Page 80 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 80

第41卷第7期
               ·1010 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年7月


              A                                       B   15                        C  4        *
                              Con  STZ  STZ+GE25 STZ+GE50           **
                                                         BAX/BCL2                     Cleaved⁃caspase3/Caspase3  2
                        BCL2                    26 kDa    10                           3
                         BAX                    20 kDa     5
                Cleaved⁃caspase3                17 kDa                                 1             #    #
                                                                         ##   ##
                      Caspase3                  35 kDa     0                           0
                                                                         STZ+GE50
                                                              Con  STZ                     Con  STZ
                      α⁃tublin                  50 kDa              STZ+GE25                    STZ+GE25 STZ+GE50
                 A:Western blot检测BAX、BCL2、Cleaved⁃caspase3、Caspase3的表达;B:BAX/BCL2蛋白相对表达水平;C:Cleaved⁃caspase3/Caspase3蛋白相
              对表达水平。与Con 组比较,P < 0.05,P < 0.01;与STZ 组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=5)。
                                  *
                                                          #
                                         **
                                                                 ##
                                              图3 栀子苷对凋亡相关蛋白表达的影响
                               Figure 3 The effect of geniposide on the expression of apoptosis⁃related proteins
              白的表达量明显降低(P < 0.01,图4)。免疫组化结                      升高(P < 0.01)。与 STZ 组相比,GE25 组、GE50 组
              果显示,LC3B 蛋白表达量在 STZ 组降低,栀子苷给                      小鼠的p⁃AMPK/AMPK 蛋白表达水平明显升高(P <
              药后升高,而P62蛋白的表达趋势相反(图4A)。                          0.05),而 p⁃mTOR/mTOR 蛋白表达水平明显降低
              2.5  栀子苷对 AMPK/mTOR 信号通路关键蛋白的                     (P < 0.01,图5)。
              影响                                                2.6  不同浓度栀子苷及葡萄糖对H9C2细胞活力的
                  用 Western blot 方法检测 p⁃AMPK、AMPK、p⁃            影响
              mTOR 和 mTOR 蛋白的表达水平。与对照组相比,                            不同浓度的葡萄糖处理 H9C2 心肌细胞,与正
              STZ 组小鼠的 p⁃AMPK/AMPK 蛋白表达水平明显降                    常组相比,33 mmol/L和44 mmol/ L葡萄糖处理组的
              低(P < 0.05),而 p⁃mTOR/mTOR 蛋白表达水平明显                细胞活力显著降低(P < 0.001,图 6A)。本研究中,


               A             Con                   STZ                  STZ+GE25               STZ+GE50



                  LC3B









                  P62





              B                           C   2.0                 D  3                  E  2.5
                               STZ+GE25                                     **                             ##
                                   STZ+GE50
                       Con  STZ               1.5                                          2.0
                LC3BⅡ                16 kDa               *          2
                LC3BⅠ                14 kDa  LC3BⅡ/LC3BⅠ  1.0  ##  **  P62/α⁃tublin       Beclin1/α⁃tublin  1.5
                α⁃tublin             50 kDa                   #      1          ##  ##     1.0     **   *
                   P62               62 kDa   0.5     ***                                  0.5
                α⁃tublin             50 kDa    0                     0                      0
                                                                            STZ
                                                                                                      STZ+GE50
                                                                                                   STZ
                                                                               STZ+GE50
                                                         STZ+GE50
                                                     STZ
                 Beclin1             60 kDa       Con  STZ+GE25         Con  STZ+GE25          Con  STZ+GE25
                α⁃tublin             50 kDa
                 A:免疫组化检测LC3B、P62的表达(×400);B:Western blot 检测LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1、P62的表达;C:LC3BⅡ/Ⅰ蛋白相对表达水平;D:P62
              蛋白相对表达水平;E:Beclin1蛋白相对表达水平。与Con 组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001;与STZ 组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=5)。
                                                                                                  ##
                                                                                            #
                                                           *
                                                                  **
                                                                         ***
                                              图4 栀子苷对自噬相关蛋白表达的影响
                               Figure 4  The effect of geniposide on the expression of autophagy⁃related proteins
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