Page 11 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第10期          张天天,李金杰,柏雪雅,等. A1类清道夫受体通过促进M2型巨噬细胞极化增加脂肪组织
                 2023年10月               产热能力[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(10):1333-1341                  ·1337 ·


                       A                                       B                +/+          -/-
                             MSR1 +/+     MSR1 -/-                          MSR1         MSR1
                                                     202 bp       MSR1                               70 kDa
                                                     154 bp      GAPDH                               37 kDa

                C  8                             D  5                *            E  4          *
                 mRNA相对表达量  6 4                   Cidea mRNA相对表达量  4 3 2            Cox8b mRNA相对表达量  3 2  **






                 UCP1  2                            1                                1
                  0                                 0                                0
                    +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃  +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃  +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃
                 MSR1   MSR1   MSR1  MSR1         MSR1   MSR1   MSR1  MSR1         MSR1   MSR1   MSR1  MSR1

                F  8                *            G  4                *            H  8
                 UCP1 mRNA相对表达量  6 4 2            Cidea mRNA相对表达量  3 2 1  **        Cox8b mRNA相对表达量  6 4 2









                  0                                 0                                0
                    +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃  +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃  +/+ 25℃  -/- 25℃  +/+ 6℃  -/- 6℃
                 MSR1   MSR1   MSR1  MSR1         MSR1   MSR1   MSR1   MSR1        MSR1   MSR1   MSR1   MSR1


                   A:MSR1 和MSR1 小鼠基因型鉴定(n=3);B:Western blot检测MSR1 和MSR1 小鼠scWAT中MSR1的表达(n=3);C~E:qRT⁃PCR检测
                                                                         -/-
                                -/-
                                                                   +/+
                         +/+
                小鼠给予低温刺激1 d后,scWAT中UCP1(C)、Cidea(D)和Cox8b(E)表达量;F~H:qRT⁃PCR检测小鼠给予低温刺激1 d后,BWT中UCP1(F)、
                Cidea(G)和Cox8b(H)表达量。两组比较,P < 0.05,P < 0.01(n:4~6)。
                                            *
                                                   **
                                                              -/-
                                                      +/+
                                     图2 低温刺激MSR1 和MSR1 小鼠1 d后小鼠脂肪组织的产热能力
                     Figure 2 The thermogenic capacity of adipose tissue of MSR1 and MSR1 mice after 1 day of cold exposure
                                                                                -/-
                                                                      +/+
                表达量明显高于室温条件下小鼠;MSR1 小鼠给予                          PCR 结果显示,MSR1       -/-  6 ℃小鼠 scWAT 中 Mrc2 和
                                                    -/-
                6 ℃处理,scWAT 和 BAT 中 UCP1、Cidea 和 Cox8b 表          Mgl1 的表达量均明显低于 MSR           +/+  6 ℃小鼠(图 4A、
                达量明显低于 MSR       +/+  6 ℃小鼠(图 3A~F)。Western       B)。对scWAT中的SVF进行流式细胞术检测,结果
                blot 结 果 同 样 显 示 ,置 于 低 温 环 境 下 MSR1 和            同样显示,与MSR 6 ℃小鼠相比,MSR1 6 ℃小鼠
                                                                                                      -/-
                                                                                  +/+
                                                          +/+
                MSR1 小鼠脂肪组织中 UCP1 表达水平显著高于                        F4/80 CD11b CD206 M2 型巨噬细胞比例明显降
                                                                       +
                                                                              +
                                                                                     +
                     -/-
                                                                           +
                                                                                 +
                                                                                        +
                室温条件下小鼠;与 MSR           +/+  6 ℃小鼠相比,MSR1   -/-   低,F4/80 CD11b CD11c M1 型巨噬细胞比例增高
                6 ℃小鼠scWAT中UCP1表达水平明显降低(图3G、                     (图 4C、D)。以上结果表明,低温刺激下,MSR1 促
                H),说明 MSR1 可以促进慢性冷刺激诱导的脂肪组                        进小鼠脂肪组织产热是通过诱导脂肪组织M2型巨
                织产热。                                              噬细胞的极化实现的。
                2.4  低温刺激情况下,与对照组相比 MSR1 小鼠                       2.5  MSR1 肥胖小鼠脂肪组织产热能力显著降低
                                                                            -/-
                                                        -/-
                scWAT中M2型巨噬细胞数量降低                                     为了进一步探究MSR1对肥胖小鼠脂肪组织产
                    为了探究低温刺激下MSR1对小鼠脂肪组织巨                         热的影响。给予 6 周龄雄性 MSR1 和 MSR1 小鼠
                                                                                                          -/-
                                                                                                 +/+
                噬细胞极化的影响,进一步检测了给予小鼠低温刺                            CD 或 HFD 连续喂养 12 周,每周监测小鼠体重变
                激 14 d 后,小鼠脂肪组织中 M2 型巨噬细胞的数量                      化。12周后,使用代谢笼法监测小鼠耗氧量和产热
                情况。14 d低温刺激后,提取小鼠scWAT总RNA和                       量变化。将高脂造模 MSR1 和 MSR1 小鼠分别置
                                                                                                    -/-
                                                                                           +/+
                基质血管成分(stromal vascular fraction,SVF),qRT⁃        于常温或低温环境刺激 7 d 后,提取小鼠 scWAT 和
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