Page 62 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第7期
·948 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年7月

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义（P < 0.001），且 10 μg/cm 处 理 组 hsa_circ_ 所选研究指标的蛋白表达量在 10 μg/cm 处理组均
0005389 的表达也最高（P < 0.001）。如图 2H 所示， 升高（P < 0.05）。

A B
DAPI Cy3 Merge 2.0 胞核
胞质
空白组 RNA的相对表达量 1.5 *** * *
1.0
0.5

0 U6
GAPDH
LPS组 hsa_circ_0005389

A：荧光原位杂交观察 hsa_circ_0005389 在 A549 细胞中表达，hsa_circ_0005389 探针带有 Cy3 荧光，细胞核用 DAPI 染色（×200）；B：核质
分离：qRT⁃PCR验证A549细胞核以及细胞质中hsa_circ_0005389的相对表达量，提示hsa_circ_0005389主要定位于A549细胞质；核质间比较，
P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
* ** ***
图1 A549细胞中hsa_circ_0005389的表征
Figure 1 Characterization of hsa_circ_0005389 in A549 cells

A B C 1.5
0.6 0 μg/cm 2 2.0 ***
10 μg/cm 2 1.5 ***
nm ） 0.4 *** *** PI3K相对表达量 1.0 *** *
（ 450 D 0.2 ** hsa_circ_0005389 相对表达量 1.0 *** *** 0.5 ***
0.5
0 0 0
0 1 2 3 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
培养时间（d） LPS（μg/cm） LPS（μg/cm）
2
2
D E F G
8 2.5 *** 2.5
*** 2.0 ** 2.0 *** 5 4 ***
Akt相对表达量 4 2 ****** *** IL⁃6相对表达量 1.5 ** ** *** IL⁃8相对表达量 1.5 *** *** ****** sTNFR1相对表达量 3 2 *** *** ***
6
1.0
1.0
0 * 0.5 0 0.5 0 1 0
0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
LPS（μg/cm） LPS（μg/cm） LPS（μg/cm） LPS（μg/cm）
2
2
2
2
H LPS（μg/cm）
2
4 0 μg/cm 2
0 5 10 15 20 25 *** *** 5 μg/cm 2
蛋白相对表达量 2 ** * * ** * 15 μg/cm 2
PI3K 110 kDa 3 * * *** 10 μg/cm 2
TNF⁃α 17 kDa * 20 μg/cm 2 2
IL⁃6 26 kDa 1 25 μg/cm
β⁃actin 0
42 kDa PI3K TNF⁃α IL⁃6

A：LPS（10 μg/cm）处理不同时间后 A549 细胞的 CCK⁃8 结果；B~G：不同浓度 LPS 处理 48 h 后 A549 细胞中 hsa_circ_0005389、PI3K、Akt、
2
IL⁃6、IL⁃8、sTNFR1 的 mRNA 表达量；H：不同浓度 LPS 处理 48 h 后 A549 细胞中 IL⁃6、PI3K、TNF⁃α的蛋白表达量；与对照组（0 μg/cm）比较，
2
P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
* ** ***
图2 LPS诱导急性肺损伤细胞炎症模型的建立
Figure 2 Establishment of LPS⁃induced cell inflammation model of acute lung injury