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第41卷第7期 李 跞，周景昕，赵 萌，等. TGF⁃β1在二尖瓣腱索断裂患者血清与组织中的表达［J］.
2021年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（07）：1028-1032，1062 ·1029 ·

二尖瓣腱索断裂（mitral chordae tendineae rup⁃ 1.2 方法
ture，MCTR）是临床引起单纯性二尖瓣关闭不全的 1.2.1 资料收集
主要原因，其发生可导致严重的血流动力学改变。 收集所有研究对象的一般资料、实验室检查和
目前腱索断裂考虑与细菌性心内膜炎、黏液瘤、结 心脏超声检查结果，包括年龄、性别、体重、吸烟史、
缔组织病、冠心病、肥厚性心肌病、胸外伤以及遗传 体重指数（body mass index，BMI）、入院血压、血糖、
等因素有关 ，但关于腱索断裂的分子机制研究较 总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglycer⁃
［1］
少，并且有研究显示腱索断裂可能是由于炎症反应 ide，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipopro⁃
以及血管生成介质氧化应激反应、胶原合成异常引 tein cholesterol，LDL⁃C）、C⁃反应蛋白（C⁃reactive pro⁃
起 ［2- 3］ 。转化生长因子β（transforming growth factor tein，CRP）、降钙素原（procalcitonin，PCT）、左房内径
β，TGF⁃β）是一种人体多功能因子，在机体调节细胞 （left atrial diameter，LAD）、左心室射血分数（left ven⁃
生长分化上具有重要作用，其中 TGFβ1 是其亚型， tricular ejection fraction，LVEF）、左心室后壁厚度
活性程度最高，它既是重要的炎性介质，又是重要 （left ventricular posterior wall thickness，LVPWT）、左
的促纤维化因子，能够使炎症部位或者受损的组织 心室舒张末期内径（left ventricular end⁃diastolic di⁃
细胞外基质（extracellular matrix，ECM）过度表达，纤 mension，LVEDd）、室间隔厚度（interventricular sep⁃
维结缔组织过度增殖，促进成纤维细胞向肌成纤维 tal thickness，IVST）。
［4］
细胞分化，产生胶原 。二尖瓣腱索由丰富的胶原 1.2.2 血清TGF⁃β1的测定
［2］
纤维组成，成纤维细胞散布在胶原纤维束间 。研 待研究对象空腹12 h后采集外周静脉血2~3 mL，
究显示在炎症反应下，TGF⁃β1升高会出现胶原过度 将采集血放置于分离胶⁃促凝管（黄管）中，4 ℃保存
［4］
沉积、合成排列异常，导致组织顺应性下降 。目 并静置 2 h 后经离心（3 000 r/min 20 min）取上层血
前已有报道 TGF⁃β1 与二尖瓣关闭不全存在一定 清于-80 ℃冰箱保存待检，最后统一采用 TGF⁃β1
关系 ［5-7］ ，但关于TGF⁃β1与二尖瓣腱索断裂相关研 ELISA试剂盒（泉州睿信生物科技公司）检测所有血
究较少，本研究旨在探究 TGF⁃β1 在二尖瓣腱索断 清样品中 TGF⁃β1 的水平，具体实验操作步骤严格
裂患者血清和组织中的表达，报道如下。 按照试剂盒相关仪器使用说明书进行。
1.2.3 免疫组化染色
1 对象和方法
收取外科手术中实验组 15 例患者断裂的二尖
1.1 对象 瓣腱索组织以及本院同期8例心脏移植受者正常二
将 2020 年 6—12 月南京医科大学第一附属医 尖瓣腱索组织，标本取材后立即固定24 h后石蜡包
院收治的由腱索断裂引起单纯性二尖瓣关闭不全 埋切片，经过抗原修复，温室封闭后滴加1∶500 TGF
的患者 20 例作为实验组，心功能Ⅱ级 13 例，Ⅲ级 ⁃β1 与α⁃平滑肌动蛋白（α⁃smooth muscle actin，α⁃
7 例，男 12 例，女 8 例，年龄（64.7±7.7）岁；另随机选 SMA）的一抗（武汉Servicebio公司），4 ℃孵育过夜后
取同期健康体检者 20 例为对照组，男 12 例，女 进行脱色摇床洗涤3次。切片稍甩干后滴加与一抗
8 例，年龄（62.4±6.0）岁；同期心脏移植受者 8 例， 相应的二抗（武汉Servicebio公司）覆盖组织，室温孵
男 7 例，女 1 例，年龄（53.6±5.1）岁。实验组的纳入 育 50 min。经过显色冲洗脱水晾干等处理后，中性
标准：①符合二尖瓣腱索断裂诊断 ，且合并有中 树胶封片，显微镜观察，最后行图像采集分析。
［8］
度以上二尖瓣反流者；②入院资料完善，且患者依 1.2.4 扫描电镜检查
从性好。排除标准：①有近期感冒、肺部感染或其 收取实验组15例患者断裂的二尖瓣腱索、尚未

他感染史；②合并有急性心衰、肝肾功能不全；③ 断裂腱索组织以及同期8例心脏移植受者正常二尖
合并有高血压、高血脂、冠心病、甲状腺疾病、自身 瓣腱索组织，取材后立即投入电镜固定液内室温避
免疫性疾病；④血清抗“O”阳性；⑤合并其他遗传 光固定2 h后转移至4 ℃保存，最后统一经扫描电镜
或代谢类结缔组织类疾病；⑥合并心肌病、黏液 观察二尖瓣腱索组织的显微结构。
瘤、肿瘤、胸部外伤、器官畸形等。本研究通过南 1.3 统计学方法
京医科大学第一附属医院伦理委员会审批，批件 采用SPSS26.0软件分析所得数据，符合正态分
号：2019⁃SR⁃313.A1，所有研究对象均签署知情同 布、方差齐的计量资料用均数±标准差（x ± s）表示，
意书。 组间比较采用t检验，不符合正态分布的计量资料用