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南京医科大学学报（自然科学版） 第43卷第10期
·1342 · Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） 2023年10月

·基础研究·

靶向MPO的次氯酸荧光探针用于细胞成像

徐辉军，王玉婷，秦亚娟，厉廷有 *

南京医科大学药学院，江苏 南京 211166

［摘 要］ 目的：合成靶向髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）的次氯酸（hypochloric acid，HClO）荧光探针并评估其HClO示
踪活性。方法：以硅罗丹明为荧光团合成SiRho⁃GABA⁃KYC，紫外分光光度计和荧光分光光度计检测其紫外光谱和荧光光谱
以及 pH 稳定性和选择性，CCK⁃8 法检测细胞毒性，用共聚焦显微镜进行细胞荧光成像。结果：合成了 SiRho⁃GABA⁃KYC，对
HClO响应高，选择性好，细胞毒性小，可示踪HeLa细胞中HClO浓度的变化。结论：探针SiRho⁃GABA⁃KYC 可用于检测HClO
浓度进而反映MPO催化活性。
［关键词］ 髓过氧化物酶；次氯酸；荧光探针
［中图分类号］ R446 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2023）10⁃1342⁃08
doi：10.7655/NYDXBNS20231002

Hypochloric acid fluorescence probe targeting MPO for cell imaging

XU Huijun，WANG Yuting，QIN Yajuan，LI Tingyou *
School of Pharmacy，Nanjing Medical University，Nanjing 211166，China

［Abstract］ Objective：The current study aims to synthesize hypochloric acid（HClO）fluorescent probes targeting myeloperoxidase
（MPO）and evaluate its HClO tracing activity. Methods：Si⁃rhodamine was used as the fluorophore to synthesize SiRho⁃GABA⁃KYC.
The UV spectrum，fluorescence spectrum，and pH stability and selectivity were detected with UV spectrophotometer and fluorescence
spectrophotometer. Cytotoxicity was detected with CCK ⁃ 8 method，and cell fluorescence imaging was performed by confocal
microscopy. Results：SiRho⁃GABA⁃KYC was synthesized，with a high response to HClO，a good selectivity，and a low cytotoxicity，
which can trace changes in HClO concentration in HeLa cells. Conclusion：The probe SiRho⁃GABA⁃KYC can be used to detect HClO
concentration，which in turn reflects MPO catalytic activity.
［Key words］ myeloperoxidase；hypochloric acid；fluorescent probe
［J Nanjing Med Univ，2023，43（10）：1342⁃1349］

髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）介导吞 达到峰值，并在第15天逐渐恢复到基础水平。对缺
噬体内卤代氧化剂的产生，在细菌杀伤，保护身体 血性卒中模型使用 MPO 抑制剂 KYC 可以减小脑梗
［1］
［2］
免受疾病侵害中起关键作用 。Chen 等 研究发 死体积，保护血脑屏障，减轻神经缺损 ［3-5］ 。大量研
现 MPO 活性与脑卒中相关，在短暂性大脑中动脉 究表明 MPO 可以作为脑卒中的标志物，且 MPO 抑
闭塞（transience middle cerebral artery occlusion，tM⁃ 制剂可以用于治疗脑卒中。
CAO）和永久性大脑中动脉闭塞（permanent middle 次氯酸（hypochloric acid，HClO）常被认为是中
cerebral artery occlusion，pMCAO）动物模型中，缺血 性粒细胞介导的细胞内杀伤微生物的活性物质。
皮层中的 MPO 活性在缺血开始 6 h 升高，在第 5 天 当过氧化氢存在时，Fe ⁃MPO（天然酶）经历双电子
3+
氧化，形成化合物Ⅰ（·por⁃Fe［IV］=O）和H2O。化合
+
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［基金项目］ 国家自然科学基金（81573280） 物 I 可以通过卤化物（Cl 、Br 、I ，但不包括 F ）或假
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∗ 通信作者（Corresponding author），E⁃mail：l_tingyou@njmu.edu.cn 卤化物（SCN）的双电子还原转化为天然酶，在还原