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第41卷第6期 胡丽萍,肖轶婧,唐子春,等. 人羊膜间充质干细胞培养上清通过环状RNA⁃0001649/miR⁃203a/VEGFA/
                  2021年6月        MMP9信号通路促进血管生成[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(06):810-816 ·815                 ·


                能是miR⁃203a的靶基因。为了验证circ⁃0001649是                  管生成耦合过程        [22] ;circ⁃002136 通过与 miR⁃138⁃5p
                否通过结合 miR⁃203a 发挥作用,对 circ⁃0001649 敲              结合缓解对转录因子SOX13的抑制,促进SPON2表
                低的HUVEC细胞中分别转染miR⁃203a抑制剂miR⁃                     达进而调控胶质瘤血管生成              [23] ;circ⁃0003204 通过
                203a⁃inhibitor 和对照 inhibitor⁃NC 来进行拯救实            促进E⁃cadherin表达,降低N⁃cadherin和Vimentin的
                验。qRT⁃PCR检测结果显示转染miR⁃203a⁃inhibitor               表达进而抑制氧化修饰低密度脂蛋白诱导的血管
                后并不影响 circ⁃0001649 的敲低效率(图 2C),但是                 内皮细胞增殖和血管生成等。本研究探讨了 cir⁃
                与 inhibitor⁃NC 相比,转染miR⁃203a⁃inhibitor却能部         cRNA 在促血管生成过程中的作用。结果表明,
                分逆转circ⁃0001649敲低引起的成管和迁移能力的                      hAMSC⁃CM 可显著上调 HUVEC 中 circ⁃0001649 的
                降低(图2D、E、F)。同时与此一致的是,蛋白印迹实                        表达。此前其他研究表明circ⁃0001649可通过与多
                验结果同样显示:miR⁃203a⁃inhibitor能部分恢复因敲                 个miRNA结合进而抑制肝细胞癌进展,在视网膜母
                低circ⁃0001649而引起的VEGFA和MMP9蛋白水平                   细胞瘤中 circ⁃0001649 的下调与其不良预后有关,
                的下降(图2G)。以上实验证实了hAMSCs⁃CM的促                       并通过 AKT/mTOR 信号通路调控细胞增殖和凋

                血管生成作用可部分通过上调 HUVEC 细胞内 circ⁃                     亡。本研究通过生物信息学分析和拯救实验,发现
                0001649的表达来实现,circ⁃0001649与miR⁃203a存              circ⁃0001649 可通过与 miR⁃203a 结合上调 VEGFA、
                在内源性竞争,促进下游VEGFA和MMP9表达。                          MMP9的表达进而发挥促血管生成因子的作用。然
                                                                  而,hAMSC⁃CM 上调 HUVEC 中 circ⁃0001649 表达的
                3  讨 论
                                                                  具体机制尚不清楚。推测可能是 hAMSC⁃CM 中含
                    由于先天性原因和后天的外伤、肿瘤、炎症,颌                         有的一些生长因子和细胞因子进入 HUVEC 中,通
                骨缺损在临床中较为常见。其不仅可以导致咀嚼                             过一系列信号转导,促进 circ⁃0001649 转录。这些
                及语言功能障碍,还可导致颅颌面畸形,从生理、心                           还需要通过后续实验进一步研究。
                理两方面对患者造成严重影响。近年来出现了一                                 综上,本研究表明circ⁃0001649参与了hAMSC⁃
                种新型的材料——组织工程化骨,给治疗颌面部骨                            CM 诱导的 HUVEC 的血管生成。这种促血管生成
                缺损提供了新的思路。组织工程化骨通过采取合                             作 用 可 能 是 部 分 通 过 上 调 HUVEC 细 胞 内 circ ⁃
                适的支架材料复合生物活性分子及种子细胞,于体                            0001649 表达来实现的,circ⁃0001649与miR⁃203a内
                外构建结构功能与自然骨相近的组织工程材料。                             源性竞争,促进下游VEGFA和MMP9表达。本研究
                    促进血管生成是促进骨再生及构建组织工程                           为探究 hAMSC 促进血管新生的作用机制提供了新
                化骨的重要策略,因为骨的愈合或重塑都需要新生                            思路。
                血管来提供氧和营养物质以维持正常代谢。通过                            [参考文献]
                干细胞促进血管新生已被认为是一种潜在的解决
                                                                 [1] FRÖHLICH L F. Micrornas at the interface between osteo⁃
                方案  [20] 。既往研究表明,骨髓间充质干细胞分泌多
                                                                       genesis and angiogenesis as targets for bone regeneration
                种相关生长因子和细胞因子,如VEGF、胰岛素样生
                                                                      [J]. Cells,2019,8(2):121
                长因子1、肝细胞生长因子等,以旁分泌方式促进骨                          [2] SATIJA N K,SINGH V K,VERMA Y K,et al. Mesenchy⁃
                再生过程中的血管新生           [21] 。但骨髓间充质干细胞                   mal stem cell⁃based therapy:a new paradigm in regenera⁃
                在促进血管新生的应用中受到以下因素的限制:需                                 tive medicine[J]. J Cell Mol Med,2009,13(11/12):
                要一定的侵入性操作,可能对供者产生一定损伤,                                 4385-4402
                以及供体年龄依赖性分化导致的不稳定性。于是                            [3] TAKEUCHI R,KATAGIRI W,ENDO S,et al. Exosomes
                较容易获得、稳定性较好、且涉及伦理问题较少的                                 from conditioned media of bone marrow⁃derived mesen⁃
                hAMSC具有更好的应用前景。同样,本课题组之前                               chymal stem cells promote bone regeneration by enhanc⁃
                                                                       ing angiogenesis[J]. PLoS One,2019,14(11):e0225472
                的数据显示,hAMSC 能明显增强 HUVEC 的血管生
                                                                 [4] ILANCHERAN S,MOODLEY Y,MANUELPILLAI U.
                成 。
                 [5]
                                                                       Human fetal membranes:a source of stem cells for tissue
                    近年来circRNA由于其在血管新生中发挥重要
                                                                       regeneration and repair?[J]. Placenta,2009,30(1):2-10
                作用而备受关注。例如 circRNA hsa_circ_0074834              [5] TANG Z,WU X,HU L,et al. Circ⁃100290 positively regu⁃
                通过作为 miR⁃942⁃5p 的 ceRNA 进而增加 ZEB1 和                    lates angiogenesis induced by conditioned medium of hu⁃
                VEGF 的表达来促进骨髓间充质干细胞的成骨⁃血                               man amnion⁃derived mesenchymal stem cells through miR
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