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第45卷第2期             成治纬,卫昕怡,王婉莹,等. 化妆品中3种常见抗生素的一种快速检测方法[J].
                  2025年2月                     南京医科大学学报(自然科学版),2025,45(2):233-239                        ·237 ·


                    表5 不同浓度氧氟沙星加标样液的细菌回收率                         沙星和头孢克肟,5 μg/g、10 μg/g 和 50 μg/g 氯霉素
                Table 5  Bacterial recovery rates of different concentra⁃  的加标检测,实验结果均为阳性,符合预期目标。
                        tions of ofloxacin solutions    (%)
                                                                  3 讨    论
                    Concentration of      Bacterial recovery rate
                 ofloxacin solution(μg/g)  45 min     90 min
                                                                      抗生素具有杀菌、抑菌功能,但长期使用添加
                       0.2                100          100
                                                                  了大剂量抗生素的化妆品会破坏皮肤屏障作用                      [11] ,
                       1.0                100          093
                                                                  造成细菌耐药性增强 、使用者出现过敏症状等                     [12] ,
                                                                                     [6]
                       10.0               095          087
                       50.0               093          083        对消费者身心健康造成严重影响,最大的不良反应
                       250.0              088          079        在于细菌耐药性增强。抗生素耐药性是指微生物
                       1 000.0            083          071        在抗微生物药物影响下的生存能力                 [13] ,由于抗生素
                                                                  滥用,细菌耐药已经成为全球公共卫生安全危机                     [14] ,
                    表6 不同浓度头孢克肟加标样液的细菌回收率
                Table 6  Bacterial recovery rates of different concentra⁃  耐药细菌感染可造成治疗失败,发病率和病死率上
                        tions of cefixime solutions     (%)       升和医药费用增加。因此在临床中抗生素使用有
                                                                  严格限制,在化妆品中抗生素为禁用物质。
                    Concentration of      Bacterial recovery rate
                 cefixime solution(μg/g)  45 min      90 min          高效液相色谱法(high performance liquid chro⁃
                       0.2                100          100        matography,HPLC)是化妆品中抗生素检测的常用
                       1.0                100          092        方法  [15-16] ,由于化妆品成分复杂、种类繁多,HPLC法
                       10.0               100          090        易存在基质干扰而造成假阳性结果。免疫学检测
                       50.0               095          088                                  [17-19]
                                                                  方法主要是酶联免疫检测法                  ,化妆品中的抗生
                       250.0              092          073
                                                                  素与抗原或抗体相结合,通过酶对底物的显色反应
                       1 000.0            088          075
                                                                  实现定性或定量检测,该方法可以与化学发光检测
                浓度抗生素,更有现实意义,因此选择培养 90 min                        技术结合,具有灵敏度和特异度高的优点。微生物
                时各抗生素加标样液开始出现抑菌效果的浓度作                             检测方法主要通过观察微生物的生长情况来进行
                为本方法的最低检测量,即对氯霉素的最低检测量                            抗生素的检测,具有前处理要求低、操作简单、成本
                为 5 μg/g,氧氟沙星和头孢克肟的最低检测量均为                        低廉等优点。目前缺少应用于大量样品的快速初
                1 μg/g。                                           筛方法。
                    在培养45 min 时,加标样液开始出现抑菌效果                         《规范》中,对氯霉素使用HPLC检测,检出限为
                时,细菌回收率分别为94%、95%、95%;培养90 min                    3.3 μg/mL;对氧氟沙星使用液相色谱⁃串联质谱法
                时,其细菌回收率分别为92%、93%、92%。因此,以                       检测,检出限为10 ng/mL。根据本研究实验数据,本
                95%和93%作为该实验条件下45 min和90 min的标                    方法对氯霉素、氧氟沙星的最低检测量分别为5 μg/g、
                准回收率。                                             1 μg/g;头孢克肟属于头孢类抗生素,近年出现不法
                    在实际应用时,使用本方法对化妆品样品进行                          商贩于化妆品中添加头孢克肟的事件,但头孢类药
                处理和测定,当待测样品培养45 min时的细菌回收                         物并不在《规范》的检测范围             [20] 。目前关于化妆品
                率>95%且培养 90 min 时的细菌回收率>93%,则判                    中头孢类抗生素测定的文献报道较少,且无相关检
                定该样品为抗生素阴性;反之在任一培养时间的细                            验标准   [21] 。本研究建立了一种检测化妆品中头孢
                菌回收率低于标准回收率,则判定该样品为抗生素                            克肟的微生物检测方法,最低检测量为1 μg/g。
                阳性,即怀疑该样品非法添加抗生素,需要使用规                                在检测能力上本方法逊色于标准方法,但化妆
                范的标准方法进行进一步精确检测。                                  品中的抗生素添加量集中在 1 000~10 000 μg/g            [12] ,

                2.5  实际样品检测                                       本方法的最低检测量也已经满足了检测需求,具有
                    取市售未开封化妆品 6 件,使用本研究建立的                        实际应用意义。大型仪器分析方法成本昂贵,检测
                检测方法进行测定,培养45 min的细菌回收率均高                         时间较长,本方法价格低廉,检测快速,应用场景为
                于98.5%,培养90 min的细菌回收率均高于98%,即                     大量样品的初筛检测,这也是本方法的优势。
                                                                                                            [12]
                检测结果为抗生素阴性。另取不含以上3种抗生素                                根据2016—2020年我国化妆品监督抽检结果 ,
                的市售化妆品,进行 1 μg/g、10 μg/g 和 50 μg/g 氧氟             化妆品中抗生素添加量普遍较高,部分添加量已超
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