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第45卷第8期     张春梅，胡锦秋，毕晓艳，等. 三七总皂苷下调CD36信号通路对高脂饲料喂养小鼠血小板高反应性的
                  2025年8月               抑制作用［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（8）：1092-1100                   ·1093 ·


                and low density lipoprotein cholesterol were significantly increased in HFD group，which were greatly decreased by PNS
                supplementation. Moreover，PNS supplementation favorably attenuated HFD⁃induced platelet aggregation and activation in response to
                an agonist thrombin，including inhibiting platelet surface CD62P expression，and platelet factor 4（PF4）and chemokine ligand 5
               （CCL5）release，indicating a potent inhibitory effect of PNS on HFD⁃induced platelet hyperreactivity. Mechanistically，CD36 mRNA
                and protein expression increased by HFD were significantly down⁃regulated by PNS supplementation. Moreover，PNS supplementation
                also greatly attenuated HFD⁃induced activation of downstream signalling pathways mediated by CD36，including down⁃regulating Src
                and p47 phox  phosphorylation. Furthermore，it is found that platelet surface CD62P expression isolated from LFD mice in response to
                adenosine diphosphate were increased by adding hyperlipidemic plasma from HFD mice，which was greatly decreased in LFD+PNS
                group. This significant difference was abolished when pretreated with an anti⁃CD36 monoclonal antibody FA6⁃152. Conclusions：PNS
                supplementation attenuates platelet hyperreactivity in mice fed a high ⁃ fat diet possibly through down ⁃ regulating CD36 signalling
                pathway. The current study may provide potential value for PNS to improve thrombosis in hyperlipemia and the related chronic
                metabolic diseases.
               ［Key words］ total saponins of Panax notoginseng；platelet hyperreactivity；CD36 signalling pathway；hyperlipemia
                                                                            ［J Nanjing Med Univ，2025，45（08）：1092⁃1100］






                    正常功能的血小板对于维持生理性止血和凝                           止血等功效。药代学研究证实，三七总皂苷（total
                血至关重要，但血小板高反应性可促进动脉粥样硬                            saponins of Panax notoginseng，PNS）是从三七根茎中
                化和血栓形成，进而加速心血管疾病（cardiovascular                   提取出来的最主要的活性成分，具有抗炎、抗氧化、
                disease，CVD）的发生发展 。在 CVD 的危险因素                    抗动脉粥样硬化和抗血栓形成等作用                  ［11］ 。临床上，
                                       ［1］
                中，导致血小板反应性升高的病理因素有很多，其                            PNS制剂如血栓通注射液等被广泛用于治疗血栓性
                中最常见的包括高脂血症和糖尿病                 ［2-3］ 。大量研究       心血管疾病，其机制与其抑制血小板聚集、活化和
                证明，高脂血症诱导的血小板高反应性对于促进                             黏附密切相关       ［12］ 。本课题组前期的体外实验研究
                CVD 发生发展过程中的心血管并发症尤其是血栓                           发现 PNS 可显著抑制 ox⁃LDL 诱导的血小板线粒体
                形成起关键作用，其中的机制错综复杂，普遍认为                            损伤和细胞凋亡        ［13］ ，但是，膳食补充 PNS 对高脂血
                血小板表面的清道夫受体CD36及其介导的信号通                           症小鼠血小板高反应性的调控作用及机制尚缺乏
                路在其中发挥重要作用           ［4-6］ 。在高脂血症患者的循             报道。因此，本研究通过动物实验探讨膳食补充
                环血液中，大量的氧化磷脂尤其是氧化型低密度脂                            PNS对高脂饲料喂养小鼠血小板高反应性的调控效
                蛋白（oxidized low⁃density lipoprotein，ox⁃LDL）通过     应及可能机制，为PNS 改善高脂血症及相关慢性代
                与血小板表面的 CD36 结合，介导一系列的胞内信                         谢性疾病中血栓形成提供参考。
                号转导事件，如激活 Src/Syk/NOX2 等信号通路，进
                                                                  1 材料和方法
                而诱导血小板内产生大量的活性氧（reactive oxygen
                species，ROS），最终导致血小板反应性升高 ，高反                     1.1 材料
                                                      ［7］
                应性的血小板在受到血液中的一些激动剂如血管                                 PNS粉末（纯度>98%，货号：S4820，北京索莱宝
                内皮暴露的胶原以及循环血液中的凝血酶等刺激                             科技公司）；血小板因子4（platelet factor 4，PF4）和趋
                时，表现为聚集和活化异常升高，进而参与心血管                            化因子配体 5（chemokine ligand 5，CCL5）酶联免疫
                事件尤其是血栓的形成和发展 ，严重的血栓形成                            吸附试剂盒（货号：ab202403、ab100739）、CD36中和
                                           ［1］
                导致的心梗和脑梗是致死和致残的重要危险因                              性抗体 FA6⁃152（货号：ab17044）（Abcam 公司，英
                素。因此，抑制血小板高反应性进而改善血小板功                            国）；凝血酶（货号：T6884）和二磷酸腺苷（adenosine
                能是减缓高脂血症和 CVD 中心血管并发症发生发                          diphosphate，ADP，货号：SML1231）（Sigma⁃Aldrich公
                展的重要途径之一        ［4，8-9］ 。                         司，美国）；CD36 抗体（货号：TA374445）、β⁃actin 抗
                    近年来，传统中药因其成分天然和不良反应小                          体（ 货 号 ：TA328070）以 及 羊 抗 兔 二 抗（ 货 号 ：
                等诸多优点成为国内外研究的热点                 ［10］ 。三七属于        TA397275）（OriGene Technologies 公 司 ，美 国 ）；
                五加科植物，作为一味传统中药材，具有活血化淤、                           p⁃Src（Ser ）抗体（货号：AP1370）和 Src 抗体（货号：
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