Page 58 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2025年第9期
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第45卷第9期
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              主要发生在肿瘤及转移灶，在体内能够被肾脏快速                            上，［ F］AlF⁃mNOTA⁃GZP能有效预测免疫治疗的疗
                                                                     18
              清除，具有较高的肿瘤背景比。此外，治疗应答的                            效，但由于探针在肿瘤中的摄取较低，且可能受到
              患者肿瘤中探针的摄取量明显高于治疗无应答的                             肿瘤表型的影响，后续还将进一步研究以考察其在
              患者肿瘤，提示［ Ga］Ga⁃NOTA⁃GSI 对胃癌患者联                    不同肿瘤类型中的应用价值。
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              合免疫治疗后的应答情况具有良好的预测价值，可                            1.3  铜⁃64标记PET探针
              作为临床监测胃癌患者对ICI免疫治疗早期反应的                                Zhao 等 ［42］ 设计了一种 GzmB 特异性切割的“限
              一种有效手段。                                           制性相互作用肽”RIP，并利用 Cu 标记得到 PET
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              1.2  氟⁃18标记PET探针                                  探针 Cu⁃GRIP B。RIP 由从 N 端到 C 端的 3 个结构
                  Fu等 ［34］ 利用2⁃氰基苯并噻唑（2⁃cyanobenzothia⁃         域组成，包括与放射性同位素偶联的无毒抗菌肽
              zole，CBT）和半胱氨酸（cysteine，Cys）之间的点击缩               （antimicrobial peptide，AMP）、特定的内源性蛋白酶
              合反应策略     ［35-36］ ，结合分子内大环化支架SF        ［37］ 和一    切割位点以及阻止AMP转变为螺旋构象的PAR1肽
              步氟离子交换法，开发了两种 F 标记的 GzmB 靶向                      “掩蔽”区域。当重组人 GzmB 裂解 RIP 上的特定序
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              PET 探针［ F］SF⁃M⁃14 和［ F］SF⁃H⁃14。探针的结               列（IEPDVSQV）后会释放放射性标记的 AMP，随后
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              构主要包括 GzmB 的特异性识别肽 Ile⁃Glu⁃Phe⁃Asp                AMP经历自发的构象转移沉积在附近的膜上，并与
             （IEFD）和Ile⁃Glu⁃Pro⁃Asp（IEPD）、大环化支架SF以              磷脂双分子层紧密结合，从而在靶部位积累放射性
              及标记基团 AmBF3，通过响应 GzmB 和还原物质谷                      信号。研究人员对接受抗 PD⁃1 和抗 CTLA⁃4 联合
              胱甘肽进行分子内环化并自组装成纳米聚集体，从                            治疗 的 CT26 荷 瘤 鼠 进 行 了 Cu⁃GRIP B 的 PET/
                                                                                            64
              而提高探针在肿瘤中的滞留性。在治疗与未治疗                             CT 成像，根据动态 PET 获取的时间⁃活性曲线，
              的4T1荷瘤鼠模型中通过PET成像评估了两个探针                          64 Cu⁃GRIP B在治疗组肿瘤中能够迅速积累，注射后
              检测免疫治疗诱导的 GzmB 表达水平变化的能力，                         10 min内就已达到约5 %ID/mL的水平，而未治疗组
              结果显示经免疫诱导药物 S⁃（2⁃硼酸基乙基）⁃L⁃半                       肿瘤中的探针摄取量明显较低，且不随时间变
              胱氨酸盐酸盐（BEC hydrochloride，BEC）治疗的 4T1              化。静态 PET/CT 扫描结果显示，治疗组肿瘤中
              荷瘤鼠肿瘤对探针的摄取为未治疗组肿瘤的3.5倍。                          64 Cu⁃GRIP B的摄取呈上升趋势，注射后2 h已明显高
              从BEC治疗与未治疗的4T1荷瘤鼠中分离肿瘤组织                          于未治疗组，且24 h后依然有清晰的放射性信号积
              进行免疫荧光染色与蛋白质免疫印迹试验，进一步                            聚。体内成像结果分析和肿瘤体积跟踪监测表明，
              证实了 BEC 治疗促进肿瘤组织内 GzmB 表达上调。                      与治疗前相比，第11天治疗结束后肿瘤对 Cu⁃GRIP
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              这些结果表明，探针［ F］SF⁃M⁃14和［ F］SF⁃H⁃14在                 B 的摄取与肿瘤体积增长变化呈显著负相关。此
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              免疫治疗的临床前研究及疗效的早期评价中具有                             外，通过放射自显影和免疫荧光实验还发现，组织
              较大潜力。                                             中探针的结合区域与 GzmB 和 T 细胞标志物 CD3 的
                  基于［ F］AlF 放射性标记方法          ［38］ ，Goggi 等 ［39-41］  表达一致。这些结果表明，Cu⁃GRIP B可通过成像
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              开发了 GzmB 特异性探针［ F］AlF⁃mNOTA⁃GZP，通                 体内GzmB活性，评估肿瘤对早期免疫治疗的反应，
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              过在缓冲液中将螯合剂NOTA修饰的前体与［ F］及                         团队目前正在进行 Cu⁃GRIP B的临床试验。
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              氯化铝在 100 ℃下加热 15 min 即可获得目标探针。
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              在 CT26 和 MC38 两种同基因结直肠癌模型中评估
              该探针监测肿瘤对 ICI 单药及联合治疗反应的能                          2.1  NIRF可激活淬灭探针
              力，PET⁃CT/MRI 图像的肿瘤定量分析显示，不同治                           Nguyen 等 ［43］ 设计了一种基于 GzmB 的 NIRF 纳
              疗组之间探针的摄取具有显著差异，联合治疗组的                            米复合物GNR，由刺激响应聚合物偶联免疫治疗药
              摄取水平明显高于单药治疗组。在成功抑制肿瘤                             物以及可激活的 GzmB 成像探针组成，使其既能递
              生长的治疗应答者中，探针的摄取量明显高于所有                            送免疫治疗药物，又能实时监测GzmB活性，从而实
                                             18                 现治疗监测一体化。GNR 将多肽底物IEPD 与荧光
              治疗无应答者和未治疗组，证明［ F］AlF⁃mNOTA⁃
              GZP 能够有效区分治疗应答与无应答者。此外，还                          染料及淬灭剂偶联，与始终“开启”的荧光探针相
              发现MC38肿瘤的探针总体摄取量高于CT26肿瘤，                         比，可激活淬灭探针仅在目标生物标志物 GzmB 存
              且对照组和治疗无应答者的背景摄取量也更高，这                            在时激活荧光信号，极大程度增强了信号特异性，
              可能与 MC38 肿瘤中的 dMMR/MSI 表型相关。综                     从而降低了背景信号，使信噪比大幅提升。偶联抗
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