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第41卷第6期 冯 恬，龚丹丹，王露瑶，等. 人源抗c⁃Met抗体与rAGAP偶联物对卵巢癌细胞生物学特性的影响［J］.
2021年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（06）：817-825 ·821 ·

rAGAP 对c⁃Met 阳性细胞的特异性结合能力。结果
A
IOSE386 HO8910
170 kDa 显示，经过 c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 分别处
140 kDa
理后，HO8910细胞检测到的荧光强度大于IOSE386
细胞，显示 c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 可特异
37 kDa
性结合到c⁃Met阳性的HO8910的细胞膜上，而不与
B 1.5 * 几乎不表达 c⁃Met蛋白的IOSE386细胞结合（图7）。
c⁃Met蛋白相对表达水平 1.0 卵巢癌细胞恶性行为的影响
体外评估 c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 对
2.4

c⁃Met⁃IgG1和c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP对细胞增殖
2.4.1
能力的影响
0.5
CCK⁃8 结果显示，c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃
0 rAGAP 对卵巢癌细胞的增殖均有抑制作用，且在相
IOSE386 HO8910
A：Western blot 检测结果；B：定量分析细胞中 c⁃Met蛋白表达水 同浓度下，c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 抑制 HO8910 细胞增
平，两组比较，P < 0.001（n=3）。 殖 的 能 力 要 高 于 c ⁃ Met ⁃ IgG1，而 这 两 种 抗 体 对
*
图5 Western blot检测卵巢癌细胞c⁃Met的表达 IOSE386 细胞增殖的影响差异无统计学意义。另
Figure 5 Dectection of c⁃Met exprssion in ovarian cancer 外，阴性对照 PA⁃IgG 对 IOSE386 和 HO8910 这两种
cells by Western Blot
细胞增殖的影响差异均无统计学意义（图8）。

DAPI FITC Merge DAPI FITC Merge

PBS PBS

IOSE386 c⁃Met⁃lgG1 HO8910 c⁃Met⁃lgG1

c⁃Met⁃lgG1⁃rAGAP c⁃Met⁃lgG1⁃rAGAP

图6 免疫荧光检测c⁃Met⁃IgG1及c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP与细胞的特异性结合（×100）
Figure 6 The specific binding of c⁃Met⁃ IgG1 and c⁃MET⁃IgG1⁃rAGAP with cells surface by immuofluorescence microscopy
（×100）

2.4.2 c⁃Met⁃IgG1和c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP对细胞迁移 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 对细胞迁移的抑制作用要高于
的影响 c⁃Met⁃IgG1 组（P < 0.05）。而在 IOSE386 细胞中，不

200 μg/mL 的 c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 同 处 理 的 细 胞 迁 移 率 差 异 无 统 计 学 意 义（P >
分别处理细胞，结果显示（图 9）：细胞划痕 48 h 后， 0.05）。
HO8910细胞组中，PBS组的划痕愈合率为63.69％， 2.4.3 c⁃Met⁃IgG1和c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP对细胞侵袭

c⁃Met⁃IgG1 组划痕愈合率为 51.17％，c⁃Met⁃IgG1⁃ 能力的影响
rAGAP组细胞划痕愈合率为 38.44％。表明两种抗 Transwell 侵 袭 实 验 结 果 显 示 ，200 μg/mL 的
体对 HO8910 细胞的迁移能力均有抑制作用，且 c⁃Met⁃IgG1 和 c⁃Met⁃IgG1⁃rAGAP 分别处理 48 h 后，