Page 56 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第7期
·986 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年7月

1.2.5 ELISA 检测小鼠血清 IgE 及 BALF 中细胞因 析，计量资料以均数±标准差（x ± s）表示，多组间比
子水平 较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 LSD⁃t
采用 ELISA 检测各组小鼠血清中 IgE 水平和 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。
BALF 中白细胞介素（interleukin，IL）⁃5、IL⁃12、IL⁃13
2 结 果
水平。ELISA 试剂盒购自 NeoBioscien 公司，实验步
骤严格按照试剂盒说明书操作。 2.1 小鼠一般生长状况
1.2.6 BALF细胞分类计数 出生时，空气+PBS组、高氧+PBS组、空气+OVA
将留取的 BALF 沉淀涂片，自然晾干，于 4%中 组和高氧+OVA 组小鼠体重无明显差异；7 日龄时，
性多聚甲醛溶液中固定 10 min，苏木精⁃伊红（HE） 高氧+PBS 组、高氧+OVA 组体重相较于空气+PBS
染色，光镜 200 倍视野下随机选取 4 个视野进行细 组、空气+OVA 组明显减轻，且毛色杂乱，自主活动
胞分类计数（至少计数300个细胞）。 减少；6周龄时空气+PBS组、空气+OVA组之间及高
1.2.7 肺组织标本病理检查 氧+PBS 组、高氧+OVA 组之间体重无明显差异，高
将留取的小鼠右肺中叶固定于 4%中性多聚甲 氧+PBS 组、高氧+OVA 组体重仍较空气+PBS 组、空
醛中，经梯度乙醇脱水、二甲苯透明、浸蜡包埋制成 气+OVA组明显减轻，自主活动仍减少，但毛色杂乱
蜡块。切片后经HE染色、脱水、透明、封片，在显微 程度减轻，外观几乎无差别。空气+OVA组及高氧+
镜下观察，计算气道壁厚度占气道总面积比值以及 OVA组小鼠OVA致敏激发后出现明显呼吸急促，口
辐射状肺泡计数值（radical alveolar counts，RAC），并 唇发绀，烦躁、抓耳挠腮等表现。65 日龄处死时各
拍照进行图像采集。 组体重无明显差异（表1）。
1.3 统计学方法 2.2 小鼠肺组织病理检查
采用 SPSS 21.0 统计软件对数据进行统计学分 空气+PBS 组支气管及肺泡结构正常；高氧+

表1 各组小鼠体重比较
Table 1 Body weight of mice in each group （g，x ± s）

组别 出生体重 7日龄体重 6周龄体重 处死前体重
空气+PBS组（n=8） 1.35 ± 0.17 4.14 ± 0.27 20.22 ± 1.13 26.80 ± 2.00
高氧+PBS组（n=8） 1.42 ± 0.19 3.34 ± 0.24 * 16.70 ± 1.27 * 25.44 ± 3.02
空气+OVA组（n=8） 1.48 ± 0.21 4.11 ± 0.21 20.32 ± 1.95 25.76 ± 2.31
高氧+OVA组（n=8） 1.55 ± 0.13 3.65 ± 0.41 # 17.71 ± 0.58 # 24.90 ± 2.62
F值 1.803 13.438 ＜15.042 0.805
P值 0.170 ＜0.0010 0＜0.001 0.502
与空气+PBS组比较，P＜0.05；与空气+OVA组比较，P＜0.05。
#
*
PBS组肺泡直径明显增大，数量减少，可见肺泡间隔 0.91）ng/mL］明显增高（P＜0.05）；高氧+OVA组血清
断裂及少量炎性细胞浸润；空气+OVA 组肺泡大小 IgE 含量［（15.63±3.57）ng/mL］相对于空气+OVA 组
分布较均匀，数量正常，但支气管壁明显增厚，柱状 ［（11.84±2.89）ng/mL］明显升高（P＜0.05），但空气+
上皮增生肥大，支气管内见明显炎性细胞浸润；高 PBS 组［（3.55±0.91）ng/mL］与高氧+PBS 组［（4.38±
氧+OVA 组支气管壁则更为明显增厚，柱状上皮增 2.26）ng/mL］IgE水平无差别（P＞0.05，图3）。
生肥厚，支气管管腔狭窄，可见明显炎性细胞浸润， 2.4 小鼠BALF细胞计数
肺泡数量较多，大小不一（图 1）。空气+OVA 组、高 各组小鼠 BALF 白细胞分类计数结果显示：与
氧+OVA组可见支气管壁面积占气道总面积比值增 空气+PBS 组相比，高氧+PBS 组白细胞总数明显上

加（P＜0.05），高氧+PBS 组、高氧+OVA 组可见 RAC 升（P＜0.05），分类计数后嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、
明显减少（P＜0.05，图2）。 单核细胞计数虽有上升，但差异不具有统计学意

2.3 小鼠血清IgE水平 义。与空气+PBS组相比，空气+OVA 组白细胞总数
各组小鼠血清 IgE 水平差异具有统计学意义 及嗜酸性粒细胞计数均明显升高（P＜0.05）；此外淋
（F=40.709，P＜0.05）。空气+OVA 组血清 IgE 含量 巴细胞计数增加，单核细胞计数降低，但差异都不

［（11.84±2.89）ng/mL）］相对于空气+PBS 组［（3.55± 具有统计学意义。与空气+OVA组相比，高氧+OVA