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第42卷第2期             许雨乔,文 怡,张晓慧,等. 质谱直接鉴定血培养阳性菌的前处理方法评估[J].
                  2022年2月                     南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(02):233-238                       ·237 ·


                骤,对人员没有特殊要求,一般需要 45 min 完成鉴                           14 例复数菌感染标本中,仅分离胶⁃皂甙法有
                定。两种前处理方法在288例单数菌感染标本中直                           1 例完全鉴定正确,但两种方法均能正确鉴定出其
                接鉴定的准确率均为86.81%,略高于其他分离胶法                         中 1 种菌,可能与 MALDI⁃TOF MS 本身就不适宜作
                                                                                      [13]
               (84.09%) ,且在属水平未有鉴定错误的情况发                          复数菌感染的鉴定有关 ,并且复数菌感染中菌量不
                        [10]
                生,鉴定结果可靠。对于血流感染常见菌如大肠埃                            同,质谱只能鉴定出其中含量较高的一种 。本研究
                                                                                                      [5]
                希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞                            复数菌感染标本中,两种前处理方法出现鉴定结果
                菌、金黄色葡萄球菌及肠球菌属两前处理方法准确                            不一致的情况,后证实均为复数菌感染菌中的一种。
                率极高(>90%)。另外,对于需/厌氧瓶中的病原菌                         表明联合此两种前处理方法可提高复数菌感染的检
                两前处理方法鉴定的准确率差异无统计学意义,均                            出率,当然,此结论还有待进一步研究证实。

                可进行不同血培养瓶病原菌的直接鉴定,且在 1 h                               综上所述,基于分离胶的两种阳性血培养瓶
                内完成,满足临床需求。相对而言,分离胶⁃皂苷法                           前处理方法联合 MALDI⁃TOF MS 均可直接、快速、
                对革兰阳性菌的准确率高于分离胶沉淀法,对革兰                            准确地鉴定血培养病原菌,可行性强,在不增加成
                阴性菌及真菌的准确率低于分离胶沉淀法,但并无                            本的情况下,利用实验室现有资源,缩短血培养阳
                统计学差异,故推荐分离胶沉淀法作为本实验室血                            性病原菌鉴定时间,为血流感染目标性治疗节省
                培养快速鉴定常规的前处理方法。同时使用两种                             宝贵时间。分离胶沉淀法步骤简单,可作为本实
                前处理方法时,病原菌鉴定的准确率提高,尽管和                            验室血培养快速鉴定常规的前处理方法,真菌及
                单一前处理方法相比差异没有统计学意义,但对于                            革兰阳性杆菌的血培养前处理方法还有待进一步
                单个感染标本而言,可增加病原菌的检出率和准确                            研究。
                率,减少实验误差。                                        [参考文献]
                    两种方法联合质谱直接鉴定血培养革兰阴
                                                                 [1] SEIFERT H. The clinical importance of microbiological
                性杆菌的准确率高于革兰阳性菌,与文献报道类
                                                                       findings in the diagnosis and management of bloodstream
                似 [5-8,10,12] 。其中分离胶沉淀法直接鉴定革兰阴性
                                                                       infections[J]. Clin Infect Dis,2009,48(s4):S238-S245
                杆菌的准确率明显高于革兰阳性球菌,提示该法更                           [2] ZHOU M,YANG Q,KUDINHA T,et al. An improved in⁃
                适用于革兰阴性杆菌血流感染的直接鉴定;分离胶⁃                                house MALDI⁃TOF MS protocol for direct cost⁃effective
                皂甙法两者之间差异并无统计学意义,可能是由于                                 identification of pathogens from blood cultures[J]. Front
                增加了破壁及蛋白提取步骤。革兰阳性菌中链球                                  Microbiol,2017,8:1824
                菌、少见革兰阳性球菌及革兰阳性杆菌鉴定率显著                           [3] LAMY B,SUNDQVIST M,IDELEVICH E A. Bloodstream
                低于肠球菌、葡萄球菌,可能与质谱仪相应菌株库                                 infections⁃standard and progress in pathogen diagnostics
                                                                      [J]. Clin Microbiol Infect,2020,26(2):142-150
                差异有关,另外病原菌生长缓慢,达不到质谱检测
                                                                 [4] 潘宏伟,孙恩华. MALDI⁃TOF MS直接鉴定阳性血培养
                限可能也是原因之一,有学者建议通过短时液相或固
                                                                       病原菌的前处理方法选择[J]. 中华检验医学杂志,
                相培养可提高此类细菌鉴定的准确率 。质谱直接
                                                 [13]
                                                                       2018,41(8):563-566
                鉴定血培养真菌的检出率普遍较低 ,王岩等 分析                          [5] 张菲菲,王       启,李荷楠,等. Sepsityper Kit 试剂盒法或
                                                        [6]
                                               [5]
                可能是由于真菌本身细胞壁结构特殊,核蛋白未能                                 血清分离胶法联合MALDI⁃TOF MS快速鉴定血培养阳
                释放;另外有些菌株缺乏特异性峰值或峰值数量不                                 性病原菌[J]. 中华微生物学和免疫学杂志,2018,38
                足从而无鉴定结果。本研究真菌的检出率低于文                                 (2):111-115
                献报道   [5-6] ,可能与前处理时吸取液体的量及离心                    [6] 王    岩,曹敬荣,常      玥,等. 分离胶法与十二烷基硫酸
                机转速有关,导致富集的真菌量少,无法达到质谱                                 钠法在血培养阳性瓶基质辅助激光解析电离飞行时间
                                                                       质谱病原菌直接鉴定中的应用[J]. 中华实验和临床感
                的最低检测限       [14] ,另外真菌细胞壁利用本文前处
                                                                       染病杂志(电子版),2018,12(4):324-329
                理方法破壁效果不佳,文献报道增加前处理培养
                                                                 [7] 许春燕,郭       锋,上官佳敏,等. 一种联合 MALDI⁃TOF
                液的量,并在离心、洗涤过程中加入吐温⁃20、玻璃
                                                                       MS 直接鉴定阳性血培养瓶方法改进及与 Sepsityper
                                                   [2]
                珠等操作可将真菌检出率提高至 90% 。后期本                                Kit 试剂盒法、SELTERS 法和血清分离胶法的比较[J].
                实验室将针对革兰阳性杆菌、真菌等直接鉴定准                                  中国微生态学杂志,2020,32(3):334-339
                确率低的血培养阳性病原菌摸索合适的血培养前                            [8] 尚    军,李修远,王丽赟,等. 优化差速离心法在血培养
                处理方法。                                                  报警瓶MALDI⁃TOF MS细菌鉴定中的应用[J]. 临床检
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