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第45卷第8期 张春梅,胡锦秋,毕晓艳,等. 三七总皂苷下调CD36信号通路对高脂饲料喂养小鼠血小板高反应性的
2025年8月 抑制作用[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2025,45(8):1092-1100 ·1095 ·
表1 实时荧光定量PCR所用引物序列 组间的比较采用单因素方差分析,再用Tukey法进行
Table 1 Primer sequences used in qRT⁃PCR 组间的两两比较,双侧P < 0.05为差异具有统计学意
Gene Primer Sequence(5′→3′) 义。各组数据统计至少来自3只独立的小鼠样本。
CD36 Forward ATGGGCTGTGATCGGAACTG
2 结 果
Reverse TTTGCCACGTCATCTGGGTTT
GAPDH Forward CATCACTGCCACCCAGAAGACTG
2.1 膳食补充PNS对小鼠体重和血脂水平的影响
Reverse ATGCCAGTGAGCTTCCCGTTCAG
经 12 周的干预,小鼠的体重变化情况如图 1A
1.2.8 Western blot实验 所示,饲养的整个过程,各组小鼠的体重均不断升
细胞裂解液对各组小鼠血小板沉淀进行裂解 高,从第8周开始,HFD组小鼠的体重显著高于LFD
后,用BCA蛋白浓度测定试剂盒对蛋白浓度进行测 组,差异具有统计学意义(P < 0.05)。在饲养的第
定,取30 μg蛋白质进行十二烷基硫酸钠⁃聚丙烯酰 8、12 周,HFD+PNS 组小鼠体重相比 HFD 组有降低
胺凝胶电泳,将蛋白转到聚偏二氟乙烯膜后,依次 的趋势,但是差异无统计学意义(P > 0.05)。在12周
进行脱脂奶粉溶液封闭、一抗和二抗孵育等步骤 的干预期间,LFD+PNS组小鼠体重相比LFD组差异
后,用自动化学发光图像分析系统对条带进行曝 无统计学意义(P > 0.05)。如图 1B~D 所示,相比
光,条带灰度用 Quantity One 1⁃D 分析软件(version LFD 组,HFD 可显著升高小鼠血浆 TC、TG 和 LDL⁃C
4.6.2)进行分析 [16-18] 。 水平(P < 0.05),且可经膳食补充 PNS 显著改善
1.3 统计学方法 (P < 0.01)。如图 1E 所示,HFD 组小鼠血浆 HDL⁃C
用GraphPad Prism统计软件(version 9.4.1)进行 水平较 LFD 组有下降趋势,但差异无统计学意义
数据统计分析和作图。实验数据用平均值±标准误 (P > 0.05),而膳食补充 PNS 可显著升高 HFD 小鼠
(x ± sx )表示,经正态性检验,所有实验数据均符合正 血浆HDL⁃C水平(P < 0.01)。LFD+PNS组和LFD组
态分布,且每个实验各组间的样本量均一致,因此多 血脂水平差异无统计学意义(P > 0.05)。
A B
LFD LFD+PNS 2.5 ** **
50
HFD 丈丈丈丈 * 2.0
HFD+PNS
丈丈丈丈
(g) 40 * 丈丈丈丈丈丈 TC (mmol/L) 1.5
Body weight 20 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 1.0
30
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
10
丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 0.5
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 0
0 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈
0 丈丈丈丈丈丈 4 丈丈丈丈丈丈 8 丈丈丈丈丈丈 12 丈丈丈丈丈丈 LFD LFD+PNS HFD HFD+PNS
Time(weeks)
C D E
** ** * ** **
0.8 0.3 2.0
(mmol/L) 0.6 (mmol/L) 0.2 (mmol/L) 1.5
0.4
1.0
TG 0.2 LDL⁃C 0.1 HDL⁃C 0.5
0 0 0
LFD LFD+PNS HFD HFD+PNS LFD LFD+PNS HFD HFD+PNS LFD LFD+PNS HFD HFD+PNS
A:Changes in body weight of mice. B-E:Measurement of plasma TC(B),TG(C),LDL⁃C(D)and HDL⁃C(E)levels. P < 0.05 and P < 0.01(A-D:
*
**
n=10;E:n=9).
图1 膳食补充PNS对小鼠体重和血脂水平的影响
Figure 1 Effect of PNS supplementation on murine body weight and plasma lipid levels
2.2 膳食补充PNS对小鼠高反应性的影响 LFD组小鼠相比,HFD组小鼠血小板聚集(图2A、B)
在血小板生理性激动剂凝血酶的作用下,与 和活化(图 2C~F)均显著升高(P < 0.05),表现为

