Page 131 - 《南京医科大学学报》2026年第1期

第46卷第1期 周璐雅，潘迎紫，曾 玉，等. Hsa⁃miR⁃106b⁃5p联合UA、HCY检测对子痫前期的预测价值［J］.
2026年1月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（1）：123-129 · 125 ·

免疫系统疾病等。本研究经南京市妇幼保健院伦理委 后 3 500 g 离心 10 min，取上层血清分装于 1.5 mL
员会批准（伦理号：2022⁃KY043），参与研究的孕妇均 无酶 EP 管，每管 300~500 μL 血清，共 3 管，冻存
签署知情同意书。 于-80 ℃冰箱中待测，避免反复冻融。
1.2 方法 1.2.3 实时荧光定量 PCR 法检测血清中 hsa⁃miR⁃
1.2.1 数据来源与筛选 106b⁃5p、hsa⁃miR⁃24⁃3p、hsa⁃miR⁃451a 和 hsa⁃miR⁃
分 别 以“miRNA”、“preeclampsia”、“hyperten⁃ 92b⁃3p的水平
sion”和“blood”为关键词，从美国国家生物技术信息 采用miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit（QIA⁃
中心（National Center for Biotechnology Information， GEN 公司，德国）试剂盒提取 RNA，再使用 miRNA
NCBI）的 GEO 数据库中筛选相关的 microRNA 数据 1st Strand cDNA Synthesis Kit（by tailing A）试剂（南
集。筛选标准：样本来源为外周血样本的ncRNA分 京诺唯赞公司）进行 microRNA 加尾反应和逆转录
析 阵 列 ，并 提供完整的原始数据。选择并下载 反应得到cDNA。采用实时荧光定量PCR仪对血清

ncRNA 分析阵列数据集 GSE234611 和 GSE118578 中 hsa⁃miR⁃106b⁃5p、hsa⁃miR⁃24⁃3p、hsa⁃miR⁃451a、
的 数 据 交 集 作 为 本 研 究 原 始 数 据 。 数 据 集 hsa⁃miR⁃92b⁃3p 及内参 miR⁃16⁃5p 进行扩增反应。
GSE23461从NCBI官网下载，包括5个早发型PE、5个 反应条件：95 ℃预变性 30 s；95 ℃变性 10 s，60 ℃退
晚 发 型 PE 和 7 个 非 疾 病 对 照 组 。 数 据 集 火 30 s，40 个循环；熔解曲线 95 ℃15 s，60 ℃ 60 s，
［7］
GSE118578 由 Ye 等 提供，共包括 4 例原发型高 95 ℃15 s。扩增试剂盒为 Taq Pro Universal SYBR
血压患者且未经治疗和 4 例正常人对照组。通过 qPCR Master Mix（南京诺唯赞公司）。根据miR⁃16⁃5p
DESeq2［1.36.0］包分别读取 2 组数据并完成差异 的表达对每个microRNA进行标准化，使用2 -∆∆Ct 方法
表达 ncRNA 的分析。以调整 P 值< 0.05 及 log2FC>1 进行分析。引物由北京擎科生物科技股份有限公司合
为标准，获得 2 个数据集差异表达基因列表，之后 成，各microRNA的扩增引物序列见表1。
对 2 个数据集取交集。 1.2.3 临床资料收集
1.2.2 样本采集 收集孕妇的年龄、孕前体重指数（body⁃mass in⁃
孕妇在32周产检时抽取静脉血标本，静置15 min dex，BMI）、收缩压（systolic pressure，SBP）、舒张压

表1 RT⁃qPCR中使用的引物序列
Table 1 Primer sequences used in RT⁃qPCR
microRNA Forward primer Reverse primer
hsa⁃miR⁃106b⁃5p 5′⁃GCGCGTAAAGTGCTGACAGT⁃3′ 5′⁃AGTGCAGGGTCCGAGGTATT⁃3′
hsa⁃miR⁃24⁃3p 5′⁃GCGTGGCTCAGTTCAGCAG⁃3′ 5′⁃AGTGCAGGGTCCGAGGTATT⁃3′
hsa⁃miR⁃451a 5′⁃CGCGAAACCGTTACCATTAC⁃3′ 5′⁃AGTGCAGGGTCCGAGGTATT⁃3′
hsa⁃miR⁃92b⁃3p 5′⁃GCGTATTGCACTCGTCCCG⁃3′ 5′⁃AGTGCAGGGTCCGAGGTATT⁃3′
miR⁃16⁃5p 5′⁃CGCGTAGCAGCACGTAAATA⁃3′ 5′⁃AGTGCAGGGTCCGAGGTATT⁃3′

（diastolic pressure，DBP）、空 腹 血 糖（fasting blood 血小板分布宽度（platelet distribution width，PDW），
glucose，FBG）、丙氨酸氨基转移酶（alanine amino⁃ 并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值（neutrophil⁃to⁃lym⁃
transferase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate phocyte ratio，NLR）和全身免疫炎症指数（systemic
aminotransferase，AST）、总 胆 红 素（total bilirubin， immune⁃inflammation index，SII），即外周血中血小板
TBIL）、直接胆红素（direct bilirubin，DBIL）、尿酸 计数×中性粒细胞计数/淋巴细胞计数。
（uric acid，UA）、总蛋白（total protein，TP）、白蛋白 1.3 统计学方法
（albumin，ALB）、同 型 半 胱 氨 酸（homocysteine， 采用 SPSS29.0 和 R4.2.0 软件对数据进行分析；
HCY）、白细胞计数（white blood cell，WBC）、红细胞 计量资料均符合正态分布，用均数±标准差（x ± s）表

计数（red blood cell，RBC）、中性细胞计数（neutro⁃ 示，两组间比较采用t检验；受试者工作特征（receiver
phil，NEUT）、淋巴细胞计数（lymphocyte，LYMPH）、 operating characteristic，ROC）曲线评价各指标预测
血小板计数（platelet，PLT）、血小板压积（plateletcrit， 诊断 PE 效能；卡方检验分析比较两组并发症情况。
PCT）、平均血小板体积（mean platelet volume，MPV）、 P < 0.05为差异有统计学意义。