Page 87 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第2期 南京医科大学学报（自然科学版）
2022年2月 Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） ·233 ·

·临床医学·

质谱直接鉴定血培养阳性菌的前处理方法评估

许雨乔，文 怡，张晓慧，夏文颖，倪 芳，陆燕飞 *
南京医科大学第一附属医院检验学部，国家医学检验临床医学研究中心分中心，江苏 南京 210029

［摘 要］ 目的：评估基于分离胶的两种前处理方法联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix⁃assisted laser desorp⁃
tion ionization⁃time of flight mass spectrometry，MALDI⁃TOF MS）直接鉴定血培养阳性病原菌的临床应用价值。方法：收集2020
年5—11月南京医科大学第一附属医院血培养阳性标本302例，分离胶⁃皂甙法和分离胶沉淀法分别处理后对阳性血培养标本
进行快速鉴定，结果分别与培养鉴定结果比较。结果：分离胶⁃皂甙法可在45 min内完成鉴定，分离胶沉淀法需20 min；单数菌
感染标本288例，使用两方法直接鉴定的准确率均为86.81%（250/288），其中两方法分别鉴定革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、革
兰阳性杆菌、真菌的准确率差异无统计学意义（P > 0.05）；复数菌感染标本14例，仅分离胶⁃皂甙法1例与培养鉴定结果一致，
其余标本两种方法均仅可准确鉴定其中的一种细菌。结论：两种基于分离胶的前处理方法联合质谱均可直接、快速、准确地鉴
定血培养病原菌，分离胶沉淀法可作为本实验室血培养快速鉴定常规的前处理方法。
［关键词］ 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；分离胶⁃皂甙法；分离胶沉淀法；血培养；快速鉴定
［中图分类号］ R446.11 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2022）02⁃233⁃06
doi：10.7655/NYDXBNS20220215

血流感染是一类严重的感染性疾病，其病情发 报道如下。
［1］
展迅速、病死率高 。及时有效的抗生素使用是治
1 材料和方法
疗血流感染的关键，研究表明血流感染患者抗生素
［2］
治疗每延迟 1 h，其平均存活率降低 7.6% 。血培 1.1 材料
［3］
养是诊断血流感染的金标准 ，血培养病原菌若能 收集 2020 年 5—11 月南京医科大学第一附属
快速鉴定，则对于指导临床用药、降低患者死亡率 医院血培养阳性标本 302 例。纳入标准：①直接镜
有重要意义。传统血培养病原菌鉴定在血培养仪 检发现病原菌；②同一患者同时送检的多个血培养
阳性报警后一般需要 18~24 h，甚至更长时间，基质 瓶选择最早报阳的阳性瓶。
辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix⁃assisted la⁃ BACTEC TM FX 血培养系统、血培养瓶和5 mL
ser desorption ionization⁃time of flight mass spectrome⁃ 注射器（BD 公司，美国）；VITEK MS 质谱仪及其配
try，MALDI⁃TOF MS）作为一种新型的微生物鉴定技 套试剂、大肠埃希菌ATCC 8739和VITEK 2⁃Compact
术，对纯菌落鉴定可在 6 min 内完成 ，具有快速、 全自动微生物鉴定系统及配套试剂（梅里埃公司，
［4］
准确的特点，有学者将此技术应用于阳性血培养 法国）；血平板、巧克力平板（郑州安图公司）；真空
直接鉴定，极大地缩短了鉴定时间 ［2，4-6］ 。本研究 采血管（血清分离管）（Greiner 公司，德国）；甲酸、乙
利用基于分离胶的两种前处理方法联合 MALDI⁃ 腈和皂甙（Sigma⁃Aldrich 公司，美国）；75%乙醇（兴
TOF MS 直接鉴定血培养阳性病原菌，比较其与培 化市医疗卫生用品有限公司）。
养鉴定结果的一致性，旨在为临床早期目标性治 1.2 方法
疗提供快速可靠的病原学依据，并为本实验室血 1.2.1 分离胶⁃皂甙法
培养病原菌快速鉴定寻找合适的前处理方法。现 当血培养仪提示阳性报警时，取出阳性瓶进行
革兰染色，确保镜下有菌，颠倒混匀血培养瓶，用无
菌注射器抽取 4 mL 阳性血培养液至含分离胶的真
［基金项目］ 国家临床检验重点专科建设项目；江苏省实验
诊断学重点实验室（ZDXKB2016005） 空采血管内，室温3 500 r/min离心10 min，弃上清后
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通信作者（Corresponding author），E⁃mail：549793546@qq.com 加入 1 mL 无菌去离子水，混匀并转移至 1.5 mL EP