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第41卷第9期 陈奕鹤，马立文，殷旭峰，等. WNT7b促进黑素瘤细胞的迁移、侵袭与上皮间质转化［J］.
2021年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（09）：1322-1328 ·1327 ·

白家族中，WNT3a 可减少黑素瘤细胞间的黏附，促 移与侵袭，MMP⁃9作为WNT7b下游重要蛋白调控分
进其迁移 ［20］ ；WNT5a 可激活 NF⁃κB 信号通路，并通 子，参与恶性黑素瘤细胞 EMT 过程，但其中更多的
过分泌细胞因子和趋化因子对黑素瘤产生免疫调 分子间相互作用以及具体调控途径有待进一步研
节作用 ［21］ ，还能诱导MARCKS蛋白磷酸化促进黑素 究。本研究可为恶性黑素瘤的精准基因靶向治疗
瘤的转移 ［22］ 。然而，作为WNT蛋白家族中另一关键 提供新参考。
蛋白分子，WNT7b在黑素瘤发生发展中的功能未见 ［参考文献］
报道。本研究首先检测了黑素瘤细胞系中 WNT7b
［1］ DAVIS L E，SHALIN S C，TACKETT A J. Current state of
的表达情况，发现 WNT7b 在人恶性黑素瘤细胞系
melanoma diagnosis and treatment［J］. Cancer Biol Ther，
A375、SK⁃MEL⁃28、A875中均有表达，其中A375细胞
2019，20（11）：1366-1379
系表达量最高，这可能与A375细胞系较SK⁃MEL⁃28
［2］ NUSSE R，CLEVERS H. Wnt/β ⁃ Catenin signaling，dis⁃
与A875细胞系，具有更强侵袭性与更短的成瘤时间 ease，and emerging therapeutic modalities［J］. Cell，2017，
有关 ［23-24］ 。通过流式细胞周期分析、划痕实验、Tran⁃ 169（6）：985-999
swell实验发现敲低WNT7b使A375细胞生长阻滞于 ［3］ CLEVERS H. Wnt/beta⁃catenin signaling in development
G1期，同时细胞的迁移与侵袭能力受到抑制。 and disease［J］. Cell，2006，127（3）：469-480
EMT是黑素瘤发生发展过程中的现象，具体表 ［4］ ZHAN T，RINDTORFF N，BOUTROS M. Wnt signaling
现为细胞由多角形的上皮细胞转变成纺缍形的间 in cancer［J］. Oncogene，2017，36（11）：1461-1473
［5］ GRUMOLATO L，LIU G，MONG P，et al. Canonical and
质细胞，细胞极性丧失，细胞间黏附力下降，同时
noncanonical Wnts use a common mechanism to activate
诱导血管生成，致肿瘤细胞迁移和侵袭能力大大
completely unrelated coreceptors［J］. Genes Dev，2010，
增加 ［25］ 。WNT信号通路在黑素瘤EMT诱导中起重
24（22）：2517-2530
要作用 ［20］ ，WNT 信号通路激活后可使 E⁃cadherin 表
［6］ GAJOS⁃MICHNIEWICZ A，CZYZ M. WNT Signaling in
达下调，Snail表达上调，E⁃cadherin的缺失释放钙黏 melanoma［J］. Int J Mol Sci，2020，21（14）：4852
蛋白结合的β⁃catenin，游离的β⁃catenin 可以迁移到 ［7］ MOPARTHI L，PIZZOLATO G，KOCH S. Wnt activator
细胞核并诱导促侵袭因子的转录 ［26］ 。我们通过 FOXB2 drives the neuroendocrine differentiation of pros⁃
Western blot检测EMT相关标志物蛋白，发现上皮标 tate cancer［J］. Proc Natl Acad Sci U S A，2019，116
志物 E⁃cadherin 表达上调、间充质标志物包括 N⁃ （44）：22189-22195
cadherin和Vimentin下调以及重要调节因子Snail下 ［8］ CHEN J，LIU T Y，PENG H T，et al. Up ⁃ regulation of
调，说明WNT7b可能参与A375细胞的EMT过程。 Wnt7b rather than Wnt1，Wnt7a，and Wnt9a indicates
poor prognosis in breast cancer［J］. Int J Clin Exp Pathol，
MMP作为EMT的诱导因子，促进肿瘤的发生发
2018，11（9）：4552-4561
展、迁移侵袭与转移 ［27］ 。其中MMP⁃2和MMP⁃9作为
［9］ ARENSMAN M D，KOVOCHICH A N，KULIKAUSKAS
明胶酶主要切割Ⅳ型胶原蛋白，在黑素瘤进展中起
R M，et al. WNT7B mediates autocrine Wnt/β⁃catenin sig⁃
关键作用。MMP⁃2的高表达与结构损伤、异型性进
naling and anchorage ⁃ independent growth in pancreatic
展和血行转移密切相关；MMP⁃9在炎性细胞如巨噬 adenocarcinoma［J］. Oncogene，2014，33（7）：899-908
细胞、嗜中性粒细胞和肥大细胞中表达较高，促进 ［10］ ZHANG C，YANG X，FU C，et al. Combination with TMZ
黑素瘤的放射状生长，因此可能与肿瘤侵袭的早期 and miR⁃505 inhibits the development of glioblastoma by
阶段有关。同时 MMP⁃9 可通过增强血管内皮生长 regulating the WNT7B/Wnt/β⁃catenin signaling pathway
因子和成纤维细胞生长因子在恶性肿瘤中的表达，间 ［J］. Gene，2018，672：172-179
［11］ PITTAYAPRUEK P，MEEPHANSAN J，PRAPAPAN O，
［28］
接通过增加营养物质供应促进肿瘤侵袭发展 。因
et al. Role of matrix metalloproteinases in photoaging and
此我们进一步对MMP家族关键分子进行检测，发现
photocarcinogenesis［J］. Int J Mol Sci，2016，17（6）：868
WNT7b敲低后，A375细胞中MMP⁃2、MMP⁃7与MMP⁃9
［12］ LEE Y H，ALBIG A R，REGNER M，et al. Fibulin⁃5 initi⁃
表达量降低，其中 MMP⁃9 显著降低，进而通过免疫
ates epithelial⁃mesenchymal transition（EMT）and enhances
荧光分析对 MMP⁃9 的降低再次进行了验证，认为 EMT induced by TGF⁃beta in mammary epithelial cells
WNT7b 可能通过抑制 MMP 表达，诱导 A375 细胞 via a MMP ⁃ dependent mechanism［J］. Carcinogenesis，
EMT的发生，从而促进细胞的迁移、侵袭。 2008，29（12）：2243-2251
综上所述，WNT7b可促进恶性黑素瘤细胞的转 ［13］ ALBITTAR A A，ALHALABI O，GLITZA OLIVA I C. Im⁃