Page 8 - 南京医科大学自然版
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第45卷第3期
               ·296 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年3月


                  近年来，随着不孕不育发病率的不断上升，生                          于外周血淋巴细胞培养基，37 ℃恒温箱培养72 h，在
              殖问题逐渐变成了一个不容忽视的问题。辅助生                             细胞收获前滴入0.1 mL 10 μg/mL的秋水仙素再培养
              殖技术经过多年发展，已经可以满足许多不孕不育                            2.5 h，将细胞周期阻断于分裂中期。之后1 500 r/min
              患者的需求，为其带去健康的子代，有报道称澳大                            离心10 min 收获细胞，加入0.075 mol/L 氯化钾低渗
              利亚2017年的出生人口中有6.7% 的新生儿是通过                        液8~10 mL，于37 ℃水浴箱中低渗25 min，经固定液
                            ［1］
              辅助生殖受孕的 。部分患者无法顺利孕育自身后                           （甲醇∶冰醋酸=3∶1），1 500 r/min 离心 10 min，吸去
              代，进而将希望转移到供精治疗上，虽然也有很多                            上清，两次固定后置于37 ℃恒温箱中，显带前再置于
              研究着眼于精子的体外发生，但是目前精子库的作                            80 ℃烤箱中烤2~3 h。用吉姆萨染色液染色后观察。
              用仍无法替代 。随着生殖健康知识的普及、精子                            1.2.2 核型分析
                           ［2］
              冷冻技术的提升、患者日益增长的诊疗需求，精子                                 通过 G 显带，每例计数 20 个中期分裂相，分析
              库所承担的角色越来越重要，如何筛选合格捐精者                            5 个核型，怀疑嵌合体计数100 个核型。参照《人类
              摆在了研究人员面前。虽然许多捐精者体格检查、                            细胞遗传学国际命名体制》（ISCN2020）的规定进行
              精子质量检测、传染病检测的结果均很理想，但是                            核型描述。计数各类异常的构成与出现频率。
              遗传疾病就像潜伏在水面下的冰山，影响深远但无                            1.3  统计学方法
              法轻易察觉。研究发现，染色体异常男性在多项临                                 采用 SPSS 19.0 软件进行统计分析。统计指标
              床结局上与对照组存在显著差异，异常组精子质量                            包括染色体结果异常率以及构成比例。结果均以
              明显更差，胎儿畸形率、自然流产率更高 。虽然目                           百分率（%）表示。
                                                  ［3］
                                          ［5］
                         ［4］
              前产前筛查 与产前诊断技术 在不断发展，但是
                                                                2  结 果
              将胎儿的遗传异常阻断在受精之前是最安全与高
              效的。因此，精子库针对可能存在的染色体异常，遵                           2.1  染色体核型分析异常结果
                                                   ［6］
              循《人类精子库基本标准和技术规范》要求 ，对捐精                               在 2012—2023 年共 3 591 例捐精志愿者中，染
              志愿者行外周血染色体核型分析，可在一定程度上阻                           色体核型出现异常者共为 62 例，占所有志愿者的
              断潜在的遗传缺陷对用精家庭未来的影响。本研究                            1.73%（62/3 591），其中最常见的为臂间倒位（30例），
              统计南京医科大学附属第一医院精子库十余年捐精                            约占所有异常的一半，其中以9号染色体臂间倒位最
              志愿者中筛查出的核型异常，为同行提供参考，并讨                           为突出（27/30），而核型 46，XY，inv（9）（p12；q13）在
              论对捐精志愿者进行遗传学分析的意义。                                所有异常中出现频率最高（21/30），占所有志愿者的
                                                                0.58%（21/3 591），占所有异常的33.87%（21/62）。除
              1  材料和方法
                                                                去臂间倒位，异常中最多见的是染色体的次缢痕区加
              1.1  材料                                           长（13 例），占所有异常的 20.97%（13/62），具体表现
                  选取 2012 年 1 月—2023 年 12 月于南京医科大               为1、16、21和Y染色体上出现异常，其中以1号染色
              学附属第一医院人类精子库进行供精筛选的捐精者                            体次缢痕区加长最为常见（8/13）。染色体短臂加长
              共计3 591例，年龄20~35岁。捐精者传染病及病原                       为第3位的异常（7例），占所有异常的11.29%（7/62），
              体筛查结果符合要求，其精子质量通过实验室检测                            其中以21号染色体短臂加长最多（4/7）。第4位为染
              后满足捐精要求。本研究获得南京医科大学附属                             色体易位（6例），占所有异常的9.68%（6/62）。除此

              第一医院伦理委员会审查批准（编号：2013⁃SZ⁃012/                     之外还有体加长3例，双随体1例，着丝粒增大1例，
              2019⁃SZ⁃01），捐精者均签署捐精供精知情同意书。                      标记染色体（marker chromosome，mar）1例（表1）。
                  染色体成像阅片系统（南京众信科技发展有限                               通过分析受累染色体频次发现，9号染色体异常
              公司）；外周血淋巴细胞培养基；秋水仙素（广州达                          （29例）远高于其他染色体，其次为1号染色体（10例）
              晖生物技术股份有限公司）；胰蛋白酶（生工生物工                           与 21 号染色体（6 例），其余染色体异常的分布较为
              程股份有限公司，德国）；吉姆萨染色液（西格玛奥                           平均（图1），部分罕见染色体核型见图2。
              德里奇贸易有限公司，美国）。                                    2.2  染色体核型分析异常志愿者精液质量

              1.2  方法                                                经过初次筛选，对精液量≥2 mL、精子浓度≥
              1.2.1 样本收集与细胞培养                                   60×10 /mL、前向运动精子百分率（ratio of forward
                                                                      6
                  抽取通过捐精初筛男性的外周血 0.5 mL，接种                      motile sperm，PR）≥60%、精子正常形态率≥4%、冷冻
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