Page 57 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第2期 陈吉俊，王 梁，马诞骅，等. 环状RNA FAT1（hsa_circ_0001461）通过调控miR⁃181d⁃5p/miR⁃199a⁃5p
2023年2月 促进口腔鳞状细胞癌进展［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（2）：196-206 ·199 ·

A miR⁃199a⁃5p miR⁃181d⁃5p B 8 P < 0.001 C 2.0 P < 0.001 D 2.0 P < 0.001
circ FAT1的相对表达量 4

960 483 1 384 6 1.5 1.5
（33.5%） （16.8%） （48.3%） miR⁃181d⁃5p的相对表达量 1.0 miR⁃199a⁃5p的相对表达量 1.0
7 2 0.5 0.5
4 （0.2%） 9
（0.1%） （0.3%） 0 0.0 0.0
癌旁组织 OSCC组织 癌旁组织 OSCC组织
20 （n=30） （n=30） 癌旁组织 OSCC组织
（0.7%） （n=30） （n=30） （n=30） （n=30）

GSE131182
NCOA1 ATXN1 FAT1 TNPO3
FNDC3B SSH2 MAP3K4
E 6 * * F 1.5 G 1.5
circ FAT1的相对表达量 4 2 * * miR⁃181d⁃5p的相对表达量 1.0 * * * miR⁃199a⁃5p的相对表达量 1.0 * * *

0.5
0.5
0
hNOK SCC⁃25 CAL⁃27 HSC⁃2 HSC⁃3 0.0 hNOK SCC⁃25 CAL⁃27 HSC⁃2 HSC⁃3 * 0.0 hNOK SCC⁃25 CAL⁃27 HSC⁃2 HSC⁃3 *

H I
FAT1⁃wt Target： 5′ uuggaguuAGGAUACUGAAUGUa 3′ FAT1⁃wt Target： 5′ acuccacugacCUUGACACUGGc 3′
∶ ∶ ∶
hsa⁃miR⁃181d⁃5p miRNA：3′ uggguggcUGUUGUUACUUACAa 5′ hsa⁃miR⁃199a⁃5p miRNA：3′ cuuguccaucaGACUUGUGACCc 5′
FAT1⁃mut Target： 5′ uuggaguuCGGAUACUGAAUAUa 3′ FAT1⁃mut Target： 5′ uuggaguuCGGGUACUCAAUAUa 3′
J K L M
SCC⁃25 SCC⁃25 HSC⁃3 HSC⁃3
1.5 同型对照组 1.5 同型对照组 1.5 同型对照组 1.5 同型对照组
相对荧光素酶活性 1.0 △ 相对荧光素酶活性 1.0 △△ 相对荧光素酶活性 1.0 △ 相对荧光素酶活性 1.0 △
miR⁃181d⁃5p mimic
miR⁃181d⁃5p mimic
miR⁃199a⁃5p mimic
miR⁃199a⁃5p mimic
0.5
0.5
0.5
0.5
0 0 0 0
FAT1⁃wt FAT1⁃mut FAT1⁃wt FAT1⁃mut FAT1⁃wt FAT1⁃mut FAT1⁃wt FAT1⁃mut
A：Venn图；B~D：实时定量PCR检测OSCC组织与癌旁组织中cincFAT1、miR⁃181d⁃5p、miR⁃199a⁃5p的表达；E~G：实时定量PCR检测不同
细胞系cincFAT1、miR⁃181d⁃5p、miR⁃199a⁃5p的表达，与hNOK细胞比较，P < 0.001；H~I：结合位点验证；J~M：双荧光素酶结果，与同型对照组
*
比较，P < 0.01， P < 0.001。
△△
△
图1 circFAT1、miR⁃181d⁃5p、miR⁃199a⁃5p在OSCC组织和细胞中的表达及关系
Figure 1 Expression and relationship of circFAT1，miR⁃181d⁃5p and miR⁃199a⁃5p in OSCC tissues and cells
5p mimic 以及miR⁃199a⁃5p mimic 降低了细胞迁移， miR⁃199a⁃5p mimic促进了细胞侵袭（P < 0.05）；miR⁃

而过表达 FAT1，miR⁃181d⁃5p inhibitor 以及 miR⁃ 199a⁃5p及miR⁃181d均逆转circFAT1对细胞侵袭的
199a⁃5p inhibitor 则加速了细胞迁移（P < 0.01）；值 调控作用（P < 0.01，图3B）。

得注意的是，miR⁃181d⁃5p inhibitor 以及 miR⁃199a⁃ 2.4 circFAT1 通过调控 miR⁃181d⁃5p/miR⁃199a⁃5p
5p inhibitor 均可以部分逆转 siFAT1 降低的相对迁 调节OSCC细胞凋亡

移率，而miR⁃181d⁃5p mimic以及miR⁃199a⁃5p mimic 与siNC+IC#1组相比，siFAT1+IC#1组的细胞凋
均部分降低了过表达 FAT1 升高的相对迁移率（P < 亡率明显升高（P < 0.001），而 siNC+miR⁃181d⁃5p
0.01，图3）。侵袭实验呈现了相同的现象，沉默circ⁃ inhibitor 组的细胞凋亡率下降（P < 0.05）；siFAT1+
FAT1、miR⁃181d inhibitor及miR⁃199a⁃5p inhibitor抑 miR⁃181d⁃5p inhibitor 组逆转了 siFAT1+IC#1 组和
制了细胞侵袭，过表达circFAT1、miR⁃181d mimic及 siNC+miR⁃181d⁃5p inhibitor 组对凋亡的调控作用