Page 44 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 44

第41卷第5期
               ·674 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年5月


                        空气                     生理盐水                    BSA溶液                 Ag2S@BSA溶液














                                       蓝色荧光:DAPI标记的细胞核;红色荧光:鬼笔环肽标记的细胞骨架。
                               图 4 四种介质存储后的钛表面接种成骨细胞孵育8 h后的细胞黏附形态(×200)
                 Figure 4 Adhesion morphology of osteoblasts cultured for 8 hours on titanium surfaces stored in four media(×200)

                        3.0   空气                                            空气 生理盐水 BSA溶液 Ag2S@BSA溶液
                              生理盐水                                                                   —70 kDa
                        2.5   BSA溶液             *  *△                  OPN                           —60 kDa
                              Ag2S@BSA溶液      *                                                      —47 kDa
                       OD值 2.0                                         OSX                           —45 kDa
                        1.5
                        1.0                                           OCN                            —11 kDa
                        0.5
                                                                    GAPDH                            —36 kDa
                         0
                              Day 1   Day 3   Day 6                      2.0  空气
                与空气组比较,P < 0.05,与生理盐水组比较,P < 0.05(n=3)。                       生理盐水
                                               △
                          *
              图 5  四种介质存储后的钛表面接种成骨细胞1、3、6 d后的                            1.5  BSA溶液             *  *
                                                                              Ag2S@BSA溶液
                   细胞增殖活性结果                                             蛋白相对表达水平  1.0  *      *
              Figure 5  Proliferation of osteoblasts cultured for 1,3,and      *        *  *
                       6 days on titanium surfaces stored in four media  0.5  *       *
                                                                          0
              2.6  成骨相关蛋白表达                                                   OPN      OSX     OCN
                                                                                      *
                  4组钛片表面接种MC3T3⁃E1细胞7 d后表达成                                    两组比较,P < 0.05(n=3)。
                                                                 图 6  Western blot检测4种介质存储后的钛表面接种成骨
              骨相关蛋白的 Western blot 条带和灰度值比较结果
                                                                      细胞7 d后的成骨相关蛋白表达
              见图 6。各组之间 MC3T3⁃E1 细胞成骨相关蛋白表
                                                                 Figure 6  Osteogenesis⁃related protein expression in osteo⁃
              达水平均有统计学差异(P < 0.05),以 GAPDH 为内
                                                                         blasts cultured for 7 days on titanium surfaces
              参蛋白,OPN、OSX、OCN 的相对表达水平由高到低                                stored in four media Western blotting
              依次为Ag2S@BSA组 > BSA组 > 生理盐水组 > 空气
              组。该结果表明,经液体存储后的钛片表面增强了
                                                                         20
              MC3T3⁃E1细胞的成骨分化活性,其中Ag2S@BSA组                             ( U/L·gprot) 25   *     *
              的促进作用最明显。                                                  15         *
              2.7  ALP活性                                                活性  10
                  4组试件表面接种MC3T3⁃E1细胞7 d后的ALP                            ALP  5
              活性检测结果见图7。相比空气组,经3种液体保存                                     0
                                                                             空气  生理盐水  BSA溶液  Ag2S@BSA溶液
              后的钛片表面成骨细胞 ALP 活性均有不同程度升
                                                                             与Air组比较,P < 0.05(n=3)。
                                                                                       *
              高,其中 BSA 组和 Ag2S@BSA 组 ALP 的表达水平显                  图 7  4种介质存储后的钛表面接种成骨细胞7 d后的ALP
              著增强。结果提示,经液体存储后的钛片表面                                    活性
              MC3T3⁃E1 细胞成骨分化活性增强,且 BSA 组和                       Figure 7  The ALP activity of osteoblasts incubated for 7
              Ag2S@BSA组更为显著。                                             days on titanium specimens stored in four me⁃
                                                                         dia
              3  讨 论
                                                                钛种植体通常保存在封闭的无菌包装盒或生理盐
                  近年来我国种植体植入数量逐年增长,成品纯                          水中。纯钛表面暴露于空气中可快速形成二氧化
   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49