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第45卷第12期 南京医科大学学报（自然科学版）
2025年12月 Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） ·1727 ·

·基础研究·

液液萃取联合葡聚糖凝胶 LH⁃20 分离制备香烟烟雾中的 5⁃羟

甲基⁃2⁃糠醛

段名秀 ，张代为 ，彭梦凡 ，王 丽 ，王守林 1*
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南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，卫生检验与检疫学系，江苏 南京 211166
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［摘 要］ 目的：从香烟烟雾中分离新的重要组分5⁃羟甲基⁃2⁃糠醛（5⁃hydroxymethyl⁃2⁃furfural，5⁃HMF），为评价其在吸烟所致
呼吸系统损伤中的作用提供保证。方法：采用液液萃取与葡聚糖凝胶LH⁃20柱层析相结合的方法，对溶于三氯甲烷的香烟烟
雾总提物（cigarette smoke extract，CSE）进行 5⁃HMF 的提取。首先将溶于三氯甲烷的 CSE 用双蒸水进行两次液液萃取，将 5⁃
HMF从三氯甲烷转移至水相，随后采用葡聚糖凝胶LH⁃20进行5⁃HMF的分离。提取及分离过程的效果采用高效液相色谱⁃紫
外检测法（high performance liquid chromatography⁃ultraviolet detection，HPLC⁃UV）进行分析。采用GraphPad Prism软件进行双因
素方差分析（two⁃way ANOVA）和Tukey’s多重比较检验，以评估方法的稳定性和可重复性。结果：两次液液萃取可将CSE中约
92.18%的 5⁃HMF 转移至水相；葡聚糖凝胶 LH⁃20 可分离回收水相中约 94.88%的 5⁃HMF。3 次独立重复实验的变异系数为
8.53%，且双因素方差分析表明，虽然不同香烟样本间存在微小差异（P < 0.01），但5⁃HMF的洗脱分布规律高度一致（洗脱管数因
素P < 0.000 1），占总变异的97.04%，证实了方法具有良好的可重复性。从含量上计算，该方法最终能分离CSE中约89.55%的
5⁃HMF，且CSE中的尼古丁组分不会对5⁃HMF的分离造成干扰。结论：本研究实现了香烟烟雾中5⁃HMF的简单、快速、高效、
稳定的分离，不仅为后续系统性研究香烟烟雾重要组分的毒效应提供物质和技术保证，也为香烟烟雾复杂基质中其他组分的
分离制备提供了方法及思路。
［关键词］ 液液萃取；葡聚糖凝胶LH⁃20；香烟烟雾；5⁃羟甲基⁃2⁃糠醛

［中图分类号］ O658.2；TS411 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2025）12⁃1727⁃11
doi：10.7655/NYDXBNSN250601

Separation and preparation of 5⁃hydroxymethyl⁃2⁃furfural in cigarette smoke by liquid⁃
liquid extraction coupled with sephadex LH⁃20

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DUAN Mingxiu ，ZHANG Daiwei ，PENG Mengfan ，WANG Li ，WANG Shoulin
Key Laboratory of Modern Toxicology of Ministry of Education，Department of Health Inspection and Quarantine，
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School of Public Health，Nanjing Medical University，Nanjing 211166，China

［Abstract］ Objective：To separate a new important component 5⁃hydroxymethyl⁃2⁃furfural（5⁃HMF）in cigarette smoke，which
provides a guarantee for evaluating its role in the respiratory system injury caused by smoking. Methods：A combination of liquid⁃
liquid extraction and sephadex LH⁃20 column chromatography was used to extract and purify 5⁃HMF from the cigarette smoke extract
（CSE）dissolved in chloroform. First，the total CSE was subjected to two consecutive liquid⁃liquid extractions with double⁃distilled
water to transfer 5⁃HMF from the chloroform phase to the aqueous phase. Then，sephadex LH⁃20 was employed to separate 5⁃HMF
from the aqueous phase. The efficiency of the extraction and separation processes were determined using high performance liquid
chromatography ⁃ ultraviolet detection（HPLC ⁃ UV）. GraphPad Prism software was used for two ⁃ way analysis of variance（two ⁃ way
ANOVA）and Tukey’s multiple comparisons test to evaluate the stability and reproducibility of the method. Results：The two⁃step
liquid⁃liquid extraction transferred approximately 92.18% of 5⁃HMF from CSE to the aqueous phase. Sephadex LH⁃20 enabled the

［基金项目］ 国家自然科学基金（82173562）；南京医科大学常州医学中心重点项目（CMCM202315）；南京医科大学大型仪器
共享服务项目（XZ103Q20200825）
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通 信 作 者（Corresponding author），E⁃mail：wangli8407@njmu.edu.cn（ORCID：0009⁃0001⁃3680⁃1366）；wangshl@njmu.edu.cn
（ORCID：0000⁃0003⁃3070⁃7560）