Page 48 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第5期
               ·678 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年5月


              between baseline PCSK9 content and CER D18：1/24：0 and GM3 D18：0/24：0 in lipid subclass analysis remained even after
              adjustment for other factors. Conclusion：During IVGTT，serum insulin level increases sharply along with instant increase in blood
              glucose，and serum PCSK9 content fluctuates as well. The fluctuation patterns of serum PCSK9 level during IVGTT is related with
              basal glucose and metabolism status.
             ［Key words］ PCSK9；IVGTT；insulin；ceramide
                                                                            ［J Nanjing Med Univ，2021，41（05）：677⁃683］








                  前蛋白转化酶枯草溶菌素 9（proprotein conver⁃
                                                                1  对象和方法
              tase subtilisin/kexin type 9，PCSK9）对肝脏摄取低密
              度脂蛋白胆固醇（low⁃density lipoprotein cholesterol，      1.1  对象
              LDL⁃C）及血清中各类富含胆固醇、甘油三酯及其他                              本研究纳入 2014 年 6 月—2015 年 12 月南京医
              重要脂质（如鞘脂）的脂蛋白颗粒具有重要的调节                            科大学第一附属医院内分泌科招募肥胖或糖代谢
              作用  ［1-6］ 。PCSK9 抑制剂已获批上市作为降低心血                   异常患者52例，同期招募既往无糖代谢异常个人史
              管疾病风险的新型药物           ［7-9］ ，PCSK9相关的病理生理          及糖尿病家族史的志愿者23例，首先进行口服葡萄
              调控研究方兴未艾。既往本课题组及其他团队在                             糖耐量对糖代谢状态分型，间隔1周使用IVGTT评估
              胰岛素抵抗、糖耐量受损及糖尿病人群中观察到血                            胰岛素一相分泌能力。因重要临床数据不全、留取血
              清 PCSK9 与胰岛素水平或胰岛素抵抗状态存在一                         清样本溶血影响胰岛素检测排除5例，最终纳入70例
              定的正相关关系        ［10-15］ ，提示机体胰岛素含量以及对              进行后续研究。本研究项目获得南京医科大学第一
              应的血糖控制水平可能影响PCSK9含量，但截至目                          附属医院伦理委员会批准（2014⁃SR⁃003），所有受试
              前，胰岛素和血糖对于PCSK9的作用尚无定论                   ［16-21］ 。  者签署知情同意书。
              有研究表明，饥饿24 h后小鼠肝脏中PCSK9的表达                        1.2  方法
              显著下降    ［17-18］ ，而再次喂食后得到上调，同时小鼠6 h               1.2.1 一般资料及指标测定
              高胰岛素［10 mU/（kg·min）］正葡萄糖钳夹试验肝脏                         所有参与者均经详细病史询问，测量并记录身
              PCSK9 的基因表达明显上调          ［17］ ，但也有体外研究发           高、体重、腰围等指标，计算体重指数（body mass in⁃
              现 100 nmol/L 胰岛素处理 HepG2 和 Huh7 肝癌细胞              dex，BMI）。隔夜空腹 10 h 以上采集静脉血测定血
              系 24 h 抑制了 PCSK9 的合成       ［19］ 。有意思的是，在          清代谢指标包括总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固
              24 h人高胰岛素正葡萄糖钳夹试验前后血清PCSK9                        醇（HDL⁃C）、LDL⁃C、甘油三酯（TG）、脂蛋白（a）［Lp
              水平无明显变化        ［20］ ，甚至另两项针对肥胖人群进行                （a）］、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转
              2~3 h 短时程钳夹后 PCSK9 含量下降          ［19，21］ 。以上证     移酶（AST）、L⁃γ⁃谷氨酰转肽酶（GGT）、乳酸脱氢酶
              据提示体内与体外、肥胖与正常体重、急性与慢性                            （LDH）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接
              诱导的高胰岛素状态对血清 PCSK9 水平的影响不                         胆红素（IBIL）、总蛋白、白蛋白、血糖、肌酐等指标，
              完全一致。                                             上述指标使用对应的罗氏试剂盒在 COMBAS 平台
                                                        ［22］
                  已知 PCSK9 在循环中的半衰期约为 5 min                ，    检测。
              且其与血浆蛋白的结合存在动态变化。既往研究                             1.2.2  75 g 口服葡萄糖耐量（oral glucose tolerance
              主要集中探究各因素对肝脏合成 PCSK9 的直接影                         test，OGTT）评估
              响 ，以及长期高胰岛素状态下PCSK9含量情况，而                              过夜空腹10 h，采集空腹静脉血，口服75ｇ葡萄
                ［5］
              缺乏血糖或者胰岛素短期波动对PCSK9清除、再分                          糖后，健康志愿者仅留取120 min血样，其他受试者留
              布等环节的研究。本研究利用静脉葡萄糖耐量试                             取0、30、60、120 min采集静脉血，测定血糖水平。
              验（intravenous glucose tolerance test，IVGTT）过程中    1.2.3  IVGTT 评估一相胰岛素分泌能力，作为葡萄
              静脉葡萄糖负荷引发的血糖及胰岛素急遽波动，检                            糖刺激胰岛素分泌导致急性高血糖高胰岛素波动
              测过程中PCSK9水平的变化，探究现象背后的潜在                          模型
              生物学机制。                                                 口服葡萄糖耐量结束至少 1 周后进行 IVGTT。
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