Page 48 - 南京医科大学自然版

第45卷第8期
·1104 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年8月

干预组中，200 μmol/L NA 干预后的囊胚形成率显 2C~E），提示 NA 可改善老龄卵母细胞成熟。
著高于其他浓度组（P < 0.05，图 1C）。因此，本研 2.3 NA改善老龄小鼠卵母细胞纺锤体组装和染色
究最终选定200 μmol/L作为NA治疗的最适浓度。 体排列
2.2 NA促进卵母细胞成熟 考虑到高质量的卵母细胞具有典型桶状形态
使用 PBE 率评估卵母细胞核成熟的能力。与 的纺锤体，且染色体沿赤道板有序排列，本研究评
年轻对照小鼠相比，老龄小鼠卵母细胞的PBE率显 估了年轻与老龄小鼠MⅡ期卵母细胞的纺锤体形态
著下降，补充 200 μmol/L NA 后老龄小鼠卵母细胞 异常率和染色体排列异常率。大多数年轻小鼠卵母
PBE 率显著提高（P < 0.05，图 2A、B），提示 NA 可促 细胞具有规整桶形纺锤体和排列良好的染色体，而老
进卵母细胞核成熟。在卵母细胞的皮质区，皮质颗 龄小鼠卵母细胞纺锤体形态异常，染色体紊乱，补充
粒（cortical granule，CG）呈现均匀分布特征，但在染 NA可显著降低老龄小鼠卵母细胞的纺锤体和染色体
色体邻近区域呈现分布缺失现象。与年轻卵母细 异常率（P均< 0.05，图3）。
胞相比，衰老卵母细胞的 CG 表现出信号强度降低 2.4 NA被卵母细胞摄取并定位于线粒体且改善线
和分布连续性中断的特征，与文献报道相似 ［16］ 。 粒体功能
本研究中，与年轻对照组相比，老龄小鼠卵母细胞 将荧光标记的NA与COC共培养，发现NA可经
中 CG 信号的荧光强度降低，CG 的错误分布率增 颗粒细胞层转运至卵母细胞内，并特异性富集于卵
加，而补充 NA 后可显著挽救 CG 数量的减少（P 均 母细胞内线粒体，提示 NA 可能参与调控卵母细胞
< 0.05），并 降 低 CG 的 错 误 分 布（P < 0.01，图 内线粒体相关生理过程（图 4A）。采用 JC⁃1 探针检

A
Old
Young 0 μmol/L NA 100 μmol/L NA 200 μmol/L NA 300 μmol/L NA

2⁃cell

Blastocyst

（%） 100 100
B C
2⁃cell rate 80 Percentage of blastocyst （%） 80 *

60
60
Percentage of 40 0 formation rate 40 0
20
20
Old+200 μmol/L NA
Young
Old+100 μmol/L NA
Old+200 μmol/L NA
Old+100 μmol/L NA
Old+0 μmol/L NA Old+300 μmol/L NA Old+0 μmol/L NA Old+300 μmol/L NA
Young
A：Representative images of the 2⁃cell and blastocyst stages of oocytes，and red arrows represent blastocyst stages of oocytes（Scale bars=200 μm）.
*
B，C：The percent of the 2⁃cell（B），and blastocyst formation（C）in the young，old，and old+NA groups. P < 0.05（n=20）.
图1 不同浓度NA对IVM卵母细胞受精及囊胚形成的影响
Figure 1 Effects of different concentration of NA on the fertilization and subsequent blastocyst formation of IVM oocytes