Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第12期
·1724 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年12月
制,用 C5a 刺激 PC9 细胞,在不同时间点(0 h、1 h、2 达和磷酸化均未见明显变化(图4)。
h、3 h、6 h、12 h)检测增殖和迁移相关的信号分子 2.2.4 C5a 通过 Akt1⁃ERK1/2 通路诱导 PC9 细胞增
Akt1、ERK1/2和PKC⁃α的表达与磷酸化情况。结果 殖和迁移
显示,C5a刺激PC9细胞后,显著增强Akt1和ERK1/2 进一步探讨了 Akt1 和 ERK1/2 在 C5a 诱导 PC9
的磷酸化水平,且其峰值在3 h左右,而PKC⁃α的表 细胞增殖和迁移的作用。用 Akt1 抑制剂 Perifosine
A C5a(ng/mL)
0 0.05 0.50 5.00 50.00 500.00
0 h
h
24
h
48
B
150
( % ) * * *
细胞迁移率 100
50
0
0 0.05 0.50 5.00 50.00 500.00
C5a(ng/mL)
A:细胞划痕代表图片(×40);B:半定量柱形图(与0 ng/mL组比较,P < 0.01,n=3)。
*
图3 细胞划痕实验检测C5a刺激PC9细胞的迁移情况
Figure 3 C5a stimulates the migration of PC9 cells by cell scratch test
A C5a(ng/mL) B
4
p⁃Akt1
0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h
p⁃ERK1/2
p⁃Akt1 —60 kDa 3 p⁃PKC⁃α **
蛋白相对表达量 2 * *
t⁃Akt1
—60 kDa **
p⁃ERK1/2 —42、44 kDa * * *
t⁃ERK1/2 —42、44 kDa
p⁃PKC⁃α 1
—80 kDa
t⁃PKC⁃α —80 kDa 0
0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h
β⁃actin —42 kDa
A:Western blot 电泳条带;B:半定量分析柱形图(与 0 h时间点比较,P < 0.05,P < 0.01,n=3)。
**
*
图4 C5a刺激PC9细胞后Akt1、ERK1/2和PKC⁃α的表达与磷酸化情况
Figure 4 The expression and phosphorylation of Akt1,ERK1/2 and PKC⁃α in PC9 cells treated with C5a