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第42卷第2期 许雨乔,文 怡,张晓慧,等. 质谱直接鉴定血培养阳性菌的前处理方法评估[J].
2022年2月 南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(02):233-238 ·237 ·
骤,对人员没有特殊要求,一般需要 45 min 完成鉴 14 例复数菌感染标本中,仅分离胶⁃皂甙法有
定。两种前处理方法在288例单数菌感染标本中直 1 例完全鉴定正确,但两种方法均能正确鉴定出其
接鉴定的准确率均为86.81%,略高于其他分离胶法 中 1 种菌,可能与 MALDI⁃TOF MS 本身就不适宜作
[13]
(84.09%) ,且在属水平未有鉴定错误的情况发 复数菌感染的鉴定有关 ,并且复数菌感染中菌量不
[10]
生,鉴定结果可靠。对于血流感染常见菌如大肠埃 同,质谱只能鉴定出其中含量较高的一种 。本研究
[5]
希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞 复数菌感染标本中,两种前处理方法出现鉴定结果
菌、金黄色葡萄球菌及肠球菌属两前处理方法准确 不一致的情况,后证实均为复数菌感染菌中的一种。
率极高(>90%)。另外,对于需/厌氧瓶中的病原菌 表明联合此两种前处理方法可提高复数菌感染的检
两前处理方法鉴定的准确率差异无统计学意义,均 出率,当然,此结论还有待进一步研究证实。
可进行不同血培养瓶病原菌的直接鉴定,且在 1 h 综上所述,基于分离胶的两种阳性血培养瓶
内完成,满足临床需求。相对而言,分离胶⁃皂苷法 前处理方法联合 MALDI⁃TOF MS 均可直接、快速、
对革兰阳性菌的准确率高于分离胶沉淀法,对革兰 准确地鉴定血培养病原菌,可行性强,在不增加成
阴性菌及真菌的准确率低于分离胶沉淀法,但并无 本的情况下,利用实验室现有资源,缩短血培养阳
统计学差异,故推荐分离胶沉淀法作为本实验室血 性病原菌鉴定时间,为血流感染目标性治疗节省
培养快速鉴定常规的前处理方法。同时使用两种 宝贵时间。分离胶沉淀法步骤简单,可作为本实
前处理方法时,病原菌鉴定的准确率提高,尽管和 验室血培养快速鉴定常规的前处理方法,真菌及
单一前处理方法相比差异没有统计学意义,但对于 革兰阳性杆菌的血培养前处理方法还有待进一步
单个感染标本而言,可增加病原菌的检出率和准确 研究。
率,减少实验误差。 [参考文献]
两种方法联合质谱直接鉴定血培养革兰阴
[1] SEIFERT H. The clinical importance of microbiological
性杆菌的准确率高于革兰阳性菌,与文献报道类
findings in the diagnosis and management of bloodstream
似 [5-8,10,12] 。其中分离胶沉淀法直接鉴定革兰阴性
infections[J]. Clin Infect Dis,2009,48(s4):S238-S245
杆菌的准确率明显高于革兰阳性球菌,提示该法更 [2] ZHOU M,YANG Q,KUDINHA T,et al. An improved in⁃
适用于革兰阴性杆菌血流感染的直接鉴定;分离胶⁃ house MALDI⁃TOF MS protocol for direct cost⁃effective
皂甙法两者之间差异并无统计学意义,可能是由于 identification of pathogens from blood cultures[J]. Front
增加了破壁及蛋白提取步骤。革兰阳性菌中链球 Microbiol,2017,8:1824
菌、少见革兰阳性球菌及革兰阳性杆菌鉴定率显著 [3] LAMY B,SUNDQVIST M,IDELEVICH E A. Bloodstream
低于肠球菌、葡萄球菌,可能与质谱仪相应菌株库 infections⁃standard and progress in pathogen diagnostics
[J]. Clin Microbiol Infect,2020,26(2):142-150
差异有关,另外病原菌生长缓慢,达不到质谱检测
[4] 潘宏伟,孙恩华. MALDI⁃TOF MS直接鉴定阳性血培养
限可能也是原因之一,有学者建议通过短时液相或固
病原菌的前处理方法选择[J]. 中华检验医学杂志,
相培养可提高此类细菌鉴定的准确率 。质谱直接
[13]
2018,41(8):563-566
鉴定血培养真菌的检出率普遍较低 ,王岩等 分析 [5] 张菲菲,王 启,李荷楠,等. Sepsityper Kit 试剂盒法或
[6]
[5]
可能是由于真菌本身细胞壁结构特殊,核蛋白未能 血清分离胶法联合MALDI⁃TOF MS快速鉴定血培养阳
释放;另外有些菌株缺乏特异性峰值或峰值数量不 性病原菌[J]. 中华微生物学和免疫学杂志,2018,38
足从而无鉴定结果。本研究真菌的检出率低于文 (2):111-115
献报道 [5-6] ,可能与前处理时吸取液体的量及离心 [6] 王 岩,曹敬荣,常 玥,等. 分离胶法与十二烷基硫酸
机转速有关,导致富集的真菌量少,无法达到质谱 钠法在血培养阳性瓶基质辅助激光解析电离飞行时间
质谱病原菌直接鉴定中的应用[J]. 中华实验和临床感
的最低检测限 [14] ,另外真菌细胞壁利用本文前处
染病杂志(电子版),2018,12(4):324-329
理方法破壁效果不佳,文献报道增加前处理培养
[7] 许春燕,郭 锋,上官佳敏,等. 一种联合 MALDI⁃TOF
液的量,并在离心、洗涤过程中加入吐温⁃20、玻璃
MS 直接鉴定阳性血培养瓶方法改进及与 Sepsityper
[2]
珠等操作可将真菌检出率提高至 90% 。后期本 Kit 试剂盒法、SELTERS 法和血清分离胶法的比较[J].
实验室将针对革兰阳性杆菌、真菌等直接鉴定准 中国微生态学杂志,2020,32(3):334-339
确率低的血培养阳性病原菌摸索合适的血培养前 [8] 尚 军,李修远,王丽赟,等. 优化差速离心法在血培养
处理方法。 报警瓶MALDI⁃TOF MS细菌鉴定中的应用[J]. 临床检