Page 59 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 59
第41卷第9期 陈奕鹤，马立文，殷旭峰，等. WNT7b促进黑素瘤细胞的迁移、侵袭与上皮间质转化［J］.
2021年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（09）：1322-1328 ·1325 ·
NC组 WNT7b⁃siRNA组 NC组
540 600
WNT7b⁃siRNA组
420 500 70
**
（ % ） 60
360 400
50
220 300 40 *
180 200 细胞比例 30
细胞数 80 100 20
0
0 32 64 96128160192 0 0 32 64 96128160192 10
DNA含量 0
G1 G2 S
两组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
*
**
图3 敲低WNT7b对A375细胞周期的影响
Figure 3 Effects of WNT7b knockdown on the cell circle of A375 cells
图4B）。 A375 细胞由纺缍形的间质细胞形态转变成多角形
2.5 WNT7b 敲低对 A375 细胞上皮⁃间质转化（epi⁃ 的上皮细胞形态，免疫荧光分析显示WNT7b广泛分
thelial⁃mesenchymal transition，EMT）的影响 布于细胞质中，敲低 WNT7b 后 WNT7b⁃siRNA 组的
考虑到WNT7b敲低后A375细胞迁移和侵袭能 细胞呈上皮细胞样改变（图6）。以上结果从EMT分
力受到抑制，我们进一步评估了 WNT7b 敲低后 子标志物以及细胞形态学改变两方面说明 WNT7b
A375细胞的EMT过程。结果发现WNT7b⁃siRNA组 参与了A375细胞的EMT过程。
表现出上皮细胞标志物 E⁃cadherin 表达上调，间充 2.6 WNT7b敲低对A375细胞中MMP的影响
质标志物 N⁃cadherin 及 Vimentin 的表达下调，调控 MMP 是介导细胞外基质降解的含锌内肽酶。
黑素瘤细胞 EMT 的关键因子 Snail 也被同时下调 MMP 在肿瘤细胞的迁移、侵袭、转移和血管生成过
（图 5）。在细胞培养方面可观察到，WNT7b敲低后 程中发挥着重要作用，同时也被认为是EMT的诱导
A
0 h 24 h
NC组 1.2 □ NC组
■ WNT7b⁃siRNA组
1.0
相对迁移能力 0.8 *
0.6
0.4
WNT7b⁃siRNA组 0 0 h 24 h
0.2
B NC组 WNT7b⁃siRNA组
1.2 **
1.0
相对侵袭能力 0.8
0.6
0.4
0.2
0
NC组 WNT7b⁃siRNA组
A：细胞划痕实验检测WNT7b敲低对A375细胞迁移影响（×40）；B：Transwell实验检测WNT7b敲低对A375细胞侵袭能力的影响（×100）。
两组比较，P < 0.01，P < 0.001（n=3）。
**
*
图4 敲低WNT7b对A375细胞迁移和侵袭能力的影响
Figure 4 Effects of WNT7b knockdown on migration and invasion ability of A375 cells
