Page 72 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 72

第41卷第7期
               ·1002 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年7月


              胞生长环境中的 CD4 Treg 细胞糖代谢相关 4 个蛋                     肿瘤微环境中CD4 Treg细胞的糖代谢更加活跃。
                                  +
                                                                                 +
              白(Glut1、LDH⁃α、PKM2、GPI)表达水平均显著高于                  2.2  卵巢癌细胞生长环境中的 CD4 Treg 细胞糖代
                                                                                                 +
              未与 SKOV3 共培养组(P<0.05),提示卵巢癌细胞                     谢相关基因和蛋白水平高于CD4 Teff细胞
                                                                                              +
              生长环境可以促进人外周血 CD4 Treg 细胞糖代谢                            CD4 T细胞在肿瘤微环境中根据其表面标志和
                                                                        +
                                            +
              相关蛋白翻译水平上调(图 1B)。这些结果显示                           功能特征可分为若干亚群,各亚群之间相互调节,
              CD4 Treg细胞与卵巢癌细胞共培养后,其主要糖代                        发挥着不同的免疫学功能,因此也有着各自独特的
                  +
              谢相关基因的mRNA 和蛋白表达水平会增强,提示                          代谢特征。将 CD4 Treg、Teff 细胞与卵巢癌细胞共
                                                                                 +
                                        A
                                            2.5     *  **  **  *       *    Treg
                                           mRNA相对表达量  1.5  *       *       *
                                                                            Treg+SKOV3
                                            2.0
                                            1.0
                                            0.5
                                             0
                                              Glut1  Glut3  ENO1  GPI  TPI1 HIF⁃1α LDH⁃α  PKM2

              B
                      Treg  Treg+SKOV3    0.8     *         1.5               0.8     **        1.5
                 PKM2            60 kDa   0.6                       *         0.6                       **
                                         PKM2/β⁃actin  0.4  GPI/β⁃actin      Glut1/β⁃actin  0.4  LDH⁃α/β⁃actin
                  GPI            60 kDa                     1.0                                 1.0
                 Glut1           60 kDa                     0.5                                 0.5
                LDH⁃α            37 kDa   0.2                                 0.2
                                           0                 0                 0                 0
                β⁃actin          45 kDa
                                              Treg+SKOV3        Treg+SKOV3         Treg+SKOV3        Treg+SKOV3
                                             Treg               Treg              Treg              Treg
                 A:与SKOV3共培养前后CD4 Treg细胞的糖代谢相关基因的表达水平;B:与SKOV3共培养前后CD4 Treg细胞的糖代谢相关蛋白的表达
                                                                                      +
                                     +
              水平。两组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
                          *
                                 **
                                                        +
                               图1 与SKOV3共培养前后CD4 Treg细胞的糖代谢相关基因和蛋白的表达水平
              Figure 1  The expression levels of glucose metabolism⁃related genes and proteins of CD4 Treg cells before and after co⁃cul⁃
                                                                                   +
                      ture with SKOV3
              培养后,比较两者主要糖代谢相关基因的mRNA 和                          为了进一步了解肿瘤微环境中 CD4 Treg、Teff 细胞
                                                                                                 +
              蛋白表达水平,结果发现在卵巢癌细胞生长环境中                            的糖代谢特征,我们在测定两者主要糖代谢相关基
              的CD4 Treg细胞糖代谢相关8个基因(Glut1、Glut3、                 因的mRNA 和蛋白表达水平的基础上,又比较了两
                    +
              HIF⁃1α、PKM2、ENO1、GPI、LDH⁃α、TPI1)除 PKM2            者在卵巢癌细胞生长环境中的糖摄取水平。结果
              外,表达水平均显著高于 CD4 Teff 细胞,(P<0.05,                  如图3所示,卵巢癌细胞生长环境中的CD4 Treg 细
                                                                                                       +
                                         +
              图 2A),提示卵巢癌细胞生长环境中 CD4 Treg 细                     胞葡萄糖摄取水平高于CD4 Teff 细胞,差异有统计
                                                     +
                                                                                          +
              胞的糖代谢相关基因转录水平高于 CD4 Teff 细                        学意义[(59.78±2.57)pmol vs.(44.93±1.86)pmol,P<
                                                     +
              胞。在卵巢癌细胞生长环境中的 CD4 Treg 细胞糖                       0.05],提示卵巢癌细胞生长环境中 CD4 Treg 细胞
                                                 +
                                                                                                     +
              代谢相关 4 个蛋白(Glut1、LDH⁃α、PKM2、GPI)除                 相较CD4 Teff 细胞具有更高的葡萄糖摄取能力,从
                                                                         +
              PKM2 外,表达水平均显著高于 CD4 Teff 细胞(P<                   而摄取更多的葡萄糖。
                                               +
                                                                                                 +
              0.05,图 2B),提示卵巢癌细胞生长环境中 CD4                   +   2.4  卵巢癌细胞生长环境中的 CD4 Treg 细胞糖酵
                                                                               +
              Treg 细胞的糖代谢相关蛋白翻译水平高于 CD4                     +   解水平高于CD4 Teff细胞
              Teff 细胞。                                               细胞将葡萄糖摄入胞内后,会进行分解代谢,
                                               +
              2.3  卵巢癌细胞生长环境中的 CD4 Treg 细胞糖摄                    这是生物体获得能量的主要方式,其中糖酵解过程
              取水平高于CD4 Teff细胞                                   是所有生物体进行葡萄糖分解代谢所必须经过的
                             +
                  糖摄取是糖代谢的第一步也是关键的一步。                           共同阶段,所以我们又比较了CD4 Treg、CD4 Teff细
                                                                                                        +
                                                                                               +
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