kDa
0.5
0
下调 -0.5 6
2 不变 -1.0 ( TPM+1 )
上调 -1.5 E 1.5 **
log2 4 **
1 1.0
2 HMGCS1相对表达量 0.5
0 未转移 未转移 未转移 肺转移 肺转移 肺转移
0
-5 0 5 0
肿瘤组织 正常组织
log2FoldChange HEEC KYSE30
(n=182) (n=286) KYSE150
1 2 3 1 2 3
A:蛋白质谱分析肺转移ESCC组织中蛋白表达变化与未转移的ESCC组织相比;B:HMGCS1在肺转移ESCC组织中表达显著低于未转移
ESCC组织;C:通过对GEPIA数据库中食管癌组织中HMGCS1表达进行分析,结果表明在食管癌中HMGCS1的表达下调(两组比较,P < 0.05);
*
D:Western blot实验检测食管正常细胞系及食管鳞癌细胞系中HMGCS1的蛋白表达水平;E:qRT⁃PCR 实验检测食管正常细胞系及食管鳞癌细
胞系中HMGCS1的mRNA表达水平;两组比较,P < 0.01,n=3。
**
图1 HMGCS1在ESCC及细胞中的表达
Figure 1 Expression of HMGCS1 in ESCC and cells
2.2 HMGCS1表达与ESCC患者转移及临床预后的 (图3A)。体外Transwell侵袭实验结果显示(图3B),
关系 过表达 HMGCS1 后,实验组细胞穿过小室的数量
通过对 121 例随访信息完整的食管鳞癌患者 (KYSE150 和 KYSE30 分别为 66.7±10.5、41.3±1.5)
组织芯片进行免疫组织化学染色,结果进一步证 较空白对照组(137.7±20.6、113.3±28.5)、阴性对照
实,HMGCS1 在食管鳞癌中表达显著低于正常食管 组(122.7±12.5、99.0±28.0)下降(P < 0.05),Transwell
组织(图 2A、B,P < 0.05),且有淋巴结转移的患者 迁移实验(图 3C)也与上述结果一致(KYSE150:
HMGCS1 表达显著低于无淋巴结转移患者(图 2C、 151.3±12.1 vs. 283.3±28.6 vs. 255.0±20.2;KYSE30:
D,P < 0.05)。Cox 多因素生存风险分析显示,T 分 140.7±17.6 vs. 258.3±3.2 vs. 227.0±13.1;P < 0.05),
期、淋巴结转移、HMGCS1低表达是食管鳞癌患者生 提示细胞迁移、侵袭能力受到显著抑制。进一步通
存风险因素(表1)。进一步的分析则显示,HMGCS1 过划痕实验验证发现(图 3D~G),过表达 HMGCS1
表达与淋巴结转移显著相关(表2)。将食管鳞癌患 后,KYSE150 细胞(实验组、空白组、阴性对照的平
者 HMGCS1 表达按照中位数分成高低 2 组,Kaplan⁃ 均愈合百分比为 22.3%、52.7%、46.5%)、KYSE30
Meier生存分析显示,HMGCS1低表达患者预后较差 (实验组、空白组、阴性对照的平均愈合百分比为
(图2E)。 21.9%、40.2%、32.7%)迁移能力显著下降(P < 0.05)。
2.3 HMGCS1表达对ESCC细胞侵袭及迁移能力的
影响 3 讨 论
通过 pcDNA3.1 载体构建 HMGCS1 过表达质 食管癌是世界第六大癌症死亡原因,在每年新
[5]
粒,然后转染食管鳞癌细胞 KYSE150 及 KYSE30 发的50万例食管癌中,约90%以上为ESCC 。ESCC