Page 27 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第6期 夏芷晴，张紫晨，付 麒，等. 精氨酸代琥珀酸合成酶⁃1对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响［J］.
2023年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（6）：764-771 ·769 ·

A B
DAPI TUNEL Merge
1.5
TUNEL阳性细胞率 0.5
Blank组 1.0 *

0
OE⁃ASS1组
OE⁃NC组 Blank组 OE⁃NC组

OE⁃ASS1组

C Blank组 OE⁃NC组 OE⁃ASS1组 D 40
10 4 10 4 10 4
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2
26.5 9.46 24.1 18.7 15.9 7.11 （ % ） 30
10 3 10 3 10 3 **
FL3⁃H ∶ PI ∶ 10 2 FL3⁃H ∶ PI ∶ 10 2 FL3⁃H ∶ PI ∶ 10 2 凋亡细胞率 20

10
1
10
Q4 Q3 10 1 Q4 Q3 10 1 Q4 Q3
55.8 8.31 43.2 14.0 67.2 9.72 0
OE⁃ASS1组
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 Blank组 OE⁃NC组
B.085 FL4⁃H∶∶Annexin V⁃AF647 N.090 FL4⁃H∶∶Annexin V⁃AF647 A.088 FL4⁃H∶∶Annexin V⁃AF647
A：TUNEL 检测β⁃TC6 细胞凋亡代表图片（×200）；B：TUNEL 阳性细胞率比较，与 OE⁃NC 组比较，P < 0.05（n=3）；C：AV/PI 流式细胞术检
*
测β⁃TC6细胞凋亡代表图片；D：AV/PI流式细胞术检测β⁃TC6细胞凋亡率比较，与OE⁃NC组比较，P < 0.01（n=3）。
**
图5 ASS1过表达载体转染后β⁃TC6细胞凋亡变化
Figure 5 Changes of apoptosis of β⁃TC6 cells transfected with ASS1 overexpression vector

与mTOR通路有关。 β细胞存在完整的尿素循环。在 IL⁃1β、TNF⁃α和
IFN⁃γ联合处理胰岛β细胞模拟炎症环境时，促进精
3 讨 论
氨酸代谢生成尿素，减少精氨酸生成NO，可减轻胰
［6］
ASS1是尿素循环中的限制酶，在肝脏和肾脏组 岛β细胞凋亡 。本研究发现生理条件下敲低ASS1
织中高表达。临床研究发现肥胖人群外周血单核 后胰岛β细胞凋亡率增加，增殖水平下降，而高表达
细胞中 ASS1 表达较正常人降低，并且 ASS1 的表达 ASS1 后胰岛β细胞凋亡率减少，增殖水平增加。这
与体重指数和脂肪重量呈负相关 ，这与高脂喂养 提示ASS1对胰岛β细胞生存和功能发挥保护作用。
［8］
小鼠胰岛中 ASS1 的变化一致。既往研究结果显示 mTOR 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，可感知细胞
IL⁃1β、TNF⁃α及 IFN⁃γ联合处理下，大鼠胰岛β细胞 外营养状态和细胞内 ATP 水平，对维持细胞生长和
和人胰岛细胞团 ASS1 和 iNOS 表达水平升高，同时 促进细胞增殖发挥重要作用 ［10］ 。Ki67 通常被认为
给予生理浓度的精氨酸或瓜氨酸时，胰岛细胞可以 是细胞增殖的标志物 ［11］ 。研究发现精氨酸可通过
生成更多的 NO，后者进一步促进胰岛β细胞凋亡， 溶质载体（solute carrier，SLC）中溶酶体 SLC38A9 激
［9］
损害胰岛β细胞 。除了ASS1，研究发现胰岛β细胞 活mTOR信号通路 ［12］ 。本研究中高表达ASS1后，胰
中也存在精氨基琥珀酸裂解酶、氨甲酰磷酸合成酶 岛β细胞存活数量增加，Ki67 和 mTOR 表达增加。
1、二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶 1、二甲基精氨 因此，ASS1 可能通过 mTOR 通路促进胰岛β细胞增
酸二甲基氨基水解酶⁃2、N⁃乙酰谷氨酸合酶，胰岛中 殖，这与既往研究中降低胃癌细胞ASS1表达会抑制