Page 20 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第4期
·470 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年4月

HUVEC 0、30、60 min。非循环流体环境中，TrkB 蛋 升高，各时段间差异有统计学意义（P < 0.05）；循环
白磷酸化水平随着 LSS 干预时间延长无明显变化， 流体加入 BDNF 后，TrkB 蛋白磷酸化水平较单纯循
各时段间无显著差异（P > 0.05）；循环流体环境中， 环流体干预组进一步增强，各时段间差异有统计学
TrkB蛋白磷酸化水平随着LSS干预时间延长而逐渐 意义（P < 0.05，图3）。

A B 0 min 30 min 60 min C 0 min 30 min 60 min
BDNF 15 kDa BDNF 15 kDa
β⁃actin 42 kDa β⁃actin 42 kDa
循环流体中BDNF蛋白 （ pg/mL） 浓度 200 * # BDNF蛋白表达水平 0.8 * BDNF蛋白表达水平 0.8 * △
250
1.0
1.0
△
△
150
0.6
0.6
100
0.4
0.4
0.2
50
0.2
0
0 min
15 min 30 min 60 min
时间 0 0 min 30 min 60 min 0 0 min 30 min 60 min
时间
时间
A：ELISA检测循环流体中BDNF蛋白浓度；B：非循环流体干预下BDNF蛋白表达情况；C：循环流体干预下BDNF蛋白表达情况。与0 min
组比较，P < 0.05；与15 min组比较，P < 0.05；与30 min组比较，P < 0.05，n=3。
△
#
*
图2 循环流体及非循环流体干预下BDNF蛋白表达水平
Figure 2 BDNF levels in the circulating flow and non⁃circulating flow
A 非循环流体 B 循环流体 C 循环流体+BDNF
0 min 30 min 60 min 0 min 30 min 60 min 0 min 30 min 60 min
p⁃TrkB 90 kDa p⁃TrkB 90 kDa p⁃TrkB 90 kDa
TrkB 90 kDa TrkB 90 kDa TrkB 90 kDa
1 1.0 1.0
△
0.8
0.8
p⁃TrKB/TtkB 0.6 p⁃TrKB/TtkB 0.6 △ p⁃TrKB/TtkB 0.6 *
0.8
0.4
0.4
0.4
0.2
0 0.2 0 * 0.2 0
0 min 30 min 60 min 0 min 30 min 60 min 0 min 30 min 60 min
时间 时间 时间
A：非循环流体干预下 TrkB 蛋白磷酸化情况；B：循环流体干预下 TrkB 蛋白磷酸化情况；C：循环流体+BDNF 干预下 TrkB 蛋白磷酸化情
况。与0 min组比较，P < 0.05；与30 min组比较，P < 0.05，n=3。
*
△
图3 Western blot检测不同BDNF水平的流体干预下TrkB蛋白磷酸化情况
Figure 3 TrkB phosphorylation states in the flows with different BDNF levels detected by Western blot
2.3 LSS干预过程中增加流体BDNF水平对TrkB下 图 4）。
游Akt通路激活的影响 2.4 LSS干预过程中增加流体BDNF水平对HUVEC
循环流体和非循环流体产生的 LSS 分别干 体外血管生成能力的影响
预 HUVEC 0、30、60 min。 非 循 环 流 体 环 境 中 ， 体外细胞迁移和小管形成实验结果显示，非循
TrkB 蛋 白 磷 酸 化 水 平 随 着 LSS 干 预 时 间 延 长 环流体干预组HUVEC 迁移和小管形成能力与对照
无明显变化，各时段间差异无统计学意义（P > 0.05）； 组（Ctrl 组）比较差异无统计学意义（P > 0.05）。

循环流体环境中，Akt 蛋白磷酸化水平随着 LSS BDNF 干预组 HUVEC 迁移和小管形成能力较对照
干预时间延长而逐渐升高，各时段间差异有统 组显著增高（P < 0.05），但仍低于循环流体干预
计 学 意 义（P < 0.05）；循 环 流 体 加 入 BDNF 后 ， 组（P < 0.05）。循环流体+BDNF干预组HUVEC迁移
Akt 磷酸化水平较单纯循环流体干预组进一步 和小管形成能力较其他各组均显著增高（P < 0.05，
增 强 ，各 时 段 间 差 异 有 统 计 学 意 义（P < 0.05， 图5）。