Page 50 - 南京医科大学自然版

第45卷第12期
·1732 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年12月

A
2 000
（mV） 1 500 5⁃HMF Aqueous phase

Voltage 1 000
500
0
3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0
Time（min）
B
2 000
（mV） 1 500 Chloroform phase
Voltage 1 000

500
0
3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0
Time（min）
A：Chromatogram of the aqueous phase after double liquid⁃liquid extraction. B：Chromatogram of the chloroform phase after double liquid⁃liquid ex⁃
traction.
图4 CSE经两次液液萃取后的色谱图
Figure 4 Chromatograms of CSE after double liquid⁃liquid extraction

表 3 CSE 经两次液液萃取后水相和三氯甲烷中 5⁃HMF 的 烟5⁃HMF的含量为（1.80±0.17）mg。因此，5⁃HMF的
峰面积及含量（n=2，x ± s） 总体分离效率约为89.55%，表明该分离体系具有较
Table 3 Peak area and content of 5 ⁃ HMF in aqueous 高的效率。
phase and chloroform of CSE after double liquid⁃
2.4.2 尼古丁与5⁃HMF的有效分离
liquid extraction（n=2，x ± s）
为检验尼古丁是否干扰 5⁃HMF 提取，对 3 个批
Index Aqueous phase Chloroform phase
次分离出的 90 管洗脱液进行了尼古丁检测。结果
Peak area（×10 ） 276.78 ± 1.91 23.49 ± 1.60
6
发现尼古丁主要富集于第 19~20 管（图 6，表 7），双
Proportion（%） 092.18 ± 0.63 07.82 ± 0.53
Content（mg） 001.89 ± 0.01 00.16 ± 0.01 因素方差分析显示，管数因素对尼古丁含量的影响极
显著（P < 0.005），占总变异的85.18%（表8），表明尼
94.88%。3次重复独立实验显示5⁃HMF段的5⁃HMF 古丁在特定管数中被集中洗脱，模式一致。至关重要
峰面积变异系数为8.53%。 的是，香烟包别因素差异无统计学意义（P=0.682 9），
同时为评估分离方法在不同香烟样本间的 其贡献的变异仅占1.77%（表8）。说明本方法对尼古
一致性，对 3 包香烟的 5⁃HMF 洗脱数据进行了双 丁的分离具有高度的稳定性和可重复性。且5⁃HMF
因素方差分析。结果显示，管数因素对 5⁃HMF含 富集于第9~14管，二者无重叠，故尼古丁并未对5⁃HMF
量的影响极显著（P < 0.000 1），占总变异的97.04%； 的分离过程造成干扰。
香烟包别因素也具有显著性（P=0.007 2），但仅占总
3 讨 论
变异的1.37%（表5）。Tukey’s多重比较表明，第1包
香烟（A）与第2包（B）、第3包（C）之间差异有统计学 本研究利用液液萃取联合葡聚糖凝胶 LH⁃20，
意义（P < 0.05），而第 2 包与第 3 包之间差异无统计 成功建立了批量、稳定、高效的香烟中 5⁃HMF 的分
学意义（P > 0.05,表 6）。这表明尽管不同香烟样本 离方法。通过 3 次独立分离实验验证，5⁃HMF 的洗
间存在微小差异，但 5⁃HMF 的洗脱趋势高度一致， 脱分布规律呈现高度一致性：5⁃HMF主要富集于第
方法具有良好的可重复性。 9~14 管 洗 脱 液 段 ，该 区 段 5 ⁃ HMF 比 例 达 到 了

2.4 5⁃HMF总体分离效果的评价 94.88%，表明分离过程收集到了绝大部分的5⁃HMF。
2.4.1 5⁃HMF的总体分离效率 值得注意的是，3 次重复实验中 5⁃HMF 段的特征
HPLC⁃UV 测定单包香烟 CSE 中 5⁃HMF 的含量 峰面积的变异系数仅为 8.53%，显示了该方法的
为（2.01±0.04）mg，分离制备体系最终获得的单包香 稳定性和可重复性。在分离效率评估方面，单包