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第45卷第10期
·1396 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年10月

alleviated AD symptoms. Concurrently，it attenuated AD pathology by inhibiting ace⁃1/ace⁃2 expression，and reducing AChE activity.
Conclusion：Burdock polysaccharide may alleviate and improve AD⁃related pathological processes by regulating the age⁃1/akt⁃1/daf⁃16

signaling pathway to reduce oxidative stress levels while inhibiting AChE activity.
［Key words］ Alzheimer’s disease；Caenorhabditis elegans；burdock polysaccharide；antioxidant properties；acetylcholinesterase
inhibitor
［J Nanjing Med Univ，2025，45（10）：1395⁃1403］

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种
1 材料和方法
［1］
起病隐匿的神经退行性疾病 ，病理学特征是老
年斑沉淀 、神经纤维缠结并伴有神经元损伤 。 1.1 材料
［3］
［2］
AD 病因复杂，发病机制仍不明确，学界提出六大假 课题组自制的牛蒡多糖（纯度≥99％，单糖组
说：β淀粉样蛋白（amyloid beta，Aβ）假说、神经炎症 成：半乳糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、阿拉伯糖）；5⁃羟
假说、Tau 蛋白假说、线粒体功能障碍假说、氧化应 色胺（上海阿拉丁公司）；左旋咪唑、丁二酮、NaCl、
激假说、胆碱能假说 。目前临床治疗药物只能缓 MgSO4、KH2PO4、NaH2PO4、CaCl2 （上海国药公司）；胰
［4］
解不能治愈疾病，且患者需长期服药，同时还存在 蛋白胨、胆固醇、甘油、NaClO（上海泰坦公司）；硫黄
一些明显的不良反应。因此，开发治疗 AD 的新药 素T（上海BBI公司）；多聚甲醛（北京兰杰柯公司）；
迫在眉睫。牛蒡是传统的中药，其瘦果和根皆可入 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）检测试
［5］
药 ，《本草纲目》记载其“久服轻身耐老”。牛蒡多 剂盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒、
［6］
糖是牛蒡根中的主要多糖成分 ，现已发现在抗氧 乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）检测试剂
化、防衰老、抗炎、降血糖等方面均有一定功效 ，结 盒（南京建成公司）；活性氧（reactive oxygen species，
［7］
合 AD 发病机制的六大假说与牛蒡多糖已有研究， ROS）检测试剂盒、PCR 试剂盒（南京诺唯赞公司）；
其可能具有缓解 AD 的潜力，但牛蒡多糖在神经退 TRIzol（北京天根公司）；逆转录试剂盒（北京全式金
行性疾病中的研究较少。秀丽线虫是一种进化上 公司）。
高度保守、具有良好遗传和化学筛选适用性的模式 1.2 方法
生物，也被越来越多地应用于抗 AD 药物的研究和 1.2.1 菌株和线虫培养
［8］
开发 。本研究采用课题组自制的牛蒡多糖，通过 实验所用秀丽线虫株系的名称、基因型、表型
作用于 AD 秀丽线虫病理模型（CL4176、CL2355、 见表1。秀丽线虫的生命周期分为胚胎期、幼虫期、
［9］
CL2006），发现牛蒡多糖对AD线虫模型具有显著疗 成虫期，其中幼虫期分为 L1~L4 期 。秀丽线虫以
效，明显改善 AD 症状，为 AD 的治疗提供了新思路 大肠杆菌 OP50 为食物，所有线虫和大肠杆菌 OP50
并奠定了实验基础。 均购于美国线虫遗传中心。

表1 秀丽线虫株系的名称、基因型和表型
Table 1 Names，genotypes，and phenotypes of C. elegans strains
Strain Genotype Phenotype
N2 Wild⁃type Wild⁃type
CL4176 dvIs27［myo⁃3p∷A⁃Beta（1⁃42）∷let⁃851 3′UTR）+ rol⁃6（su1006）］ Expression of Aβ produces muscle toxicity
CL2355 dvIs50［pCL45（snb⁃1∷Abeta 1⁃42∷3′UTR（long）+ mtl⁃2∷GFP］ Expression of Aβ produces neural toxicity
CL2122 dvIs15［（pPD30.38）unc⁃54（vector）+（pCL26）mtl⁃2∷GFP］ CL2355 control worms not expressing Aβ
CL2006 dvIs2［pCL12（unc⁃54/human Abeta peptide 1⁃42 minigene）+ rol⁃6（su1006）］ Expression of Aβ produces muscle toxicity

1.2.2 药物配制及分组 液、5⁃羟色胺溶液按常规方法配制。
将牛蒡多糖溶于超纯水，振荡，涡旋，使其充分 1.2.3 线虫同期化
溶解。线虫生长培养基（nematode growth medium， 在显微镜下观察线虫状态，当看到大部分虫
NGM）和含药 NGM 培养基、M9 缓冲液、左旋咪唑溶 体内有卵时，即可进行同期化。用 NaClO⁃NaOH 裂