Page 10 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第10期
·1336 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年10月

模结束后，提取小鼠scWAT总RNA。qRT⁃PCR结果
2 结 果
显示，野生型小鼠清除巨噬细胞后scWAT产热能力
2.1 清除巨噬细胞可以抑制低温刺激诱导的scWAT 标志物（UCP1、Cidea、Cox8b）基因的表达明显低于
产热能力且低温刺激促进小鼠scWAT中MSR1的表达 对照小鼠（图 1B~D）。为了进一步探究低温刺激对
为了研究巨噬细胞在低温刺激诱导的脂肪组 小鼠脂肪组织 MSR1 表达的影响。将 8 周龄雄性野
织产热中的作用，给予 8 周龄雄性野生型小鼠氯膦 生型小鼠置于室温或寒冷条件下处理14 d，期间正常
酸盐脂质体处理，清除巨噬细胞。免疫荧光结果显 饮食喂养。造模结束后，提取小鼠 scWAT 总 RNA。
示 F4/80 巨噬细胞清除成功（图 1A）。随后置于室 qRT⁃PCR结果显示，小鼠给予寒冷刺激后scWAT中
+
温或寒冷条件下处理 14 d，期间正常饮食喂养。造 MSR1表达量明显高于对照小鼠（图1E）。

A PBS liposomes 25 ℃ Clodronate liposomes 25 ℃ PBS liposomes 6 ℃ Clodronate liposomes 6 ℃

B 60 *** C 20 *** D 20 *** E 4 ***
UCP1 mRNA相对表达量 40 *** * Cidea mRNA相对表达量 15 5 *** * Cox8b mRNA相对表达量 15 5 *** * mRNA相对表达量 MSR1 3 2 1

10
10
20
0
0
0
Clodronate liposomes 25 ℃
PBS liposomes 25 ℃ PBS liposomes 6 ℃ PBS liposomes 25 ℃ PBS liposomes 6 ℃ PBS liposomes 25 ℃ PBS liposomes 6 ℃ 0 25 ℃ 6 ℃
Clodronate liposomes 25 ℃
Clodronate liposomes 6 ℃
Clodronate liposomes 6 ℃
Clodronate liposomes 6 ℃
Clodronate liposomes 25 ℃
A：免疫荧光染色检测清除野生型小鼠巨噬细胞并低温刺激14 d后小鼠scWAT中F4/80（绿色荧光）巨噬细胞，比例尺为50 μm（n：3~5）；
+
B~D：qRT⁃PCR 检测清除 MSR1 小鼠巨噬细胞并低温刺激 14 d 后，小鼠 scWAT 中 UCP1（B）、Cidea（C）和 Cox8b（D）表达量。两组比较，
+/+
P < 0.05， P < 0.001（n：6~8）；E：qRT⁃PCR检测低温刺激野生型小鼠14 d后，小鼠scWAT中MSR1表达量（n=6）。
* ***
图1 清除野生型小鼠巨噬细胞并低温刺激14 d后小鼠scWAT的产热能力以及低温刺激14 d后小鼠scWAT中MSR1的表达
Figure 1 The thermogenic capacity of scWAT of WT mice after macrophages clearance and 14 days of cold exposure，and
MSR1 expression in adipose tissue of mice after 14 days of cold exposure

2.2 MSR1不影响急性低温刺激情况下小鼠脂肪组 于室温条件下小鼠（部分指标未达到统计学差异）；
织的产热能力 MSR1表达缺失小鼠与野生型对照小鼠相比差异无
为了探究 MSR1 在小鼠脂肪产热过程中的作 统计学意义（图 2C~H），说明在短期（1 d）寒冷刺激
用，使用 MSR1 小鼠进行研究。首先对 MSR1 小 条件下MSR1不影响脂肪组织产热能力。
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鼠进行基因型鉴定（图 2A），并通过 Western blot 检 2.3 低温刺激 14 d 后 MSR1 小鼠脂肪组织的产热
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测了小鼠脂肪组织中MSR1的表达情况（图2B）。将 能力显著降低
8 周龄雄性 MSR1 和 MSR1 小鼠置于室温或寒冷 将 8 周龄雄性 MSR1 和 MSR1 小鼠置于室温
+/+
+/+
-/-
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条件下处理1 d（短期急性冷刺激），期间正常饮食喂 或寒冷条件下处理14 d（长期慢性冷刺激），期间正常
养。造模结束后，提取4组小鼠scWAT和BAT总RNA。 饮食喂养。14 d后，提取小鼠scWAT和BAT总RNA
qRT⁃PCR 结果显示，置于 6 ℃条件下小鼠 scWAT 和 以及小鼠scWAT总蛋白。qRT⁃PCR结果显示，置于
BAT中产热指标（UCP1、Cidea和Cox8b）表达量均高 低温条件下，小鼠脂肪组织中 UCP1、Cidea 和 Cox8b