Page 19 - 南京医科大学自然科学版第1期
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第41卷第1期 俞 欣，李开霖，孔 峰，等. 人多能干细胞诱导类肾的实验研究［J］.
2021年1月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（01）：011-015，053 · 13 ·
1.2.4 小鼠肾包膜下类肾移植 球形分布。免疫荧光显示 LTL 和 CDH1 表达阳性，
SCID 小鼠实验前适应性饲养 3 d，类肾在体外 阳性细胞呈管形分布。PODXL 阳性表达细胞分布
诱导至 D15，进行移植手术，切开小鼠右肾包膜，将 于 LTL 和 CDH1 阳性表达细胞的末端（图 1）。足细
类肾颗粒移植到小鼠右肾包膜下，利用包膜的组织 胞、近端小管和远端小管的特异性蛋白阳性表达，
张力固定类肾颗粒。 且阳性细胞的毗邻位置关系与肾脏细胞位置关系
1.2.5 移植后类肾的组织学检测 一致，提示类肾具备足细胞、近端小管和远端小管
移植手术后，小鼠继续饲养4周，处死。取右肾 等肾单位组成结构。
及类肾标本进行大体观察、HE 染色和免疫荧光鉴 2.2 透射电镜观察
定。HE 染色：取移植后类肾标本，甲醛固定后，经过 电镜下观察到类肾体有簇状分布的足细胞，其
脱水、透明和浸蜡等程序后，再以石蜡、切片进行HE 电镜下特征表现为细胞突起丰富，细胞器丰富，细
染色。免疫荧光鉴定CDH1、PODXL和MECA⁃32，实 胞核凹凸明显，有上皮样连接结构。TEM还观察到
验过程同类肾免疫荧光检测。 上皮细胞组成的管状结构，上皮细胞腔面存在大量
不规则的微纤毛样结构，细胞内含大量线粒体，符
2 结 果
合肾小管上皮细胞微观表现；细胞核质比大，部分
2.1 类肾的组织学检测 上皮细胞呈复层排列，缺乏透明的管状基底膜，提
利用肾脏高效表达特异性标志物 PODXL、LTL 示极化不完全（图2）。TEM未观察到红细胞和毛细
和 CDH1 分别检测类肾足细胞、近端小管和远端小 血管。TEM 分析说明类肾具备足细胞和肾小管上
管。免疫荧光显示PODXL呈阳性表达，阳性细胞呈 皮的特征结构，但结构仍处于不成熟阶段。
CDH1 LTL DAPI MERGE
CDH1 PODXL DAPI MERGE
LTL PODXL DAPI MERGE
图1 体外类肾器官CDH1、LTL和PODXL免疫荧光染色（×200）
Figure 1 Immunofluorescence staining of CDH1，LTL，PODXL in renal organoids in vitro（×200）
