Page 130 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第11期
               ·1622 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年11月


              新冠病毒疫苗者新冠病毒特异性免疫球蛋白M（im⁃                          据进行录入和管理，资料分析使用 SPSS 22.0 和
              munoglobulin M，IgM）抗体和免疫球蛋白G（immuno⁃              Stata14.0软件。阳性率等定性资料通过卡方检验分
              globulin G，IgG）抗体均为阳性可判定为确诊病例。                    析；微流控 S/CO（标本的吸光度）值等定量资料，当
              建立SARS⁃CoV⁃2抗体的快速定量检测方法是近期                        方差不齐时采用非参数检验分析。以核酸检测结
              SARS⁃CoV⁃2研究和防控工作的重点。                             果为金标准，统计分析不同检测指标的灵敏度、特
                                                                异度、Kappa值。P < 0.05为差异有统计学意义。
              1  对象和方法
                                                                2  结 果
              1.1  对象
                  入组 2020 年 1—2 月江苏省 SARS⁃CoV⁃2 感染              2.1  样本情况

              逆转录荧光定量 PCR（reverse transcription⁃quantita⁃            入选 2020 年 1—2 月 SARS⁃CoV⁃2 感染确诊病
              tive Real⁃time PCR，RT⁃qPCR）检测阳性确诊病例               例（确诊病例）与确诊病例的密切接触者（密接）共
              160 例、密切接触者 120 例的咽拭子与血清，排除其                      275 例，其中确诊病例 156 例（56.7%），密接 119 例
              中基本信息登记不全、样本不合格或样本量不足者                            （43.3%）；男136例（49.5%），女139例（50.5%）；年龄
             （确诊病例 4 例、密切接触者 1 例），编盲后检测，记                       （40.56±17.44）岁（1~88岁），中位年龄41岁。
              录结果后，揭盲、统计数据。                                     2.2  检测结果

              1.2  方法                                           2.2.1 检测方法比较
              1.2.1 微流控法                                             微流控与胶体金检测卡相对于 RT⁃qPCR 检测
                  SARS ⁃ CoV ⁃ 2 微 流 控 法（microfluidic method，   能力分析见表 1。与 RT⁃qPCR 检测法比较，微流控
              MF）IgG/IgM抗体检测试剂盒（天津中新科炬生物制                       法 IgM 检测灵敏度与特异度分别是 64.7%、99.2%，
              药股份有限公司），荧光免疫分析仪（F10pro）同时检                       微流控法 IgG 检测灵敏度与特异度分别是 98.7%、
              测血清中 IgG 与 IgM 抗体，微流控法通过控制试剂                      100.0%；胶体金法 IgM 检测灵敏度与特异度分别是
              卡内部微量荧光抗原抗体复合物的流动，采集样本                            55.7%、100.0%，胶体金法 IgG 检测灵敏度与特异度
              中与抗体含量呈正相关的荧光信号，实现对抗体的                            分别是 96.8%、98.3%。一致性分析发现，微流控法
                      ［9］
              定量检测 。根据产品说明书定量吸取 5 μL 血清/                        IgM（Kappa=60.6%）与胶体金法 IgM（Kappa=52.2%）
              血浆或10 μL全血样本加入到350 μL样本稀释液中，                      检测与 RT⁃qPCR 检测比较一致性中等；微流控法
              吸取 35 μL 稀释后样本液加入加样孔中，4~20 min                    IgG（Kappa=98.5%）与胶体金法 IgG（Kappa=94.8%）
              内，沿试剂卡黑色箭头方向，插入荧光免疫分析仪                            检测与RT⁃qPCR检测高度一致。
              判读结果，仪器分析并记录结果。
                                                                 表1 微流控与胶体金检测卡相对于RT⁃qPCR检测能力分析
              1.2.2 胶体金法                                         Table 1  Analysis of detection ability of the microfluidic
                  SARS⁃CoV⁃2 胶体金法（colloidal gold method，                 and the colloidal gold methods relative to
              CG）IgG/IgM抗体检测试剂盒（天津中新科炬生物制                                RT⁃qPCR                         （n）
              药股份有限公司），检测血清中 IgG 与 IgM 抗体，实                               微流控法     胶体金法      微流控法     胶体金法
              验步骤与结果判定参照产品说明书。                                   RT⁃qPCR    IgM       IgM      IgG       IgG
                                                                 核酸检测
              1.2.3 荧光RT⁃PCR法（RT⁃qPCR）                                   阳性 阴性 阳性 阴性 阳性 阴性 阳性 阴性
                  病毒核酸提取试剂提取咽拭子核酸（西安天隆科                          阳性       101  055  87  069  154  002  151  005
                                                                 阴性       001  118  00  119  000  119  002  117
              技有限公司），SARS⁃CoV⁃2 核酸检测试剂盒（荧光
              PCR法）（上海伯杰医疗科技有限公司）进行RT⁃qPCR                      2.2.2 COVID⁃19确诊病例IgG、IgM检测结果分析
              检测，反应条件体系均按照试剂说明书进行。同时                                 本研究中，COVID⁃19确诊病例共156例，男75例
              进行RNP基因（内参）检测，合成引物序列。RNP基                         （48.1%），女 81 例（51.9%）；年龄为（43.52±17.14）岁
              因检测结果阳性样本为有效结果。有效结果根据                             （4~77 岁），中位年龄 46 岁；病程为（27.37±11.53）d
              上述SARS⁃CoV⁃2核酸检测试剂盒说明书判定结果                        （0~52 d）；地区分布，苏州 84 例（53.8%），无锡 20 例
              阴阳性。                                              （12.8%），连云港 52 例（33.3%）；病程分布，病程
              1.3  统计学方法                                        <14 d为发病早中期，23例（14.7%），病程≥14 d为发
                  应用 Excel 软件对流行病学资料和实验室数                       病后期，133例（85.3%）。
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