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第41卷第6期 胡丽萍,肖轶婧,唐子春,等. 人羊膜间充质干细胞培养上清通过环状RNA⁃0001649/miR⁃203a/VEGFA/
                  2021年6月        MMP9信号通路促进血管生成[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(06):810-816 ·813                 ·


                          A                     B                    C
                                      *
                                3                    1.5    *                            CM+si⁃circ⁃0001649组
                             circ⁃0001649  的相对表达量  2 1  circ⁃0001649  的相对表达量  1.0  MMP9  对照组 CM组 CM+si⁃NC组 92 kDa


                                                     0.5
                                                                       VEGFA               55 kDa
                                0                    0.0
                                 hAMSC⁃CM组
                                 对照组                  si⁃circ⁃0001649  GAPDH               37 kDa
                                                        si⁃NC
                D
                        对照组               CM组            CM+si⁃NC组      CM+si⁃circ⁃0001649组  2.0   *       *
                                                                                           总成管长度  1.0
                                                                                            1.5

                                                                                            0.5
                                                                                             0
                                                                                                   CM+si⁃NC组
                                                                                              对照组  CM组  CM+si⁃circ⁃
                                                                                                        0001649组

                E
                        对照组               CM组            CM+si⁃NC组      CM+si⁃circ⁃0001649组  2.0   *       *
                                                                                            1.5
                                                                                           迁移率  1.0

                                                                                            0.5
                                                                                             0
                                                                                                   CM+si⁃NC组
                                                                                              对照组  CM组  CM+si⁃circ⁃
                                                                                                        0001649组


                F       对照组               CM组            CM+si⁃NC组      CM+si⁃circ⁃0001649组
                                                                                            2.0            *
                                                                                                  **
                 0 h                                                                        1.5
                                                                                           迁移率  1.0
                                                                                            0.5
                                                                                             0
                                                                                                       CM+si⁃circ⁃
                 h                                                                            对照组  CM组
                 13                                                                                CM+si⁃NC组 0001649组


                   A:hAMSC⁃CM刺激后,两组HUVEC细胞的circ⁃0001649相对表达量;B:si⁃circ⁃0001649的敲低效率;C:蛋白印迹实验检测circ⁃0001649敲
                低后的HUVEC的VEGFA和MMP9的蛋白表达水平;D:血管形成实验检测circ⁃0001649敲低后的HUVEC的成管能力(×40);E:Transwell小室
                实验检测 circ⁃0001649 敲低后的 HUVEC 的迁移能力(×40);F:瘢痕愈合实验检测 circ⁃0001649 敲低后的 HUVEC 的迁移能力(×40)。两组比
                较,P < 0.05,P < 0.01。
                  *
                         **
                                   图1   hAMSC⁃CM通过促进circ⁃0001649表达诱导HUVEC的成管和迁移
                Figure 1  The up⁃regulation of circ⁃0001649 in HUVEC induced by hAMSC⁃CM promoted the angiogenesis and migration
                        of HUVEC

                2.2  circ ⁃ 0001649 通 过 miR ⁃ 203a 提 高 VEGFA/     示 两 者 可 能 结 合 。 同 时 通 过 miRTarBase 网 站
                MMP9表达促进HUVEC的成管和迁移                              (http://mirtarbase.cuhk.edu.cn/php/index.php)预 测 ,

                    circ⁃RNA 可作为内源性竞争性 RNA 与 miRNA                VEGFA 和 MMP9 是 miR⁃203a 的靶基因。本研究结
                结合而发挥作用,经 circular RNA interactome 网站             果显示,miR⁃203a的类似物miR⁃203a⁃mimic 和抑制

               (https://circinteractome.nia.nih.gov/) 预 测 circ ⁃  剂 miR⁃203a⁃inhibitor 分别抑制和促进 VEGFA 和
                0001649 与miR⁃203a之间存在结合位点(图2A),提                  MMP9的蛋白表达(图2B),提示VEGFA和MMP9可
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